Trypanosoma cruzi: Agglutination activity of enzyme-treated epimastigotes

Update on Chagas disease in Venezuela: a review

“…The sera were tested by the direct agglutination test (DAT), the indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) following standard procedures (Vattuone & Yanovsky 1971, Voller et al 1975. Samples were considered positives to T. cruzi-infection when they showed titers ≥ 1:64 for DAT and IFAT and an optical absorbance > 0.2 for ELISA.…”

Estandarización de la técnica de aglutinación directa para el inmunodiagnóstico de la enfermedad de Chagas

“…Una de las tres técnicas más usadas para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas es la HAI, la cual se basa en la aglutinación de los antígenos del parásito con los anticuerpos presentes en el suero del individuo con enfermedad de Chagas. Este es el mismo principio de la técnica de aglutinación directa; la diferencia entre ambas es que la HAI usa como soporte de los antígenos de T. cruzi los eritrocitos de carnero y, la técnica de aglutinación directa, el parásito como tal (25,27).…”

“…Al hacerlo se obtuvo una concentración de parásitos óptima de 500 x 10 6 por ml, la cual fue similar a la de un estudio anterior en el que se usó una concentración de 600 x 10 6 parásitos por ml (27). Sin embargo, otros autores reportan el ajuste de la concentración de parásitos midiendo su absorbancia a 550 nm (32).…”

“…La técnica de aglutinación directa se hizo de acuerdo con lo reportado por Vattuone y Yanovsky (27), y De los Ríos, et al (28). Las muestras de suero se diluyeron en PBS 0,15 M (pH 7,2) y se colocaron en placas de 96 pozos con fondo en "U", y se hicieron diluciones seriadas (1/25, 1/50,1/100) para cada muestra (100 µl/pozo), al igual que en la prueba de HAI reportada por Briceño, et al (36).…”

“…Además, se ha observado buena sensibilidad y especificidad cuando se utiliza conjuntamente con otras técnicas inmunológicas y parasitológicas (27)(28)(29), y, dado que esta reacción detecta anticuerpos dirigidos contra antígenos de superficie del protozoo, brinda resultados positivos más precozmente que otras técnicas inmunológicas que identifican anticuerpos contra antígenos citoplásmicos (29). Debido a las amplias ventajas reportadas con el uso de esta técnica y al hecho de no ser invasiva, se ha empleado para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas, la leishmaniasis visceral y el "mal de cadera" de equinos causado por T. evansi (28)(29)(30)(31).…”