INTRODUZIONEL'emocoltura è un esame di laboratorio fondamentale, quando si sospetti la presenza di una batteriemia o di una sepsi, per la diagnosi dell'agente patogeno e per impostare una terapia antibiotica efficace. La rapida identificazione e l'antibiogramma dei germi presenti nel torrente circolatorio facilita molto il recupero della salute da parte dei pazienti: soggetti debilitati o immunologicamente compromessi per neoplasie o altre gravi malattie sistemiche ricevono un grande aiuto da terapie tempestive e mirate (5, 6, 10). È noto tuttavia che l'indagine emocolturale presenta alcuni limiti (8): 1) il tempo intercorrente tra il prelievo e l'emissione dei referti è spesso eccessivo rispetto alla gravità delle condizioni cliniche; 2) nessun mezzo di coltura è valido per tutti i potenziali microrganismi patogeni e alcuni richiedono un'incubazione particolarmente prolungata; 3) i falsi negativi sono piuttosto frequenti nei pazienti sottoposti in precedenza a terapia antibiotica; 4) una singola emocoltura positiva non è sempre segno certo d'infezione (3). Il progresso tecnologico in questi anni ha permesso la commercializzazione di apparecchi automatici per il rilevamento continuo 24 ore su 24, della crescita batterica nei flaconi inoculati: ne è risultata una notevole riduzione del tempo necessario ad individuare i flaconi positivi, dai quali si procede a subcolture su terreni solidi, su cui, in genere entro 24 ore, si sviluppano le colonie da utilizzare per l'identificazione e l'antibiogramma (1, 7). Obiettivo del nostro lavoro è stato studiare la validità dell'utilizzo diretto del brodo d'emocoltura (in cui sia stata rilevata crescita di microrganismi) per l'identificazione e l'antibiogramma, prescindendo dalla pratica delle subcolture su terreno solido con conseguente riduzione (24 ore) dei tempi di attesa dei risultati. METERIALI E METODILo studio è stato effettuato nel periodo compreso tra febbraio e luglio 2009 presso il Laboratorio di Analisi Cliniche e Microbiologiche dell'Ente Ecclesiastico Ospedale Miulli di Acquaviva delle fonti su emocolture provenienti da pazienti ricoverati nei vari reparti. Il sangue venoso è stato prelevato in coincidenza dei picchi febbrili, con appositi flaconi d'emocoltura (BacT-ALERT FA aerobic e BacT-ALERT FN anaerobic) successivamente collocati a incubare a 37°C, nell'apparecchio BacT-ALERT 3D (bioMérieux): l'eventuale comparsa di CO 2 (prodotta dai microrganismi) all'interno di ciascun flacone viene rilevata dall'apparecchio che segnala una positività. Successivamente la procedura convenzionale prevede la semina del brodo contenuto in ciascun flacone resosi positivo, su terreni solidi idonei, sui quali dopo non meno di 24 ore, ottenute le colonie, è possibile procedere all'identificazione e antibiogramma. Abbiamo comunque proceduto tanto nel modo suesposto, quanto avviando in parallelo, dal momento della positivizzazione di ciascun flacone anche la seguente procedura: 1) allestimento di un vetrino dal mezzo di coltura, colorazione con il metodo di Gram e successiva comu...
Eziologia e frequenza di positività dei test microbiologici in un reparto di pneumologia SUMMARYThe support of microbiological diagnosis for the management of the lower respiratory tract infections is of great utility. It is known, however, that for a correct therapeutic approach is essential to obtain clinical data and images diagnostic. Sometimes, in fact, to important clinical symptoms can coincide with microbiological results little worth, or the isolation from a sputum of certain bacteria, can be an expression of colonization or trivial contamination.The objective of this work was to evaluate the frequency of bacterial species responsible for respiratory tract infections, through direct (culture) and indirect (serology) methods. Between October 2007 -October 2008, 192 sputum cultures were examined, from the Department of Pneumology and out-patients.The isolation of bacterial strains was performed by seeding samples on the following media (Dasit): Columbia blood Agar (A.) CNA, mannitol salt A., Wurtz lactose A., Sabouraud A., enriched chocolate A. + bacitracin. For serological tests, immunoassays in microplates (Vircell) were used. The data show that of 192 samples deriving from Department of Pneumology, 41 (22%) were positive, while among the out-patient samples, the percentage of positive cultures was 41% (20 positives on the total of 49 samples).The bacteria more frequently isolated in the department of Pneumology, was Pseudomonas aeruginosa (n.8) while in out-patients was Escherichia coli (n.8). Serological tests resulted positive for anti-Mycoplasma pneumoniae antibodies in 3 cases, and for anti-Chlamydia pneumoniae in one case, compared to 53 negative samples. The findings that over 75% of cultures have demonstrated negative results, is suggestive of an origin non-bacterial infections of the lower respiratory tract.Among the bacterial isolates are predominant "opportunistic bacteria" (46%) presumably responsible of nosocomial infections, while in the out-patients are Enterobacteriaceae the prevalent microrganisms isolated.
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