The Value of Direct Immunofluorescence on Proteinase-Digested Formalin-Fixed Paraffin-Embedded Skin Biopsies

Abstract

Direct immunofluorescence (DIF) on frozen tissue (DIF-F) is the method of choice for the identification of immune deposits present in skin and other tissues. DIF can also be performed on formalin-fixed paraffin-embedded tissue (DIF-P) after antigen retrieval with proteases and has proven to be of value in renal pathology. However, its utility in skin biopsies has not been fully examined. In this study, we performed DIF-P on 60 skin biopsies that comprised of bullous pemphigoid (n = 18), pemphigoid gestationis (n = 1), pemphigus (n = 7), linear IgA disease (n = 7), vasculitis (n = 20), lupus erythematosus (n = 3), and dermatitis herpetiformis (n = 4) cases. We compared the results of DIF-P with those of DIF-F from the same patients. The diagnostic features were found in 15 of 19 (79%) pemphigoid (bullous pemphigoid and pemphigoid gestationis), 3 of 7 (43%) pemphigus, 3 of 7 (43%) linear IgA disease, 14 of 20 (70%) vasculitis, 1 of 3 (33%) lupus erythematosus, and none (0%) of the dermatitis herpetiformis cases tested. Overall, DIF-P is less sensitive than DIF-F but seems to be a valuable technique that could aid in the diagnosis of vasculitides, immunobullous, and connective tissue disorders when fresh tissue is unavailable.

Lichen planus‐like lesion preceding bullous pemphigoid development after programmed cell death protein‐1 inhibitor treatment

“…We hypothesized that the preceding LP‐like lesion induced by PD‐1 inhibitor evoked the production of autoantibodies to epidermal BMZ. To confirm this, we performed a DIF assay of formalin‐fixed, paraffin‐embedded (FFPE) specimens biopsied from the LP‐like lesion after antigen retrieval, since DIF assays of FFPE specimens are useful for the detection of autoantibodies to epidermal BMZ 4 . DIF assay revealed IgG deposition at the epidermal BMZ (Fig.…”

Direct Immunofluorescence (Dif) Microscopy In Cutanous Small Vessel Vasculitis: A Single Institution Experiences

“…Daha önce bazı merkezlerde yapılan çalışmalarda, İD'lerden en az bir tanesinin bulunması pozitif kabul edildiğinde, kutanöz vaskülitlerde ve LKV'lerde değişken oranlarda (%20-%70,5) DİF pozitifliği bildirildi (6,8,(9)(10)(11)17). Tüm KV'ler için en düşük oran %20 ile Feasel ve arkadaşlarının geniş vaka serisi içeren (1318 vaka) çalışmasında tespit edilirken (6), en yüksek oran Guerraro ve arkadaşlarının 20 vaka analizinde %70 olarak tespit edilmiştir (17). Vaka sayısı 100'ün üzerindeki çalışmalarda tüm KV'ler değerlendirildiğinde DİF pozitifliklerinin %40'ı aşmadığı görüldü.…”

“…Literatür taramasında DİF bulgularının ağırlıklı olarak ya herhangi bir sınıflama yapılmadan KV başlığı altında ya da LKV ve HSP vasküliti olgularında değerlendirildiği görüldü (6,8,(9)(10)(11)17). Sınıflandırılmış bir şekilde KKV'lerin-de DİF çalışmalarının oldukça sınırlı sayıda olduğu tespit edildi (12,14).…”

“…Sınıflandırılmış bir şekilde KKV'lerin-de DİF çalışmalarının oldukça sınırlı sayıda olduğu tespit edildi (12,14). (6,8,(9)(10)(11)13,17). Çalışmalarda en çok depolanan immunglobülin IgA (%30.6, %34.5, %64.7), en çok depolanan İD C3 (%54.5, %80.4, %82.2) olarak bildirilmiştir (8,10,13).…”

Immunological methods for the diagnosis of oral mucosal diseases

“…For DIF, fresh frozen tissue is preferred compared with formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue, but DIF on trypsin digestion of formalin-fixed sections can be an alternative method when fresh frozen tissue is unavailable. [4][5][6] In addition, if only FFPE tissues are available, C3d or C4d immunohistochemistry (IHC) has also been considered as a valuable diagnostic tool for bullous pemphigoid (BP) and MMP. [7][8][9][10][11] IHC for C4d or IgG4 may be diagnostically useful in pemphigus, 10,12 and C4d IHC can be helpful in the diagnosis of pemphigoid gestationis.…”