Rapid and sensitive detection of HIV-1 p24 antigen by immunomagnetic separation coupled with catalytic fluorescent immunoassay

Abstract

In this study, a system of magnetic beads (MBs) coupled with catalytic fluorescent immunoassay for rapid and sensitive determination of HIV-1 capsid antigen p24 was developed. p24 was captured by antibody immobilized MBs, and the detection antibody was linked to horseradish peroxidase (HRP) through biotin-streptavidin recognition, catalyzing the oxidation of o-phenylenediamine (OPD) and hydrogen peroxide to produce a fluorescent product. This is the first reported utilization of the fluorescence of OPD oxidation product catalyzed by HRP for immunoassay. Optimization of conditions afforded a low detection limit of 0.5 pg/mL (3σ) for p24 with a linear range of 1.4-90.0 pg/mL. The assay exhibited good reproducibility with a relative standard deviation (RSD) of 4.4 %, 4.7 %, and 5.0 % for detecting 1.4 pg/mL, 22.5 pg/mL, and 45.0 pg/mL p24, respectively. The assay can be completed in less than 90 min. Moreover, the proposed method was successfully applied to detect p24 in spiked serum. This method overcomes the interference of MBs to the fluorescence signal and demonstrated higher sensitivity for detection of p24 than conventional ELISA kits. The system could be applied for detecting other antigens with high sensitivity, rapidity, specificity, and simple operation. Graphical Abstract A rapid and sensitive biosensing method coupling immunomagnetic separation and catalytic fluorescence for determination of HIV-1 p24 has been developed.

Analysis of the Nine Year HIV/AIDS Results in Elazig Province

“…ID ID ID ID GİRİŞ "Acquired Immunodeficiency Syndrome" (AIDS), HIV virüsünün neden olduğu, perinatal, parenteral, enfekte kişilerle yakın temas ve cinsel ilişki yoluyla bulaşan, insan immün sistem hastalığıdır. HIV virüsü, enfeksiyonları önleme görevi olan immün sistemin CD4 pozitif T lenfositlerini yok ederek immün sistem hücrelerinin işlevlerini bozar ve asemptomatik taşıyıcılık durumundan ölümcül hastalıklara kadar değişen geniş bir klinik tablo ile seyredebilen bir enfeksiyona neden olur (1,2) . Bu enfeksiyona bağlı olarak meydana gelen AIDS ise başta pulmoner tüberküloz olmak üzere viral, bakteriyel, parazitik fırsatçı enfeksiyonlar, Kaposi sarkomu veya non-Hodgkin lenfoma gibi kanserlerle seyredebilir (3,4) .…”

Innovative gold-free carbon nanotube/chitosan-based competitive immunosensor for determination of HIV-related p24 capsid protein in serum

“…For this purpose, in the last years, several immunosensors aimed to the detection of p24 antigen were developed, [10][11][12] as alternative to the already available ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) kit.…”

Current Diagnostic Algorithm of HIV and Emerging Prevention Methods

“…Lipid zarf ile çevrili pozitif polariteli RNA'ya sahip olan viral partikül yaklaşık 110 nm çapındadır. Enfeksiyöz partiküller (virionlar) birbirinin aynısı olan, iki adet, 9-10 kb uzunluğunda, tek zincirli RNA içerirler (1,2) . Edinilmiş bağışıklık yetersizliği sendromu (Acquired Immunodeficiency Syndrome/AIDS) HIV'in neden olduğu insan immün sistem hastalığıdır ve enfeksiyonları önleme görevi olan immün sistemin CD4 (+) T lenfositlerini yok ederek immün sistem hücre-lerinin işlevlerini bozar (1,3) .…”

“…HIV enfeksiyonunun hızlı, doğru ve erken tanısı AIDS kontrolünde anahtar rol oynar (1) . Bu sayede ART erken başlanması ve düzenli takip ile HIV insidansının tespit edilmesinin yanı sıra, sonraki bulaşmalar ve hastalığın progresyonu önlenebilmekte, morbidite ve mortalitede azalma sağlanabilmektedir (12,13) .…”