Spasmolytic and Antibacterial Activity of Two Citrus sinensis Osbeck Varieties Cultivated in Mexico

Abstract

Antibacterial activity on ATCC strains of Escherichia coli, Salmonella enterica, Salmonella enteritidis, and Salmonella choleraesuis and spasmolytic effect on contraction on rat ileum trips were determinate. Eight organic extracts (hexanic and methanolic) of albedo (mesocarp) and flavedo (pericarp) of two varieties (Valencian and National) of Citrus sinensis (L.) Osbeck of Yucatán, México, were studied. Additionally, chromatographic fingerprints were obtained and correlated with their pharmacological effects. MAN, MAV, and HFN extract caused inhibition against S. choleraesuis (MIC: 1000 µg/mL) and S. enteritidis (MIC: 1000 µg/mL). Regarding the spasmolytic effect, the Valencian extracts variety was more efficient on spontaneous contraction, HAV (Emax = 51.98 ± 1.98%), MAV (Emax = 35.98 ± 1.42%), HFV (Emax = 68.91 ± 4.14%), and MFV (Emax = 51.28 ± 2.59%), versus National variety, HAN (Emax = 43.80 ± 6.32%), MAN (Emax = 14.62 ± 1.69%), HFN (Emax = 64.87 ± 3.04%), and MFN (Emax = 31.01 ± 3.92%). Chromatographic fingerprints of HFV and HFN were found to have some similar signals that belong to monoterpenes, whereas for HAN and HAV similar signals were found belonging to fatty acids and triterpenoids. Methanolic extracts showed signals of (1) furfural, (2) furfural acetone (3) furfuraldehyde and (4) β–sitosterol compounds. Flavedo portion of C. sinensis possessed spasmolytic effect on rat ileum strips and antibacterial activity against Salmonella strains. This species is source for obtaining bioactive compounds with therapeutic potential in the treatment of infectious diarrhea.

Efecto espasmolitico y antibacteriano de la especie Bursera graveolens (Kunth)

“…Obtención del tejido Los roedores fueron sacrificados por dislocación cervical previa anestesia profunda con éter etílico (20 mL/kg; vía inhalatoria), a continuación se les realizó un corte a nivel abdominal que permitió el acceso al aparato digestivo, del cual se disectó el íleon y fue colocado en una caja de cultivo con solución fisiológica Ringer Krebs-Henseleit (RKH), la cual fue preparada el mismo día del experimento con la siguiente composición (mM): NaCl, 118; KCl, 4.7; CaCl2, 2.5; MgSO4, 1.2; KH2PO4, 1.2; NaHCO3, 25.0; EDTA, 0.026 y dextrosa, 11.1 en agua destilada, la cual fue ajustada a un pH ≈ 7.4 y se mantuvo a 37 °C y en constante burbujeo con una mezcla gaseosa de O2:CO2 (95:5%). A los segmentos de íleon se les removió el tejido adyacente, mucosidad y alimento, y posteriormente fueron cortados en segmentos de aproximadamente 5 mm de longitud (Sánchez-Recillas et al, 2017).…”

“…El efecto de los extractos, control y vehículo se determinó por comparación de los valores de tensión registrados antes y después de la adición de las muestras de prueba, considerando la actividad espontánea del íleon como el 100% de contracción (Sánchez-Recillas et al, 2017).…”

“…Las cajas fueron incubadas a 37 ± 1 ºC durante 24 h, transcurrido el tiempo se midió la zona de inhibición del crecimiento bacteriano alrededor del disco. Los resultados fueron expresados como el promedio de los mm de diámetro de inhibición bacteriana de tres repeticiones (Prabuseenivasan et al, 2006;Ramirez & Marin Castaño, 2009;Sánchez-Recillas et al, 2017).…”

“…En otros pozos se añadió el control positivo (amikacina; [12.5 μg/mL]), como control negativo se consideraron pocillos con caldo e inóculo bacteriano (1:1). Se utilizaron cuatro pocillos como blancos, en el primero se adicionó caldo (BC) y en los demás caldo + extracto (uno por cada concentración del extracto; BE1, BE3 y BE5) (Sánchez-Recillas et al, 2017).…”

“…Posteriormente al tiempo de incubación y para determinar si hubo inhibición del crecimiento bacteriano por la acción del extracto, se añadieron 100 μL de cloruro de INT (2-(4-yodofenil) -3-(4-nitrofenil) -5-feniltetrazolio) al 0.02% a la mezcla de reacción, y luego se incubó a 37 ± 1 ºC en agitación orbital durante 30 min. El cambio de coloración ocasionado por la interacción de los microorganismos con INT, se determinó mediante la medición de la absorbancia a 490 nm en un espectrofotómetro Multiskan ® ( Ramirez & Marin Castaño, 2009;Sánchez-Recillas et al, 2017).…”