The Effect of Hydrogen Peroxide on Glucose Oxidase from Aspergillus niger<sup>*</sup>

Kleppe, Kjell

doi:10.1021/bi00865a018

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“…This is consistent with the observation that glucose oxidase from A. niger is glycosylated (Swoboda and Massey, 1965;O'Malley and Weaver, 1972), a general characteristic of fungal extracellular enzymes. The hydrogen peroxide generated by glucose oxidase inactivates the enzyme, probably through the oxidation of methionine residues (Kleppe, 1966). This emphasizes the need for catalase or some other mechanism of removing the hydrogen peroxide.…”

Section: Gluconic Acidmentioning

confidence: 99%

Organic Acid Production by Filamentous Fungi

Magnuson

Lasure

2004

Advances in Fungal Biotechnology for Industry, Agriculture, and Medicine

228

162

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Section: Gluconic Acidmentioning

confidence: 99%

Organic Acid Production by Filamentous Fungi

Magnuson

Lasure

2004

Advances in Fungal Biotechnology for Industry, Agriculture, and Medicine

228

162

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“…Therefore, during the oxidation process, dioxygen is reduced towards hydrogen peroxide. The formation of H 2 O 2 leads to inhibition of the enzyme because it modifies the amino groups in the vicinity of the active center (Kleppe, 1966). The pH value and the temperature have also an effect on GOD performances.…”

Section: Properties Of the Enzymementioning

confidence: 99%

Performances of Enzymatic Glucose/O2 Biofuel Cells

Habrioux¹,

Servat²,

Tingry³

et al. 2011

Biofuel's Engineering Process Technology

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“…Os resultados obtidos no monitoramento do peróxido de hidrogênio gerado na oxidação da glicose, bem como os valores esperados considerando a atividade da enzima segundo o fabricante são mostrados na [18][19][20] , visto que o substrato (glicose) foi empregado em excesso. A forma reduzida da enzima é particularmente sensível à concentração de peróxido de hidrogênio e, em concentrações elevadas a enzima pode ser inativada por oxidação de grupos metionina nas proximidades ou no sítio ativo da enzima 18 .…”

Section: Monitoramento Da Reação Enzimáticaunclassified

“…A forma reduzida da enzima é particularmente sensível à concentração de peróxido de hidrogênio e, em concentrações elevadas a enzima pode ser inativada por oxidação de grupos metionina nas proximidades ou no sítio ativo da enzima 18 . Diversos aspectos relacionados à cinética de reações enzimáticas podem ser abordados.…”

Section: Monitoramento Da Reação Enzimáticaunclassified

“…Através das medidas nos instantes iniciais da reação é possível estimar a atividade enzimática. Ademais, outros conceitos podem ser abordados experimentalmente, como o efeito da concentração inicial de enzima e/ou substrato sobre a velocidade de reação e o efeito de diversos outros fatores sobre a atividade catalítica, como pH, temperatura, presença de ativadores ou inibidores 18 . Empregando-se sistemas de análises em fluxo com detecção por quimiluminescência é possível determinar o valor da constante de Michaelis-Menten para a reação enzimática 21 .…”

Section: Monitoramento Da Reação Enzimáticaunclassified

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Um experimento de análise em fluxo envolvendo reações enzimáticas e quimiluminescência

Leite¹,

Fatibello‐Filho²,

Rocha³

2004

Quím. Nova

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Recebido em 7/3/03; aceito em 13/8/03A FLOW ANALYSIS EXPERIMENT INVOLVING ENZYMATIC REACTIONS AND CHEMILUMINESCENCE. An experiment is proposed to introduce some fundamentals of flow analysis, chemiluminescence and kinetic monitoring of enzymatic reactions in undergraduate courses. Chemiluminescence detection is performed with a simple spectrophotometer equipped with a lab-made spiral flow cell constructed from a polyethylene tube. The hydrogen peroxide produced by the glucose oxidation in the presence of glucose oxidase is continuously monitored by the reaction with luminol in alkaline media in a flow injection system. The exercise allows also the discussion of important analytical features and the comparison with different optical methods of analysis.Keywords: chemiluminescence; flow analysis; enzymatic reactions. INTRODUÇÃOO desenvolvimento da Química e os trabalhos de interface com áreas correlatas têm gerado grandes desafios para o ensino desta ciên-cia. Um deles é a necessidade de incluir uma quantidade cada vez maior de conceitos, técnicas e informações importantes, sem que haja aumento do tempo dedicado às diferentes disciplinas. Uma alternativa para este problema é a proposição de experimentos que associem diferentes informações, permitindo explorar melhor o tempo disponível e, ao mesmo tempo, reduzir gastos. Essa estratégia também permite demonstrar que a compartimentalização da Química em diferentes áreas é artificial 1 , visto que a interpretação dos fenômenos com que o aluno se depara no dia-a-dia requer uma abordagem diferente, que utilize os conceitos químicos de maneira unificada e associada para seu entendimento. Os diferentes conceitos e técnicas introduzidos nas disciplinas de Química Analítica, por exemplo, são indispensáveis para a obtenção de informações relacionadas às outras disciplinas.Neste contexto, é proposto um experimento para alunos de graduação em Química e áreas correlatas, que permite introduzir conceitos relacionados à análise em fluxo, quimiluminescência, reações enzimáticas e cinética química. A reação de oxidação da glicose na presença de glicose oxidase (GOD) foi estudada através do monitoramento da quimiluminescência da oxidação do luminol pelo peróxido de hidrogênio produzido. Uma cela em espiral construída com tubo de polietileno e adaptada a um espectrofotômetro simples permite efetuar medidas por quimiluminescência com equipamentos usuais em laboratórios de ensino. QUIMILUMINESCÊNCIALuminescência é um termo empregado para descrever a emissão de radiação quando uma molécula ou átomo no estado excitado decai para o seu estado fundamental 2 . Os vários tipos de luminescência são caracterizados em função da fonte de energia empregada para se obter o estado excitado. Na quimiluminescência, a energia de excitação é proporcionada por uma reação química, sendo a emissão de radiação observada geralmente nas regiões do visível ou infravermelho próximo 3,4 . Esse processo pode ser simplificadamente representado pela Equação 1, onde A e B representam os reagentes, AB* o intermediár...

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