Standardization of the Electronic Counter of Blood Cells

Gabrieli, E. R.; Wertheimer, Mark

doi:10.1093/ajcp/36.3_ts.277

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“…5 In actual test, our preparation was highly suitable for this purpose. Latex and pollen suspensions used for standardization of electronic leukocyte counts may aggregate and clog the electronic counter, 3,5 but this leukocyte preparation never caused such a problem. Leukocytes in fresh preparations for quality control are usable for only 24 hours when stored at 4 C. 2 Stabilized erythrocytes 5 and platelets 6 have been successfully used for quality control in electronic counting of both types of cells before; the present report, to the best of our knowledge, appears to be the first description of a stabilized leukocyte suspension for quality control.…”

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A Preserved Leukocyte Preparation for Quality Control

Pinthanond

Petchclai

1975

Am J Clin Pathol

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Pinthanond, Damrong, and Petchclai, Bencha: A preserved leukocyte preparation for quality control. Am. J. Clin. Pathol. 63: 32-34, 1975. A preparation technic for stabilized leukocytes for quality control is described. Human leukocytes are separated from 5 ml. of blood using dextran; the erythrocytes are lysed with isotonic NH 4 C1-Tris buffer, pH 7.2. The washed leukocytes are resuspended in 50 ml. of cacodylate HCl buffer, pH 7.4. Five ml. of 2.5% glutaraldehyde were slowly added, and preservation is accomplished by storage overnight at 4 C. The washed leukocytes are resuspended in physiologic saline solution containing 1:1,000 sodium azide, then stored at 4 C and at room temperature. The preparations were highly stable at both temperatures for at least 3 months, as indicated by both manual and electronic leukocyte counts. (Key words: Quality control; Preserved leukocyte; Leukocyte count.) STANDARD LEUKOCYTE suspensions are needed as quality control for accurate electronic leukocyte counting. Latex particle, 3,7 pollen, 3 and commercial preparations of unspecified origin have been used for this purpose. A suspension of human leukocytes if made to be highly stable during simple and prolonged storage should serve the purpose well. The suspension is more similar to routine blood specimens, as the cells are similar in shape, size and composition. We describe here the method to prepare a stabilized leukocyte suspension which fits most of the requirements for quality control in blood cell counting.

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“…Latex particle, 3,7 pollen, 3 and commercial preparations of unspecified origin have been used for this purpose. A suspension of human leukocytes if made to be highly stable during simple and prolonged storage should serve the purpose well.…”

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A Preserved Leukocyte Preparation for Quality Control

Pinthanond

Petchclai

1975

Am J Clin Pathol

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“…Suitable red cell controls have been achieved by the use of glutaraldehyde-fixed red cells (Lewis and Burgess, 1966) and preserved human cells (Carville and Lee, 1969) and various artificial cell suspensions have been used such as polystyrene latex (Gabrielli and Wertheimer, 1961) Preliminary tests showed that yeast cells stored in formaldehyde/saline solution (10:90 v/v) were easily resuspended by gentle mixing, but thereafter sedimented quickly in the sample containers. It was found that the addition of Intradex to a final concentration of 10% raised the viscosity of the suspending fluid sufficiently to give a sedimentation rate of yeast cells similar to that of leucocytes.…”

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An artificial leucocyte control suspension

Lappin¹,

Sanderson²

1970

J Clin Pathol

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Erythrocytenmorphologische Untersuchungsmethoden

Boroviczény¹

1968

Blut Und Blutkrankheiten

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Ais erythrocytometrische Werte bezeichnen wir MeBwerte und weitere daraus errechnete Parameter des Erythrocyten, die uns uber Anzahl, GroBe, Form, Hiimoglobinbeladung usw. der Erythrocyten Auskunft geben. Die Erythrocytenzahl, der Hiimoglobingehalt, der Hiimatokritwert und der Erythrocytendurchmesser werden im allgemeinen mit Hilfe der zu beschreibenden Methoden bestimmt; aus den so erhaItenen MeBwerten errechnet man den Fiirbekoeffizienten, die Hiimoglobinkonzentration, das Erythrocyteneinzelvolumen und die Erythrocytendicke. Diese acht Parameter ergeben in ihrem Zusammenhang wichtige Hinweise, die differentialdiagnostische und prognostische SchluBfolgerungen ermoglichen. Weitere ErythrocytenmaBe, wie das mittlere Gewicht des Einzelerythrocyten, Erythrocytenoberfliiche usw. konnen ebenfalls ausgerechnet oder bestimmt werden, haben aber keine so groBe Bedeutung. Erythrocytenzahl Entnahme und Verdiinnung des BIutes Blutentnahme und Herstellung der Verdunnung sind im Prinzip fur siimtliche Ziihlmethoden gleich, weswegen wir sie vor der Besprechung der einzelnen Ziihltechniken abhandeln konnen. Die Zellzahl wird im venosen Blut oder im CapiIlarblut festgestellt, wobei es bei rich tiger Abnahmetechnik keinen wesentlichen Unterschied bedeutet, woher das Blut entnommen worden ist. Darauf, daB man bei der Abnahme des Capillarblutes aus dem Finger richtig einstechen muJ3 und den Finger nicht quetschen darf, braucht an dieser Stelle wohl nicht eingegangen zu werden. Wenig beachtet wird, daB es bei einzelnen schweren hiimolytischen Aniimien schon bei der Blutentnahme zu einer Hiimolyse kommen kann. Fur die Kammerziihlung wird das Bllt 1: 20 (Leukocytenzahl) oder 1 :200 (Erythrocytenzahl) verdunnt. Fur die Ziihlautomaten mussen Verdunnungen bis zu 1: 80000 hergestellt werden. Bei der Herstellung der Verdunnung konnen die ersten, manchmal wesentlichen Fehler, auftreten. Fur die Kammerziihlung, aber auch fur einzelne Blutkorperchenziihlautomaten werden immer noch mit Vorliebe Melangeur-Pipetten verwendet. Dabei sind diese Pipetten oft iiuBerst ungenau (DRUCKREY und FROMME fanden Abweichungen bis zu 272 % I). Naturlich sind die heute von renommierten Firmen in den Handel gebrachten Pipetten wesentlich genauer, aber immer noch lange nicht so genau wie die im folgenden beschriebenen Pipetten und dazu iiuBerst schwer kalibrierbar. Wegen der Ungenauigkeit der Melangeur-Pipette empfahl A. HEGEDUS, in leere Penicillinfliischchen (in die er noch 1-2 Glasperlen tat) 0,95 bzw. 9,95 ml Verdunnungslosung zu pipettieren und 0,05 ml Blut mit einer Blutzuckerpipette einzuspulen. Diese Methode hat den Vorteil, daB man mit handelsublichen, leicht K. Betke et al. (eds.),

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A Preserved Leukocyte Preparation for Quality Control

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An artificial leucocyte control suspension

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