Standardization and evaluation of ELISA for the serodiagnosis of amoebic liver abscess

Abstract

An ELISA test for the serological diagnosis of amoebic liver abscess (ALA) was standardized and evaluated in sera from three groups of patients: (1) three patients with diagnosis confirmed by isolation of the parasite, (2) thirty seven patients with diagnosis established by clinical findings and ultrasound studies and (3) seven patients whose diagnosis were established by clinical findings and a positive double immunodifusion test. Ninety one serum samples from healthy subjects and 22 from patients with other liver or parasitic diseases were also included in the study. The optimum concentration of Entamoeba histolytica antigen was 1.25 micrograms/ml and optimum dilutions of serum and anti-human IgG -alkaline phosphatase conjugate were 1:400 and 1:4000 respectively. The cut-off point of the ELISA test in this study was an absorbance value of 0.34. The test parameters were: sensitivity = 95.7%, specificity = 100%, positive predictive value = 100% and negative predictive value = 98.2%. The ELISA test was found to be of great use as a diagnostic tool for the establishment of amoebic etiology in patients with clinical supposition of ALA. The test could also be used for seroepidemiological surveys of the prevalence of invasive amoebiasis in a given population, since it allows the processing of a greater number of samples at a lower cost than other serological tests.

Historia del protozoo Entamoeba histolytica

“…La morbilidad y mortalidad han cambiado con el uso de nitroimidazoles, la ecografía desde los años 80 y el inmunodiagnóstico 7,8 .…”

“…Dobell y Laidlaw (1926) introdujeron un medio de cultivo mixto enriquecido con arroz como fuente de carbohidratos. Craig (1928-1931) basado en antí-genos obtenidos de trofozoitos en estas condiciones intentó desarrollar pruebas para el inmunodiagnóstico de amebiasis con especificidad baja por no contener antígenos puros 5, 8 .…”

Enfoque clínico y diagnóstico del absceso hepático

“…Se realizó un estudio prospectivo de corte transversal 15 , de evaluación de tecnologías diagnósticas, la prueba de referencia para el diagnóstico de E histolytica fue el ELISA 10 . Se tomó una población de sujetos con AH en el Hospital San Juan de Dios de Bogotá, analizados desde marzo de 1996 hasta diciembre de 1999.…”

“…Se han descrito las técnicas de hemoaglutinación indirecta 5 , inmunodifusión (ID) 6 , fijación del complemento 7 , contrainmuno-electroforesis 8 , inmunofluorescencia indirecta 9 y ELISA 10 . Por otra parte, el Western-Blot (WB), permite la detección de antígenos específicos de E histolytica, los cuales son reconocidos por sueros de individuos sintomáticos y asintomáticos evitando las reacciones cruzadas con otros parásitos intestinales 11 .…”

Diferenciación de Entamoeba histolytica y Entamoeba dispar en muestras de materia fecal por detección de adhesina de E. histolytica mediante ELlSA

“…Detección de anticuerpos contra E. histolytica por la técnica de ELISA Se realizó detección de anticuerpos anti-lgG contra E. histolytica en muestras de sangre de los pacientes positivos (17).…”