Pinus tecunumanii é uma das espécies tropicais mais importantes do gênero Pinus no Brasil. Este trabalho teve por objetivo desenvolver um protocolo de micropropagação para Pinus tecunumanii a partir de gemas apicais de plantas jovens mantidas em casa de vegetação. Para a assepsia foi avaliado o efeito de 0,05 ou 0,1% de cloreto de mercúrio em combinação com 0 ou 1 g L-1 de fungicida e NaOCl. O efeito de 2 ou 4 µM BA (6-benzil adenina) foi avaliado na multiplicação in vitro ao longo de três subcultivos. O efeito da adição de 1,5 g L-1 de carvão ativado foi avaliado no meio de alongamento. Para o enraizamento, o efeito dos sais WV5 meia força e de 20 g L-1 de sacarose foi avaliado em meio suplementado com 2.68 µM ácido naftaleno acético (ANA) e 0.44 µM BA. A assepsia dos explantes com 0,05% de cloreto de mercúrio, hipoclorito de sódio, com ou sem fungicida foi eficiente no estabelecimento in vitro de até 83,3% dos explantes. Em meio suplementado com 2 ou 4 µM BA ocorreu multiplicação de brotações adventícias e após o terceiro subcultivo, 70,83% dos explantes formaram novos brotos em meio suplementado com 2 µM BA, com uma média de 3,7 novos brotos por explante. Em meio suplementado com carvão ativado foi observado alongamento em 59,76% dos explantes, enquanto no meio sem carvão 33,33% dos explantes alongaram. Foi observado enraizamento em 14,8% dos explantes em meio suplementado com sais WV5.
A metodologia de camada fina de células foi utilizada com sucesso para indução de embriogênese somática em região do meristema apical de plantas de pupunha mantidas em casa-de-vegetação. O efeito de três fontes de carbono: sacarose, glicose e manitol na indução de embriogênese somática foi avaliado. Embriões somáticos foram observados após a indução apenas nos meios contendo sacarose ou glicose em igual proporção.Effect of carbon source on somatic embryogenesis of Bactris gasipaesThin cell layer of meristematic region was successfully used to induce somatic embryogenesis in greenhouse-grown plants of pejibaye. The effects of three sources of carbohydrates, sucrose, glucose and mannitol on induction of somatic embryogenic calli were evaluated. Somatic embryos were observed on media containing either sucrose or glucose.Index terms: Thin cell layer, Glucose, Sucrose
Functional genomics along with genetic transformation and plant regeneration are used to identify genes of interest, comprising essential tools to obtain plants with desired characteristics. In this study, we described an organogenesis and a genetic transformation protocol for Populus tremula x Populus alba clone 717-1B4 using roots. In the organogenesis experiments the PGRs zeatin, BA and kinetin at different concentrations were evaluated. The effect of explant age was evaluated and at 30 days “old” roots (6 months old) showed a higher regeneration rate when compared to “young” roots (2 months old). In the genetic transformation experiments kanamycin concentration, the use of sonication (SAAT), co-cultivation period and explant age were evaluated. Sonication positively affected transformation, while co-cultivation time did not interfere. Regarding explant age, no statistical differences were observed. Quantitative real-time PCR (qPCR) data showed that among the six transgenic plants evaluated, two presented two copies and the others only one copy of the gene. In this study, efficient protocols of organogenesis and genetic transformation for poplar roots are presented with a transformation efficiency of 58%.
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