This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre ≥ 1:64), and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6%) by IFAT and in 14 (3.5%) by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre ≥ 1:16), T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15%) of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed to T. gondii.Keywords: Slaughterhouse, horses, Toxoplasma gondii, bioassay, indirect fluorescent antibody test, nested PCR-RFLP. ResumoO objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) para T. gondii (ponto de corte ≥ 64), e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6%) equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5%) cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte ≥ 16) e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15%) amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.

The current study aimed to evaluate serology, and isolate and genotype Toxoplasma gondii strains from pregnant dairy cows, slaughtered in an abattoir for human consumption, and their fetuses. Blood from 60 pregnant dairy cows and blood and tissue samples (brain, lung, heart, and liver) from their fetuses were collected and analyzed in a mouse bioassay. Antibodies against T. gondii were observed in 48.3% of cows and 3.7% of fetuses (IFAT, titers ≥ 50 for cows and 25 for fetuses were considered positive). Fourteen fetuses (23.3%) and six cows (10.0%) were identified as positive in the bioassay. T. gondii was isolated from a blood sample of a cow older than 4 years old in the 6th month of pregnancy, and from a blood sample of a fetus in the 6th month of gestation. These isolates were identified by polymerase chain reaction (PCR) as being of T. gondii and both strains showed type II alleles for all PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) markers tested. T. gondii type II strain from cattle was isolated for the first time in Brazil. The current study also showed that transplacental transmission of T. gondii naturally occurs in dairy cows (23.3%) from Southern Brazil.

The objective of this study was to investigate the presence of Trichinella spp. in the musculature and anti-Toxoplasma gondii and anti-Leptospira spp. antibodies in the serum of equidae slaughtered at two abattoir-cold storage facilities licensed by the brazilian Federal Inspection Service. Masseter muscle and blood samples were collected from 398 animals of both sexes and different ages originating from six different Brazilian states. The serum samples were subjected to the Indirect Fluorescence Antibody Test for T. gondii (IFAT ≥ 64) obtaining 46 (11.6%) samples reagent. For Leptospira spp. antibody quantification, the serum samples were tested by microscopic seroagglutination test (MAT ≥ 100), and 123 (30.9%) reagent results were obtained. It was possible to identify the most likely infecting serovar in 95 samples (77.2%): Hardjo (26.3%) and Autumnalis (12.6%) were the ones most prevalent. None of the 398 masseter muscle samples analyzed revealed any presence of Trichinella spp. larvae. The slaughtered equidae that were investigated were probably exposed to the etiologic agents of toxoplasmosis and leptospirosis, but they did not present Trichinella infection. Key words: Slaughterhouse, equidae, Toxoplasma gondii, Leptospira, Trichinella ResumoO objetivo deste estudo foi investigar a presença de Trichinella spp. na musculatura e anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Leptospira spp. em soro de equídeos abatidos em dois matadourosfrigoríficos com serviço de Inspeção Federal. Amostras de músculo masséter e sangue foram coletados de 398 animais de ambos os sexos e várias idades, provenientes de seis diferentes estados brasileiros. As amostras de soro foram submetidas à Reação de Imunofluorescência Indireta para T. gondii (IFI ≥ 64) obtendo 46 (11,6%) amostras reagentes. Para Leptospira spp. as amostras de soro foram testadas pelo teste de soroaglutinação microscópica (MAT ≥ 100) e 123 (30,9%) amostras foram reagentes. Foi possível identificar o sorovar mais provável em 95 amostras (77,2%) sendo Hardjo (26,3%) e Autumnalis (12,6%) os mais encontrados. Nenhuma das 398 amostras de músculo masséter analisados revelou qualquer presença de larvas de Trichinella spp. Os equídeos destinados ao abate que foram investigados, provavelmente foram expostos aos agentes da toxoplasmose e leptospirose, porém não apresentaram infecção por Trichinella.

Toxoplasma gondii is a protozoan parasite recognized as an important public health problem. The objective of the present study was to evaluate the occurrence of anti-T. gondii antibodies in pregnant and non pregnant zebus' breed beef cows (Bos indicus), their fetuses, killed at an abattoir in northern of Paraná state. In the present study 169 cows were evaluated, 92 pregnant (in different stages of gestation) and 77 non pregnant. Sero-occurrence of anti-T. gondii antibodies was performed by Indirect fluorescent antibody test (IFAT) considering positive animals with titers ≥ 50 for cows and ≥ 25 for fetuses. Blood (with EDTA) from pregnant cows and blood and tissue samples (brain, lung, heart, and liver) from their fetuses were collected and used for mouse bioassay. Antibodies against T. gondii were observed in 26.0% of cows and 2.5% of fetuses. There was no statistical difference when prevalence of toxoplasmosis was compared between pregnant (23.9%), and non-pregnant (28.6%) animals, and age of gestation (p > 0.59). However, the occurrence of anti-T.gondii antibodies increased with age of animals (p=0.004). Mouse bioassay showed three fetuses positives (3.2%), however, none T. gondii strain was isolated. The present study showed that transplacental transmission of T. gondii naturally occurs in zebu beef cows from Brazil, however, in low rate (5.4%). The anti-T. gondii antibodies occurrence increase with the age of animals, which could be related to the fact that main transmission in cattle T. gondii is horizontal. Key words: Toxoplasmosis, zebu, vertical transmission ResumoToxoplasma gondii é um protozoário reconhecido como um dos mais importantes parasitas em saúde pública. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos contra T. gondii em vacas de corte zebuínas (Bos indicus) gestantes, e seus fetos, bem como, em vacas não gestantes abatidas em um matadouro no norte do Paraná. No presente estudo foram avaliadas 169 vacas, 92 prenhas (em diferentes fases de gestação) e 77 não prenhas. A ocorrência de anticorpos contra T. gondii foi realizada por meio da reação de imunofluorescência indireta (IFI) considerando animais positivos aqueles com títulos ≥ 50 para as vacas e ≥ 25 para os fetos. Sangue (EDTA) de vacas prenhas e amostras de sangue e tecidos (cérebro, pulmão, coração, e fígado) de seus fetos foram coletadas e utilizadas para o bioensaio em camundongos. Anticorpos contra T. gondii foram observados em 26,0% das vacas e em 2,5% dos fetos Não houve diferença quando a soropositividade de anticorpos foi comparado entre vacas gestantes (23,9%), e não gestantes (28,6%), bem como, a idade da gestação (p > 0,59). No entanto, a ocorrência de anticorpos aumentou com a idade dos animais (p = 0,004). O bioensaio mostrou três fetos positivos (3,2%), porém, nenhuma cepa foi isolada. O presente estudo mostrou que a transmissão transplacentária de T. gondii ocorre naturalmente em vacas de corte zebuínas do Brasil, no entanto, esta ocorrência foi baixa (5,4%). A maior ocorrência de anticorpos a...

Rearing free-range chicken is based on grazing feeding patterns, and these animals could be potential environmental contaminants of Cryptosporidium oocysts for humans and other animals. Therefore, the present study aimed to evaluate the molecular prevalence of Cryptosporidium spp. in free-range chickens from Brazil. A total of 351 fecal samples from chickens were examined from 20 farms. For detection of Cryptosporidium spp., 18S rRNA gene fragments were amplified using a nested PCR reaction. Positive samples were sent for sequencing. The overall prevalence of Cryptosporidium was 25.6% (95% CI = 21.2% -30.6%). Sequencing of the amplified fragments allowed for the identification of three species: C. meleagridis in 57 (62.6%), C. baileyi in 15 (16.4%), C. parvum in 3 (3.2%) samples, and a new Cryptosporidium genotype (C. genotype BrPR1) in 3 (3.2%) samples. Cryptosporidium genotype BrPR1 has not yet been classified as a species, and its host spectrum is not known. Cryptosporidium, including zoonotic species, exists at a high prevalence in free-range chickens within the region studied.Keywords: Cryptosporidiosis, zoonosis, public health, epidemiology. ResumoA criação de galinhas no estilo colonial/caipira é baseada em padrões de alimentação de pastagem, o que as torna potenciais contaminantes ambientais de oocistos de Cryptosporidium para humanos e outros animais. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência molecular de Cryptosporidium spp. em galinhas criadas em sistema colonial/caipira. Um total de 351 amostras de fezes de frangos foram examinadas em 20 fazendas. Para a detecção de Cryptosporidium spp., os fragmentos do gene rRNA 18S foram amplificados utilizando-se a reação de nested-PCR. A prevalência global de Cryposporidium foi de 25,6% (IC 95% = 21,2% -30,6%). O sequenciamento dos fragmentos amplificados permitiu a identificação de três espécies que infectam aves: C. meleagridis em 57 (62,6%), C. baileyi em 15 (16,4%), C. parvum em 3 (3,2%) amostras, bem como, um novo genótipo de Cryptosporidium (C. genótipo BrPR1) foi identificado em 3 (3,2%) amostras. Cryptosporidium genotipo BrPR1 não foi ainda classificado como uma espécie, e seu espectro de hospedeiros é desconhecido. O presente trabalho permitiu concluir que Cryptosporidium, incluindo espécies zoonóticas, existe com alta prevalência em galinhas criadas em sistema colonial/caipira na região estudada.Palavras-chave: Criptosporidose, zoonoses, saúde pública, epidemiologia.