Recebido em 9/12/09; aceito em 3/8/10; publicado na web em 16/11/10 PERFORMANCE OF HYBRID MATRIX SiO 2 -CHITOSAN TO IMMOBILIZE MICROBIAL LIPASE FROM Candida rugosa. Lipase from Candida rugosa was immobilized by covalent attachment on hybrid SiO 2 -chitosan obtained by sol-gel technique. A comparative study between free and immobilized lipase was provided in terms of pH, temperature, kinetic parameters and thermal stability on the olive oil hydrolysis. The pH and temperature for maximum activity shifted from 7.0 and 45 °C for the free lipase to 7.5 and wide range of temperature (40-50 °C) after immobilization. Kinetics parameters were found to obey Michaelis-Menten equation and K M values indicated that immobilization process reduced the affinity of enzyme-substrate; however K d values revealed an increase of thermal stability of lipase.Keywords: immobilization; lipase; SiO 2 -chitosan.
INTRODUÇÃOOs processos que utilizam lipases são especialmente atraentes em função das diferentes aplicações desta enzima. [1][2][3][4][5][6][7][8][9][10][11][12][13][14] As lipases podem catalisar reações de hidrólise, esterificação e interesterificação, com extrema simplicidade de processo, qualidade superior do produto final e excelente rendimento.1,5-14 Para uma aplicação eficaz, é recomendado o uso da enzima na sua forma imobilizada. A imobilização da lipase tem um efeito benéfico na sua estabilidade, em função das interações físicas e químicas entre o suporte e as moléculas da enzima, auxiliando também na dispersão homogênea da enzima no meio, o que é essencial para a condução de reações. [8][9][10][11][12][13][14][15][16][17] Diferentes materiais naturais, sintéticos orgânicos, inorgânicos e híbridos com distintas características de tamanho, forma e densidade têm sido empregados para a imobilização de lipases.14-24 Entre esses, matrizes híbridas de natureza orgânica e inorgânica têm apresentado particular interesse comercial nos últimos anos, devido às suas diferentes características e aplicações.14-17 Diversos compostos orgânicos têm sido empregados na síntese destas matrizes, porém os biopolímeros se mostram promissores devido ao seu baixo custo, baixa toxicidade, biocompatibilidade e propriedades multifuncionais.14-24 Precursores silanos, tais como tetraetilortossilicato (TEOS) 14-22 e tetrametilortossilicato (TMOS), 23,24 têm sido amplamente empregados na síntese de matrizes híbridas e a biocompatibilidade destes precursores com diversos polímeros, tais como álcool polivinílico, 14-17 celulose, 18 carragenana 19 e quitosana, 20-23 é reportada na literatura. Quitosana, um biopolímero proveniente da desacetilação da quitina, é o segundo polímero mais abundante na natureza, depois da celulose.25-27 É um produto natural, de baixo custo, renovável e biodegradável, de grande importância econômica e ambiental. As principais fontes de obtenção deste biopolímero são carapaças de crustáceos, como caranguejo, lagosta, siri, camarão, que são resíduos da indústria pesqueira e a sua utilização reduz o impacto ambiental causado pe...