Simultaneous determination of ascorbic acid, aminothiols, and methionine in biological matrices using ion-pairing RP-HPLC coupled with electrochemical detector

Khan, Muhammad Imran; Iqbal, Zafar

doi:10.1016/j.jchromb.2011.07.013

Cited by 25 publications

(8 citation statements)

References 58 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Additionally, many GSSG measurements are based upon the reduction of the disulphide followed by measurement of GSH [24]. In order to avoid sample pretreatment some investigators have utilised electrochemical detection (ECD) to directly and simultaneously measure GSH and GSSG [25,26]. The sensitive nature of ECD lends itself to the analysis of GSSG which can be difficult to measure due to its low endogenous concentration.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Determination of cellular glutathione:glutathione disulfide ratio in prostate cancer cells by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

Childs

Haroune

Williams

et al. 2016

Journal of Chromatography A

View full text Add to dashboard Cite

A validated method has been developed for the simultaneous measurement of reduced and oxidized glutathione in de-proteinised cellular extracts. This has been used to compare models of malignant and non-malignant human prostate cell lines. Analysis of LNCaP and DU145 cells showed a glutathione to glutathione disulfide ratio of 8:1 and 32:1 respectively, whilst the control cell line, PZ-HPV7 displayed a ratio of 93:1. Results indicate that the more aggressive phenotype displays adaptation to increased oxidative stress via up regulation of glutathione turnover. It was also noted that in the LNCaP and DU145 cell line, glutathione was only responsible for ca. 60% and 79% respectively, of the total cellular reduced thiol; indicating the presence of other biological thiols.

show abstract

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Determination of cellular glutathione:glutathione disulfide ratio in prostate cancer cells by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

Childs

Haroune

Williams

et al. 2016

Journal of Chromatography A

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Нами також запропонований кінетичний метод диференційного визначення АК та цистеїну (Цис) [9] у сумішах, певним недоліком якого є довготривалість та складність визначення. Досі немає простих спектрофотометричних методик визначення АК у присутності тіолів [17][18][19][20][21][22]…”

Section: введенняunclassified

ВИЗНАЧЕННЯ АСКОРБІНОВОЇ КИСЛОТИ У СУМІШАХ З ЦИСТЕЇНОМ ІЗ ВИКОРИСТАННЯМ РЕАКЦІЇ ВІДНОВЛЕННЯ 18-МОЛІБДОДИФОСФОРНОГО ГЕТЕРОПОЛІКОМПЛЕКСУ У ПРИСУТНОСТІ ІОНІВ Bi(III)

Miekh¹,

Vishnikin²,

Tovstonog³

et al. 2020

J. of Chem. and Tech.

View full text Add to dashboard Cite

A spectrophotometric method was developed for the determination of ascorbic acid in mixtures with cysteine using the reduction of 18-molybdodiphosphate heteropoly complex. In order to decrease the influence of the 18molybdodiphosphate reduction with cysteine, the pH of the reaction was shifted to the acidic region to 1.0 -2.2. Under these conditions, in the presence of bismuth(III) ions, as a result of the formation of a metal-substituted heteropoly complex, the reaction rate of 18-molybdodiphosphate with ascorbic acid increases and, at pH from 1.8 to 2.2, the reduction reaction is completely shifted towards the formation of heteropoly blue and ends in less than 5 minutes. Cysteine in this pH region reacts with 18-molybdodiphosphate very slowly, but has an indirect effect on the reaction of ascorbic acid with 18-molybdodiphosphate, probably due to the binding of bismuth(III) ions. It was shown that the determination of ascorbic acid is possible with satisfactory accuracy if the excess of cysteine with respect to ascorbic acid does not exceed three times. The calibration graph for the determination of ascorbic acid at pH 1.8 and concentrations of 18-molybdodiphosphate and bismuth(III) 5•10 -5 mol•L -1 and 1•10 -4 mol•L -1 , respectively, is linear in the range from 2.5•10 -6 to 2.5•10 -5 with a detection limit of 8•10 -7 mol•L -1 (l = 5 cm). The accuracy of the method was evaluated by the added-found method on model mixtures. Анотація Розроблена спектрофотометрична методика визначення аскорбінової кислоти у сумішах із цистеїном з використанням реакції відновлення 18-молібдодифосфорного гетерополікомплексу. Для нівелювання впливу реакції відновлення 18-молібдодифосфату цистеїном рН реакції зміщений в кислу область до 1.0 -2.2. У цих умовах у присутності іонів бісмуту (III) внаслідок утворення металозаміщеного гетерополікомплексу швидкість реакції 18-молібдодифосфату з аскорбіновою кислотою підвищується і при рН від 1.8 до 2.2 реакція відновлення повністю зміщується у бік утворення гетерополісині і закінчується менш, ніж за 5 хв. Цистеїн у цій області рН реагує з 18-молібдодифосфатом дуже повільно, але спричиняє непрямий вплив на реакцію аскорбінової кислоти з 18-молібдодифосфатом, імовірно, за рахунок зв'язування іонів бісмуту (III). Показано, що визначення аскорбінової кислоти є можливим із задовільною точністю, якщо надлишок цистеїну не більш, ніж у три рази перевищує концентрацію аскорбінової кислоти. Градуювальний графік для визначення аскорбінової кислоти при рН 1.8 та концентраціях 18молібдодифосфату і бісмуту(III) 5•10 -5 моль/л та 1•10 -4 моль/л відповідно є лінійним в інтервалі від 2.5•10 -6 до 2.5•10 -5 з межею виявлення 8•10 -7 моль/л (l = 5 см). Правильність методики оцінено методом введенознайдено на модельних сумішах. Ключові Аннотация Разработана спектрофотометрическая методика определения аскорбиновой кислоты в смесях с цистеином с использованием реакции восстановления 18-молибдодифосфорного гетерополикомплекса. Для нивелирования влияния реакции восстановления 18-молибдодифосфата цистеином рН реакци...

show abstract

“…The nine compounds and the IS were separated within 25 min, and their LODs ranged from 0.6 to 25 ng/mL at an S/N ratio of 3. Furthermore, an ion-pairing reversed-phase-HPLC-ECD method was reported [67] in which total Cys, Hcy, and GSH were reduced by TCEP, and Met and ASA in human plasma and blood cell were determined with LODs of 60-80 pg/mL in a total analysis time of 20 min. More recently, Hannan et al reported an HPLC-ECD method for nine compounds and malondialdehyde in rabbit serum [68], allowing the endogenous antioxidant capacity and lipid peroxidation level to be monitored simultaneously.…”

Section: Electrochemical Detectionmentioning

confidence: 99%

HPLC Analysis of Homocysteine and Related Compounds

Wada¹,

Nakamura²,

Nakashima³

2018

Non-Proteinogenic Amino Acids

View full text Add to dashboard Cite

Homocysteine (Hcy), a sulfur-containing amino acid, is a representative intermediate metabolite of methionine (Met) to cysteine (Cys) via several intermediates. An elevated level of Hcy in plasma plays an important role in diseases such as neural tube defects and Down syndrome. Homocystinuria is the most common inborn error of sulfur metabolism and is caused by mutations in the metabolic enzymes of Hcy. These errors can be caused by abnormal levels of Met metabolites and classified on the basis of plasma Met levels. Additionally, Hcy and related compounds such as glutathione play an important role in maintaining homeostasis. Therefore, the simultaneous determination of Hcy and/or related compounds is required for appropriate clinical management of several diseases. The sulfur-containing amino acids and their derivatives in biological samples are quantified sensitively using high-performance liquid chromatography methods coupled with various detection methods such as UV/Vis, fluorescence, chemiluminescence, electrochemical, mass spectrometry, and tandem mass spectrometry. In this chapter, we review recent advances in these analytical methods and their applications.

show abstract

Simultaneous determination of ascorbic acid, aminothiols, and methionine in biological matrices using ion-pairing RP-HPLC coupled with electrochemical detector

Cited by 25 publications

References 58 publications

Determination of cellular glutathione:glutathione disulfide ratio in prostate cancer cells by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

Determination of cellular glutathione:glutathione disulfide ratio in prostate cancer cells by high performance liquid chromatography with electrochemical detection

ВИЗНАЧЕННЯ АСКОРБІНОВОЇ КИСЛОТИ У СУМІШАХ З ЦИСТЕЇНОМ ІЗ ВИКОРИСТАННЯМ РЕАКЦІЇ ВІДНОВЛЕННЯ 18-МОЛІБДОДИФОСФОРНОГО ГЕТЕРОПОЛІКОМПЛЕКСУ У ПРИСУТНОСТІ ІОНІВ Bi(III)

HPLC Analysis of Homocysteine and Related Compounds

Contact Info

Product

Resources

About