Introducción. La mayoría de las personas con enfermedad de Chagas desarrolla anticuerpos específicos contra Trypanosoma cruzi. En la infección temprana se producen anticuerpos IgM contra T. cruzi que son reemplazados por IgG durante el curso de la enfermedad. Los primeros síntomas de la enfermedad suelen ser muy leves y atípicos, por lo que a menudo no se detecta en la fase aguda.Objetivos. Evaluar la sensibilidad y la especificidad clínica y analítica, la precisión y la eficacia del UMELISA CHAGAS® con la incorporación de nuevos péptidos sintéticos en la fase sólida representativos de la proteína SAPA (Shed Acute Phase Antigen) y del antígeno TSA (Trypomastigote Surface Antigen).Materiales y métodos. Se evaluó un panel de desempeño de título mixto anti-T. cruzi y uno de seroconversión de Chagas, así como muestras de suero positivas y negativas provenientes de zonas endémicas de la enfermedad y muestras positivas de otras enfermedades que podían interferir con la prueba. Las pruebas Bioelisa CHAGAS, Chagatest ELISA recombinante v. 4.0, Chagatest HAI y SD BIOLINE CHAGAS Ab Rapid, se emplearon como referencia.Resultados. Los porcentajes de sensibilidad y especificidad clínica fueron de 97,73 % (IC95% 96,23-99,24) y 99,33 % (IC95% 98,88-99,78), respectivamente. Se obtuvo un 98,96 % de eficacia y una buena precisión.Conclusiones. Los resultados demuestran que la nueva fase sólida del UMELISA CHAGAS® puede utilizarse para el inmunodiagnóstico, la certificación de sangre y la vigilancia epidemiológica en países endémicos y no endémicos con población de alto riesgo.
Spleen cells from BALB/c mice immunized with free native human chorionic gonadotropin hormone beta-subunit (beta hCG) were fused with mouse myeloma cells (P3/X63-Ag8) and one hybridoma secreting monoclonal antibodies (MAbs), was obtained. This hybridoma specifically recognizes beta hCG and does not cross-react with other human glycoprotein hormones, such as luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH), thyroid-stimulating hormone (TSH), and human chorionic gonadotropin (hCG). The MAb was of the IgG(1) subclass and ascitic fluid from this hybridoma was purified by affinity chromatography on Protein A-Sepharose CL-4B column to isolate the IgG(1) active fraction. The affinity constant of this MAb was 1.5 x 10(10)M(-1).
Para el diagnóstico del virus de la hepatitis C, se utilizan las pruebas de Elisa, debido a su sensibilidad y especificidad. Gran parte de estas pruebas se basa en el empleo de péptidos sintéticos y, en la actualidad, de péptidos quiméricos. En este estudio se sintetizó un péptido quimérico que comprende secuencias inmunodominantes de las regiones no estructurales NS4 y NS5 del virus de la hepatitis C. El péptido representativo de las dos secuencias está separado por un brazo espaciador de dos residuos de glicina. El péptido se evaluó como antígeno en un ensayo UMELISA, utilizando muestras positivas (n=30), muestras negativas (n=40) y el panel de Boston Biomedica Inc. (n=40). Los resultados del péptido quimérico NS41 NS5 se compararon con los resultados de los péptidos individuales NS4 y NS5 y con la mezcla de estos dos péptidos. Los resultados de los péptidos individuales coinciden con los datos informados en la literatura. Con la mezcla de los péptidos, no aumentó la detección de muestras positivas, pero con el péptido quimérico se logró aumentar la sensibilidad.Palabras clave: péptidos sintéticos, péptidos quiméricos, VHC, NS4, NS5, UMELISA Evaluation of a chimeric peptide NS4 and NS5 for HCV antibody detection Elisa tests are widely used for the diagnosis of hepatitis C virus infection because of their sensitivity and specificity Most of the Elisas are based on the use of synthetic peptides. At present, chimeric peptides are being used. In the present study, a chimeric peptide with immunodominant sequences of the NS4 and NS5 nonstructural regions of the hepatitis C virus was synthesized. The representative peptide of the two sequences was separated by a glycineglycine spacer.The peptide was tested as antigen in an UMELISA assay, using positive samples (n=30), negative samples (n=40) and a panel from Boston Biomedica Inc. (n=40). Results from the NS4 and NS5 chimeric peptide were compared with the results from the NS4 and NS5 individual peptides and with the mixture of these two peptides. Results of individual peptides coincide with those previously reported. The mixture of the two peptides did not increase the detection of positive samples, but the chimeric peptide increased sensitivity,
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.