Rational development and validation of a new microbiological assay for linezolid and its measurement uncertainty

Abstract

The aim of this work was to develop and validate a new microbiological assay to determine potency of linezolid in injectable solution. 2(4) factorial and central composite designs were used to optimize the microbiological assay conditions. In addition, we estimated the measurement uncertainty based on residual error of analysis of variance of inhibition zone diameters. Optimized conditions employed 4 mL of antibiotic 1 medium inoculated with 1% of Staphylococcus aureus suspension, and linezolid in concentrations from 25 to 100 µg mL(-1). The method was specific, linear (Y=10.03X+5.00 and Y=9.20X+6.53, r(2)=0.9950 and 0.9987, for standard and sample curves, respectively), accurate (mean recovery=102.7%), precise (repeatability=2.0% and intermediate precision=1.9%) and robust. Microbiological assay׳s overall uncertainty (3.1%) was comparable to those obtained for other microbiological assays (1.7-7.1%) and for determination of linezolid by spectrophotometry (2.1%) and reverse-phase ultra-performance liquid chromatography (RP-UPLC) (2.5%). Therefore, it is an acceptable alternative method for the routine quality control of linezolid in injectable solution.

Study on Antibacterial of Chitosan/Hydroxyapatite Doped Magnesium Composite as a Material for Bone Graft Applications

“…Each sample has a different ability to inhibit the growth of various species of bacteria. The ability of the sample was measured based on the diameter of the formed inhibition zone [16]. At the next 48 hours of observation, the antibacterial activity of composite against E. coli decreased.…”

Doseamento microbiológico de neomicina e bacitracina - desenvolvimento e validação de método rápido em microplacas

“…Apesar de seus benefícios, os planejamentos fatorial e composto central raramente são utilizados no desenvolvimento de métodos microbiológicos. (HANRAHAN & LU, 2006;SRINUBABU et al, 2007;BEZERRA et al, 2008;SAVIANO et al, 2014).…”

Estimativa de incertezas de medições e suas aplicações nas análises de medicamentos

“…Gráficos de efeitos principais mostrando a influência do tipo de microrganismo, tipo de meio de cultura, volume de camada inoculada e proporção de inóculo no tamanho dos halos de inibição de crescimento. Adaptado de [47]. 94,08% 93,76% 93,38%…”

“…A Tabela 29 apresenta os resultados de validação, assim como as incertezas de medição para 4 métodos analíticos para quantificação de linezolida em formas farmacêuticas: a) método espectrofotométrico de absorção no UV [14]; b) método cromatográfico [12]; c) doseamento microbiológico por difusão em agar [47]; e d)…”

“…(A) Y em função do volume do meio de cultura (X1) e da proporção de inóculo (X2);(B) Y em função do volume de meio de cultura (X1) e das concentrações de linezolida (X2); e (C) Y em função da proporção de inóculo (X1) e das concentrações de linezolida (X2). Adaptado de[47].Usualmente, o tamanho dos halos de inibição é definido após um curto período de incubação, entretanto os halos de inibição podem ser visualizados somente após o crescimento microbiano por cerca de 18-24h. Galvão e colaboradores[48] propuseram método microbiológico rápido (Rapid Microbiological Method -RMM) para a determinação da potência de linezolida empregando cloreto de trifeniltetrazólio (TTC) como corante vital.…”