RESUMEN:Pseudomonas aeruginosa es un microorganismo, oportunista de humanos, comúnmente aislado de infecciones nosocomiales. Es difícil de tratar por su inherente resistencia a varios antibióticos y por su rápida adquisición de genes de resistencia. En los últimos años han sido reportados aislados multiresistentes de P. aeruginosa con genes que codifican enzimas que confieren resistencia a los carbapenemes: las metalo-β-lactamasas (MBLs). Estos genes, comúnmente, se encuentran localizados en integrones. El objetivo del estudio fue identificar genes que codifican metalo-β-lactamasas (MBLs) y su ubicación en integrones clase 1 en aislados clínicos de P. aeruginosa. Se colectaron 129 aislados clínicos en Zurita&Zurita Laboratorios entre enero de 2005 a diciembre de 2008. La detección de genes que codifican MBLs se realizó por PCR, amplificando los genes mayormente diseminados entre bacilos Gram negativos no fermentadores productores de MBLs y encontrados en Latinoamérica: blaV IM , bla IMP y bla SPM. La ubicación de estos genes en integrones clase 1 fue determinada por PCR anidado. De los 129 aislados analizados, 46 aislados fueron resistentes a carbapenemes. De los 46 aislados resistentes 34 (73,9%) presentaron genes que codifican MBLs y el 14,7% estuvieron ubicados en integrones clase 1. Fue evidente la alta prevalencia de genes productores de MBLs en la población estudiada.
Objetivo: Determinar los mecanismos de resistencia antibiótica y la epidemiología molecular de aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae resistentes a carbapenémicos.Materiales y métodos: 30 aislados multirresistentes de K. pneumoniae fueron obtenidos a partir de: urocultivo, aspirado traqueal, secreción de herida, sonda vesical, hemocultivo, líquido peritoneal, punta de catéter, colección abdominal y secreción bronquial. Los aislados fueron colectados de noviembre de 2012 a abril de 2013. La identificación y susceptibilidad antibiótica fue determinada por el sistema automatizado VITEK 2. Para la amplificación de genes de resistencia se empleó PCR, la determinación de las Secuencias Tipo (ST) fue obtenida por tipificación multilocus de secuencias (MLST) y la relación clonal fue establecida por electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE).Resultados: Todos los aislados mostraron fenotipos multirresistentes, excepto a colistina y tigeciclina. El 100% de los aislados fue productor de la carbapenemasa KPC-2. La determinación de la presencia de genes codificantes de β-lactamasas de Espectro Extendido mostró que el 67% de los aislados fue positivo para el gen blaCTX-M, el 100% fue positivo para el gen blaSHV y 93% fue positivo para el gen blaTEM. El análisis de la relación clonal de los 30 aislados agrupó a 20 en un mismo pulso tipo. El análisis por MLST demostró que la ST predominante fue ST258 presente en el 60% de la población, seguida de ST1199 presente en el 20% de la población analizada.Conclusiones: Los resultados obtenidos demuestran la importancia de implementar y combinar estudios epidemiológicos, clínicos y moleculares para comprender la distribución de la resistencia entre bacterias de interés clínico.
La resistencia bacteriana a antibióticos representa un grave problema de salud pública. Pseudomonas aeruginosa tiene gran relevancia debido a su alta incidencia en infecciones asociadas al cuidado de la salud. La patogenicidad de P. aeruginosa se intensifica debido a: su resistencia intrínseca o adquirida a varios agentes antimicrobianos, y al encontrarse asociada a plataformas génicas móviles como plásmidos o transposones; lo cual deriva en el surgimiento de cepas multirresistentes. Los aminoglucósidos representan un grupo de antimicrobianos fundamental en la terapia de infecciones cuyo agente etiológico es P. aeruginosa. El objetivo de este estudio fue detectar la presencia de genes que codifican enzimas modificadoras de aminoglucósidos (EMAs) en aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa. Se analizaron 78 aislados resistentes a aminoglucósidos provenientes de varios hospitales en Quito, Ecuador. La confirmación de la especie se realizó mediante la amplificación del gen oprL. Los genes codificantes de EMAs reportados con mayor frecuencia en Pseudomonas aeruginosa son: aac(3) IIa, aac(6’)-Ib, ant(2’’)-Ia, aph(3’)-VIa. Estos genes fueron detectados mediante PCR empleando iniciadores específicos. El 64,10 % de aislados de la población de estudio presentaron genes EMAs. Los genes con mayor prevalencia fueron aac(3)-IIa, aac(6’)-Ib y ant(2’’)-Ia. Los perfiles de genes EMAs más prevalentes fueron las combinaciones aac(3)-IIa y aac(6’)-Ib / ant(2’’)-Ia, lo cual concuerda con sus perfiles fenotípicos de resistencia. Este estudio nos permite reconocer la relación entre la resistencia a los aminoglucósidos y los mecanismos de resistencia relacionados con genes productores de enzimas modificadoras de aminoglucósidos (EMAs).
RESUMEN.-Los integrones son estructuras observadas con frecuencia en bacilos Gram negativos, especialmente entre los miembros de la familia Enterobacteriaceae. Se estudió la presencia de integrones clase 1 y su relación con la resistencia bacteriana. La presencia de integrones fue estudiada por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y secuenciación. Se analizaron treinta aislados resistentes a carbapenemes de Klebsiella pneumoniae que fueron positivos para el gen de la integrasa 1 (intI1). En veintiseis de estos aislados se amplificaron regiones variables de alrededor de 2 000 pares de bases. El patrón común de genes obtenidos mediante el análisis de estas regiones fue (dfrA12 -orfF -aadA2). La presencia de estas plataformas que promueven la diversidad genética provee a las bacterias de resistencia a una amplia gama de antibióticos. La alta prevalencia de integrones observadas entre estos aislados funciona como fuente de difusión de determinantes de resistencia. PALABRAS CLAVES:carbapenemes,genes casete, integrones clase 1, Klebsiella pneumoniae, resistencia antibió-tica.ABSTRACT.-Integrons are structures frequently observed in Gram negative bacilli, especially among members of the Enterobacteriaceae family. The presence of class 1 integron and the relationship with bacterial resistance were studied. The integron presence was investigated by polymerase chain reaction (PCR) and sequencing. Thirty carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae isolates were analyzed and were positive for the intI1 gene. Twenty six of these isolates amplified variable regions about 2000 base pairs. The common pattern of genes was (dfrA12-OrfF-aadA2). The presence of these platforms that promote genetic diversity gives resistance a broad range of antibiotics. The higher integron prevalence in this isolates functions as source for dissemination of resistance determinants.
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