Purificação de uma beta-galactosidase produzida por aspergillus foetidus através de técnicas cromatográficas

Abstract

Lactose intolerance is characterized by a disorder in absorption of the carbohydrate lactose, which affects thousands of people worldwide and is associated with a deficiency or absence of intestinal β-galactosidase enzyme. In this context, the enzymatic hydrolysis of this disaccharide by β-galactosidase plays an important role in the processing of dairy products with low lactose content for consumption by intolerant individuals. The literature describes that microorganisms such as filamentous fungi can produce enzymes of industrial interest, such as βgalactosidases. Thus the objective of this study was to evaluate the production of extracellular β-galactosidase by filamentous fungi isolated from the soil of the Brazilian savanna in liquid medium using soybean residue as a carbon source. Initially a screening of 25 filamentous fungi strains grown in soybean residue medium was performed assessing β-galactosidase production potential. After selecting Aspergillus foetidus as the best producer, enzyme production was optimized by varying the culture medium followed by an experimental design with response surface analysis with the independent variables pH, temperature and stirring to assess the influence of these physico-chemical parameters in enzyme production. The best β-galactosidase activity (26.4 U/mL) was found in the system containing soybean residues 2% (w/v) at initial pH 7.0 at 28°C with 120 rpm. The induction curve indicated the 7th culture day as the period of highest activity. β-galactosidase was half purified using gel filtration and ion exchange chromatography. The purified enzyme was then characterized aiming its food and pharmaceutical industrial uses with maximal activity at 50°C and pH 3.0. The enzyme hydrolyzed 63% of the lactose present in milk (Molico®), and when tested its stability in gastric simulated conditions it remained active for 2 hours at 37°C. These results demonstrate the half purification of an acidic and stable β-galactosidase from Aspergillus foetidus with potential industrial application from low-cost residue.

Avaliação da produção de enzimas celulolíticas e hemicelulolíticas por fungos isolados do cerrado, costa marinha brasileira e da Antártica, utilizando casca de soja como substrato

“…Relatam-se diversas produções enzimáticas através de processos biotecnológicos de fungos filamentosos em meios contendo resíduos da agroindústria, como proteases em farelo de trigo, amilases em casca de mandioca (Cruz et al, 2011), xilanases em bagaço de cana e casca de soja (Moreira, 2013;Cunha, 2016), β-galactosidase em casca de soja (Martarello, 2016) e pectinases extraídas de cultivo em casca de maracujá (Jaramillo, 2014). Desta forma, a busca recorrente por enzimas de origem fúngicas produzidas através de cultivo a partir de resíduos de soja, por exemplo, se torna interessante do ponto de vista de aplicabilidade industrial, econômica e ambiental.…”

Condições de saúde, segurança e risco de adoecimento entre trabalhadores terceirizados

“…Por impactar de forma benéfica, entende-se que estes macetes e meios criativos utilizados pelos trabalhadores com maior tempo de vínculo empregatício na empresa devem ser explorados e disseminados entre todos os funcionários para contribuir com a redução do escore do fator custo físico.Os escores do custo físico mais elevados nos cargos de auxiliar de limpeza e limpador de vidro em detrimento ao cargo de encarregada(o), podem ser atribuídos à descrição das atividades de cada um, onde nos dois mais impactados pelo custo físico, a demanda de serviços braçais mostram total predomínio, enquanto para o cargo de encarregada(o) o predomínio é de atividades gerenciais e administrativas. Sobre isso,Messing, Chatigny e Courville (1998) apontaram que os profissionais que executam trabalhos de conservação e limpeza estão submetidos à intensa repetitividade de tarefas manuais e de posturas anômalas, classificando esta atividade como um serviço bastante penoso, levando-se a compreender melhor a ocorrência de maior dispêndio físico das auxiliares gerais e dos limpadores de vidro.O aumento da incidência de danos físicos aos trabalhadores com maior tempo de serviço pode ser relacionado ao acúmulo ao longo dos anos dos desgastes oriundos dos distúrbios osteomusculares que acometem os grupos de trabalhadores de conservação e limpeza em geral, atribuindo a repetitividade maçante das atividades diárias e a permanente movimentação de membros superiores e inferiores somadas à posturas desconfortáveis, ensejando-se uma atenção adequada para os trabalhadores de acumulam anos seguidos de trabalho (ANDRADE;MONTEIRO, 2007;MARTARELLO;BENATTI, 2009).…”