Evaluación de un péptido quimérico NS4/NS5 para la detección de anticuerpos contra VHC

Abstract

Para el diagnóstico del virus de la hepatitis C, se utilizan las pruebas de Elisa, debido a su sensibilidad y especificidad. Gran parte de estas pruebas se basa en el empleo de péptidos sintéticos y, en la actualidad, de péptidos quiméricos. En este estudio se sintetizó un péptido quimérico que comprende secuencias inmunodominantes de las regiones no estructurales NS4 y NS5 del virus de la hepatitis C. El péptido representativo de las dos secuencias está separado por un brazo espaciador de dos residuos de glicina. El péptido se evaluó como antígeno en un ensayo UMELISA, utilizando muestras positivas (n=30), muestras negativas (n=40) y el panel de Boston Biomedica Inc. (n=40). Los resultados del péptido quimérico NS41 NS5 se compararon con los resultados de los péptidos individuales NS4 y NS5 y con la mezcla de estos dos péptidos. Los resultados de los péptidos individuales coinciden con los datos informados en la literatura. Con la mezcla de los péptidos, no aumentó la detección de muestras positivas, pero con el péptido quimérico se logró aumentar la sensibilidad.Palabras clave: péptidos sintéticos, péptidos quiméricos, VHC, NS4, NS5, UMELISA Evaluation of a chimeric peptide NS4 and NS5 for HCV antibody detection Elisa tests are widely used for the diagnosis of hepatitis C virus infection because of their sensitivity and specificity Most of the Elisas are based on the use of synthetic peptides. At present, chimeric peptides are being used. In the present study, a chimeric peptide with immunodominant sequences of the NS4 and NS5 nonstructural regions of the hepatitis C virus was synthesized. The representative peptide of the two sequences was separated by a glycineglycine spacer.The peptide was tested as antigen in an UMELISA assay, using positive samples (n=30), negative samples (n=40) and a panel from Boston Biomedica Inc. (n=40). Results from the NS4 and NS5 chimeric peptide were compared with the results from the NS4 and NS5 individual peptides and with the mixture of these two peptides. Results of individual peptides coincide with those previously reported. The mixture of the two peptides did not increase the detection of positive samples, but the chimeric peptide increased sensitivity,