Purificação de amiloglicosidase de Aspergillus niger

Abstract

ResumoNeste trabalho foram realizados testes para determinação das melhores condições de purificação da amiloglicosidase de Aspergillus niger NRRL 3122, usando cromatografia de troca iônica em coluna de leito fixo. Os testes de purificação foram conduzidos em coluna contendo resina aniônica DEAEcelulose. Para maximizar as condições de purificação foram testadas as variáveis velocidade de alimentação (46 e 8 cm/h) e temperatura de operação (25 e 10ºC). O melhor resultado foi observado quando empregou-se velocidade de alimentação de 8 cm/h e temperatura de 10°C, resultando num fator de purificação de 9,9 vezes e uma recuperação de 47,6%. Palavras-chave: DEAE-celulose. Enzima. Temperatura. AbstractIn this work, test were carried out to determine the best conditions for the purification of amyloglucosidase from Aspergillus niger NRRL 3122, using a fixed-bed ion exchange chromatography column. The tests were conducted in a purification column containing anion resin DEAE-cellulose. To maximize the purification conditions, were used as variable parameters feeding speed (46 and 8 cm/h) and operating temperature (25 and 10ºC). The best result was observed when a feeding speed of 8 cm/h was employed at a temperature of 10ºC, resulting in a purification factor of 9.9-fold and a recovery of 47.6%. Key words: DEAE-cellulose. Enzyme. Temperature. Amilases(α-amilase, ß-amilase e amiloglicosidase) estão entre as enzimas mais importantes obtidas através de processos biotecnológicos, sendo que as de origem microbiana substituíram a hidrólise química do amido além de serem potencialmente úteis nas indústrias de fármacos e química fina (PANDEY ET al., 2000).A amiloglicosidase (EC 3.2.1.3) é uma exoenzima que libera unidades de glicose a partir da extremidade não redutora da amilose, amilopectina e glicogênio. É a única enzima amilolítica com capacidade para hidrolisar ao mesmo tempo as ligações α-1,4 e α-1,6 (PANDEY et al., 2000). Esta enzima é um importante biocatalisador industrial empregado na produção de xaropes de glicose a partir de matérias-primas amiláceas. Elas são depois das proteases, as enzimas de maior venda e distribuição mundial (CHEN;ZHANG;ZHOU, 2005). Esta enzima é produzida por microrganismos, principalmente pelos fungos filamentosos Aspergillus niger e Rhizopus sp. (GONZALES et al. 1998, SILVEIRA et al., 2006. A preferência CIÊNCIAS DE ALIMENTOS COMUNICAÇÕES CIENTÍFICAS / SHORT COMMUNICATIONSRecebido para publicação 18/10/2009 Aprovado em 16/04/2011 DOI: 10.5433/1679 652 Semina: Ciências Agrárias, Londrina, v. 32, n. 2, p. 651-658, abr/jun. 2011 Manera, A. P.; Meinhardt, S.; Kalil, S. J. das indústrias de processamento de amido, por amiloglicosidases destas fontes se deve ao fato de que estes microrganismos são reconhecidos como seguros sendo aceitos pela Food and Drug Administration (FDA) (MICHELIN et al., 2008).Quando enzimas são produzidas por meio de processos biotecnológicos, o meio de cultivo frequentemente contém outras enzimas e contaminantes, sendo necessárias operações subseqüentes de recuperação, puri...

Genome sequences of 24 Aspergillus niger sensu stricto strains to study strain diversity, heterokaryon compatibility, and sexual reproduction

“…Clade A consists of 9 A. niger sensu stricto strains, most of which are known for their protein and enzyme production, such as A. niger CBS115989 (synonym NRRL3122) and its descendent A. niger CBS513.88 ( Schäfer et al 2020 ). Strain A. niger CBS115989 has been well-studied for its enzyme production ( Sanzo et al 2001 ; Manera et al 2008 , 2011 ; Abdella et al 2018 ). In addition, the descendent strain CBS513.88, industrially used as a glucoamylase producer, has been the first whole-genome sequenced A. niger strain chosen based on its importance as a cell factory ( Pel et al 2007 ).…”

Purificação de uma beta-galactosidase produzida por aspergillus foetidus através de técnicas cromatográficas

“…A cromatografia de troca iônica é a técnica mais comumente empregada na separação de proteínas e enzimas, além disso, é utilizada com muita efetividade pelas indústrias bioquímicas e farmacêuticas para o escalonamento dos processos de isolamento de proteínas(99). Este método, baseia-se no princípio da reversibilidade das atrações eletrostáticas de uma molécula carregada em relação a uma matriz sólida com grupos com cargas opostas e ligados covalentemente à matriz(80,100). Este tipo de cromatografia é utilizado na remoção de contaminantes de alta ou baixa massa molares ou na dessalinização.…”