Vírus do mosaico severo do caupi-CPSMV como molécula carreadora para a p28 do vírus da artrite-encefalite caprina-CAEV

Abstract

O vírus da Artrite-encefalite caprina (CAEV) pertence à família Retroviridae, gênero Lentivirus. O CAEV infecta caprinos do mundo inteiro causando artrite, encefalite, mamite, pneumonia e emagrecimento progressivo. Este trabalho mostra a formação de uma quimera construída através da mistura da p28 do CAEV com glutaraldeído e CPSMV, purificada por meio de cromatografia em biogel e sephadex G-150. As cromatografias foram monitoradas através de leituras em espectrofotômetro no comprimento de onda de 280nm, dos líquidos coletados nos tubos. Os picos contendo a quimera foram coletados e submetidos à eletroforese (SDS-PAGE), sendo assim evidenciada a banda correspondente à mesma. Grupos de camundongos swiss foram imunizados com o vírus quimérico (CPSMV + p28), com o vírus CPSMV purificado e com a proteína p28 do CAEV, utilizando o adjuvante de Freund incompleto. Os anticorpos específicos produzidos contra o CPSMV e p28 reconheceram a proteína quimérica em Western Blotting e em teste de ELISA. Os anticorpos contra o vírus quimérico apresentaram títulos mais elevados do que os anticorpos produzidos contra a p28, demonstrando que o vírus quimérico apresenta maior imunogenicidade do que a proteína p28 sozinha. Os resultados mostraram que o acoplamento covalente entre o CPSMV e a p28 do CAEV foi obtido com sucesso, originando uma molécula estável não comprometendo a estrutura do capsídeo do CPSMV. Desta forma, sugere-se que o CPSMV possa ser utilizado como molécula carreadora na produção de vacinas para vírus que infectam animais.

Imunogenicidade de proteínas do capsídeo do Cowpea severe mosaic virus (CPSMV)

“…Esses resultados demonstram o potencial do uso do CPSMV como vetor seguro de anígenos de doenças humanas/animais pouco imunogênicos para a produção de vacinas. Um reforço a essa afirmação é o trabalho de Souza et al (2005), os quais acoplaram covalentemente partículas do CPSMV à molécula p28 do vírus da artriteencefalite caprina (CAEV). Esse conjugado foi eficiente em induzir uma resposta imune contra a proteína p28.…”

“…Vírus que infectam plantas dotados de alta capacidade imunogênica podem ser usados como potenciais carreadores ou vetores de proteínas de menor poder imunogênico em sistemas conhecidos como apresentação de antígeno, nos processos de imunização (BRENNAN et al, 1999;GILLELAND JUNIOR et al, 2000;SOUZA et al, 2005;WAGNER et al, 2004). Dentre as vantagens do uso dos vírus vegetais para tal propósito pode-se destacar: os vetores podem ser multiplicados em casas de vegetação; rápida propagação do vírus na planta hospedeira (1-2 semanas); altos rendimentos das partículas virais (1-2 g/kg de tecido foliar); muitos vírus vegetais são termoestáveis (PORTA & LOMONOSSOFF, 1998) e, por não serem infecciosos para humanos e animais, constitui-se numa alternativa segura para processos de vacinação.…”