Der 5a-Reduktion von A4-3-Ketosteroiden kommt in1 Wirkungsmechanisnius des mannlichen Sexualhormons Testosteron eine besondere Bedeutung zu. Die Affinitat zu Rezeptorproteinen der Zelle von Targetorganen liegt bei der 5a-reduzierten Verbindung hoher als beim Testosteron (BLONDEAU u. CARPECHOT 1974). Der Untersuchung der A4-3-Ketosteroid-5a-reduktase aus Saugetierorganen wird deshalb gegenwartig besondere Aufmerksamkeit gewidmet (GUSTAFSON u. PONSETTE 1974, SHI-MAZAKI et al. 1973. uber ein entsprechendes Enzym aus Mikroorganismen liegt bisher nur eine Mitteilung vor (GERMAIN et al. 1973). Aus Nocardia corallina konnte aus der 140000 x g Supernatante des Zellextraktes ein 5fach angereichertes Enzym erhalten werden. Bei der Fermentation von Progesteron mit Kulturen von Mycobacterium smegmatis fanden wir 5a-Dihydroprogesteron (SCHUBERT et al. 196 1) und ausgehend von A1.4-Androstadien-3,17-dion, 5a-Androstan-3,17-dion (HORHOLD 1966). Hs gelang nun, einen aktiven Enzyintrakt zu praparieren und daraus eine 5a-Reduktase anzureichern. E n z y m e x t r a k t : Submers kultivierte Zellen von M . smegmatis SG 98, suspendiert in 0,Ol M Phosphatpuffer pH 7,0 wurden durch Ultraschallbehandlung aufgeschlossen. Die 105000 x g Supernantante diente als Rohextrakt. Zur Priifung der Aktivitiit wurden zu 1,5 ml Enzymlosung (15 mg Protein) in 0,06 M Phosphatpuffer nach SORENSEN pH 7,O 10 pg [4-14C]4-Androsten-3,17dion (0,02 pCi) in 0,04 ml Methanol und 5 mg Na,S,O, in 0,l ml aqua dest. zugegeben und 30 min bei 28 "C inkubiert. Aus dem Chloroformextrakt wurde nach dunnschichtchromatographischer Auftrennung auf Kieselgel G, 2 x 17 cm, in Diisopropylather/Athanol 95 :5 die 5a-Verbindung abgetrennt und mit einem integrierenden Radiodunnschichtscanner quantitativ bestimmt. Na,S,O,, das unter den angegebenen Bedingungen selbst keine Reduktion des Steroids bewirkte, erhohte die enzymatische Aktivitat auf das 50fache.Folgende Steriode konnten zu 5a-Verbindungen umgewandelt werden : 4-Androsten-3,17-dion, 1,4-Androstadien-3,17-dion, 17B-Hydroxy-4-androsten-3-on (Testosteron), 17/?-Hydroxy-l,4-androstadien-3-on, 17B-Hydroxy-l,4,6-androstatrien-3-on, l7a-Methyl-17p-hydroxy-4-androsten-3-on, 17a-Methy1-17~-hydroxy-1,4-androstadien-3-on, 4-Chlor-17,8-hydroxy-4-androsten-3-on, 4-Chlor-17a-methyl-17~-hydroxy-1,4-androstadien-3-011, 17~-Hydroxy-4-ostren-3-on, 4-Pregnen-3,20-dion (Progesteron).Eine Doppelbindung in l-Stellung verursacht einen langsameren Hydrierungsverlauf. I m Rohextrakt lagen noch weitere steriodumwandelnde Enzymaktivitaten vor : A1-Dehydrogenase, Al-Reduktase, 17B-Hydroxysteroid-oxydoreduktase und 3a-Hydroxysteroid-oxydoreduktase. Unter den angegebenen Bedingungen ist die 5a-Hydrierung die bevorzugte Reaktion.