The amino-acid sequence of chymopapain is presented. It was isolated from the latex of the fruits from the tropical species Carica papaya L. and is, besides papain and papaya proteinase , the third thiol proteinase from this source. The primary structure contains 218 amino-acid residues. It was deduced from sequence analysis of the native enzyme and of peptides obtained by tryptic, chymotryptic, peptic, thermolysinolytic and mild acidic hydrolysis. Out of a total of eight cysteine residues, six are involved in the formation of three disulfide bonds, the location of which has been established with the help of peptic and thermolysinolytic peptides and fragments, obtained by mild acidic hydrolysis. Chymopapain shares 126 identical amino-acid residues (58%) with papain and 141 (65%) with papaya proteinase , including the three disulfide bridges and the free cysteine in position 25, required for activity. Except some amino-acid residues in the substrate-binding site, all residues involved in the catalytic mechanism are conserved. The homology between papaya proteinases is discussed.
Die Thiol-Proteinasen aus dem Milchsaft von Carica papaya L. III. Die Primärstruktur des ChymopapainsZusammenfassung: Die Aminosäuresequenz des Chymopapains wird angegeben. Es wurde aus dem Milchsaft der Früchte der tropischen Art Carica papaya L. isoliert und ist nach Papain und Papaya-Proteinase die dritte Thiol-Proteinase aus dieser Quelle. Die Polypeptidkette enthält 218 Aminosäurereste. Ihre Primärstruk-tur wurde durch Sequenzanalyse des nativen Enzyms, sowie zahlreicher Pep tide erhalten, die durch tryptische, chymotryptische, peptische, thermolysinolytische und schwach saure Hydrolyse erhalten wurden. Von den insgesamt acht Cysteinresten sind sechs an der Bildung von Disulfidbrücken beteiligt, deren Lage mit Hilfe von peptischen und thermolysinoly tischen Peptiden, sowie von einem durch saure Hydrolyse erhaltenen Fragment bestimmt werden konnte.
Three thiol proteinases, namely papain, chymopapain and proteinase Ω were purified to homogeneity from the latex of Carica papaya L. During the purification procedure, the thiol function of the cysteinyl residues were protected either as mixed disulfides with cysteamine or 2-thiopyridone or as iS-sulphenylthiosulfate derivative or after blocking with pchloromercuribenzoic acid. In marked contrast with earlier publications, chymopapain also was found to be a monothiol proteinase as papain and proteinase Ω. The active sites of chymopapain and proteinase Ω could not be distinguished from that of papain neither by the analysis of the pH dependence of Κςχ/Κη nor by the examination of the pH dependence of the fluorescence emission spectra.
Die Thiol-Proteinasen aus dem Milchsaft vonCarica papaya L. I. Fraktionierung, Reinigung und vorl ufige Charakterisierung Zusammenfassung: Aus dem Milchsaft des Melonenbaumes (Carica papaya L.) wurden die drei Thiol-Proteinasen Papain, Chymopapain und Proteinase Ω isoliert und bis zur Einheitlichkeit gereinigt. W hrend der Aufarbeitung wurde die ThiolFunktion der Cysteinreste gesch tzt, und zwar durch Umwandlung in gemischte Disulfide mittels Cysteamin, 2-Thiopyridon, S-Sulphenylthiosulfat-Derivate oder durch Umsetzung mit p-Chloromercuribenzoes ure. Im Gegensatz zu fr heren Ver ffentlichungen erwies sich Chymopapain ebenfalls als Monothiol-Proteinase wie Papain und Proteinase Ω. Die aktiven Zentren von Chymopapain und Proteinase Ω konnten weder durch die pHAbh ngigkeit der kau/Km -Werte noch durch ihre Fluoreszenz-Emissionsspektren vom aktiven Zentrum des Papains unterschieden werden.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.