Recent years have brought great focus on the development of drug delivery systems based on extracellular vesicles (EVs). Considering the possible applications of EVs as drug carriers, the isolation process is a crucial step. To solve the problems involved in EV isolation, we developed and validated a new EV isolation method—low-vacuum filtration (LVF)—and compared it with two commonly applied procedures—differential centrifugation (DC) and ultracentrifugation (UC). EVs isolated from endothelial cell culture media were characterized by (a) Transmission Electron Microscopy (TEM), (b) Nanoparticle Tracking Analysis (NTA), (c) Western blot and (d) Attenuated Total Reflection Fourier-Transform Infrared Spectroscopy (ATR-FTIR). Additionally, the membrane surface was imaged with Environmental Scanning Electron Microscopy (ESEM). We found that LVF was a reproducible and efficient method for EV isolation from conditioned media. Additionally, we observed a correlation between ATR-FTIR spectra quality and EV and protein concentration. ESEM imaging confirmed that the actual pore diameter was close to the values calculated theoretically. LVF is an easy, fast and inexpensive EV isolation method that allows for the isolation of both ectosomes and exosomes from high-volume sources with good repeatability. We believe that it could be an efficient alternative to commonly applied methods.
Cholesterol jest prekursorem w syntezie witaminy D, kwasów żółciowych i hormonów sterydowych. Jego utlenione formy zwane oksysterolami są produktem pośrednim w syntezach, ale także regulują metabolizmem cholesterolu poprzez oddziaływanie na receptory komórkowe. Cholesterol jest ważnym składnikiem błon komórkowych. Oksysterole wykazują większą aktywność biologiczną niż sam cholesterol, mając działanie plejotropowe na różne typy komórek organizmu wywołują często przeciwstawne efekty. Oksysterole w przeciwieństwie do cholesterolu mogą przenikać barierę krew-mózg i wpływać na działanie układu nerwowego. Utlenione formy cholesterolu mogą oddziaływać na etiopatogenezę chorób nowotworowych. Podwyższony poziom oksysteroli w tkankach często towarzyszy wielu stanom patologicznym: jak cukrzyca, miażdżyca, demencja lub endometrioza. Utlenione formy cholesterolu mogą hamować lub aktywować różne komórki układu odpornościowego regulując procesami odpowiedzi immunologicznej w przebiegu chorób wirusowych i zapalnych.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.