Needle immersed vitrification can lower the concentration of cryoprotectant in human ovarian tissue cryopreservation

Xiao, Zhun; Wang, Yan; Li, Lei; Luo, Shan; Li, Shangwei

doi:10.1016/j.fertnstert.2010.01.011

Cited by 49 publications

(57 citation statements)

References 30 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Supplementation of the collection medium as well as the freezing medium with taurine and L-glutamine, which have been found to play an antioxidant role by reducing cryopreservationinduced oxidative stress, might explain this result [4,18,40]. Although we observed a higher percentage of stroma cells with DNA fragmentation after thawing, this effect remains slight compared with a previous report [49] since it concerns only 16.6 % of stroma cells. The explanation for this observation is most likely linked to the higher sensitivity of these cells to cryoinjuries [11,28].…”

Section: Discussioncontrasting

confidence: 64%

Quality and functionality of human ovarian tissue after cryopreservation using an original slow freezing procedure

Sanfilippo

Canis

Romero

et al. 2012

J Assist Reprod Genet

View full text Add to dashboard Cite

Purpose To evaluate the efficiency of an original slow freezing protocol on the quality and function of human ovarian cortex. Methods Human ovarian tissues were cryopreserved using a freezing medium supplemented with propanediol and raffinose as cryoprotectants and antioxidants (L-glutamine, taurine). Samples were then frozen using a faster cooling rate than the usual one. Viability and morphology of follicles, DNA fragmentation in follicles and stroma as well as histology of the vascular endothelium were analyzed before and after freezing/thawing. Moreover, a functional analysis was performed based on the evaluation of follicular growth and development in thawed ovarian tissues that were cultured in vitro. Results Our freezing/thawing protocol allows preservation of a high proportion of viable follicles and the preservation of the different follicle developmental stages (p>0.05 versus fresh control). 70.5±5.2 % of follicles retained an intact morphology after cryopreservation (p=0.04). Stroma cells but not follicles exhibited a slight increase of DNA fragmentation after thawing (p<0.05). Microvessel endothelium within thawed tissues appeared to be preserved. Granulosa cells showed signs of proliferation in follicles cultured for 12 days. Secretion of 17β-oestradiol significantly increased during in vitro culture. Conclusions This protocol leads to good preservation of ovarian integrity and functionality post-thawing and thus appears as a suitable technique of ovarian tissue cryopreservation in clinical settings. Further research could be extended to optimize conditions of in vitro culture.

show abstract

Section: Discussioncontrasting

confidence: 64%

Quality and functionality of human ovarian tissue after cryopreservation using an original slow freezing procedure

Sanfilippo

Canis

Romero

et al. 2012

J Assist Reprod Genet

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…This novel technique, first developed by Wang et al in 2008 [14] and successfully used for cryopreservation of ovarian tissue from many species (mouse [26]; human [27][28][29]; baboon [30]; Japanese quail [31]), increases the cooling rate within the tissue [30]. In the current study, the morphology of early preantral follicles in vitrified ovarian tissue was not significantly different from the non-vitrified controls after 3 days of culture, regardless of the presence or absence of sucrose in the vitrification solution.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Damage to fetal bovine ovarian tissue caused by cryoprotectant exposure and vitrification is mitigated during tissue culture

Mouttham

Fortune

Comizzoli

2015

J Assist Reprod Genet

View full text Add to dashboard Cite

Purpose The objective of this study is to characterize the impact of exposure to cryoprotectants followed by vitrification on primordial follicle survival and activation using a fetal bovine model. Methods In the first study, fetal bovine cortical pieces were exposed to cryoprotectants with or without sucrose and cultured up to 7 days in the presence or absence of insulin. In the second study, cortical pieces were exposed to cryoprotectants with or without sucrose, vitrified, and cultured up to 7 days after warming in the presence or absence of insulin. Viability and morphology of follicles, as well as proliferation and/or DNA repair in ovarian tissue were analyzed.Results When compared to non-exposed controls, normal follicular morphology was affected in groups exposed to cryoprotectants only immediately post-exposure and after 1 day of culture, but improved by day 3 and did not significantly differ by day 7. Similarly, normal follicular morphology was compromised in vitrified groups after warming and on day 1 compared to controls, but improved by days 3 and 7. Proliferation and/or DNA repair in ovarian tissue was not affected by vitrification in this model. Cryoprotectant exposure and vitrification of ovarian tissue did not impair the activation of primordial follicles in response to insulin, although activation was delayed relative to non-exposed controls. Interestingly, sucrose had no noticeable protective effect. Conclusion Vitrified fetal bovine ovarian tissue has the intrinsic capacity to mitigate the immediate damage to primordial follicles' morphology and retains the capacity to activate. These findings provide a basis for a successful cryopreservation protocol for ovarian cortical tissue in other species including humans.

show abstract

“…Ugyanakkor több szerző rámu-tatott arra, hogy a sejtszerkezeti és szövettani vizsgálatok önmagukban nem adnak elegendő információt a felolvasztott szövetek életképességéről. Ezért a túlélési vizsgálatok kiterjedtek a szöveti hormontermelés [13,22], valamint a tüszőket alkotó sejtek apoptózisvizsgálatára is [23]. Vizsgálataink tervezésekor fontos szempont volt, hogy a petefészekszövet-minták túlélésének megítélése-kor olyan módszereket válasszunk, amelyek a részt vevő intézetekben rutinszerűen elvégezhetők.…”

Section: áBraunclassified

“…A vizsgálatok módja, a normális vagy necroticus tüszők besorolása munkacsoportonként változik, így az eredmények sem teljesen összehasonlíthatók. Az irodalmi adatok áttekintéséből azonban egyértelműen kitűnik, hogy a különböző fagyasztási módszerek eltérő mérték-ben ugyan, de csökkentik a normális morfológiájú tü-szők számát a felolvasztott mintákban [23][24][25].…”

Section: áBraunclassified

“…Ez azt jelenti, hogy az általunk alkalmazott módszerek eredményeként 23,2%-kal csökkent a normális vagy minimális elváltozásokat mutató tüszők gyakorisága. Eredményeinkhez hasonlóan más szerzők is a tüszők 50-80%-os fagyasztás utáni túléléséről számoltak be [14,23], de van olyan közlemény, ahol a fagyasztás-felolvasztás eredményeként a tüszők több mint 60%-a nekrotizá-lódott [25].…”

Section: áBraunclassified

See 1 more Smart Citation

Kezdeti tapasztalataink a petefészekszövet-fagyasztás bevezetésével

et al. 2016

View full text Add to dashboard Cite

Bevezetés: A nőbetegek onkológiai kezelése a petefészek-működés károsodását okozhatja. Ennek megelőzésére lehetőség van a petefészekszövet mélyfagyasztására, hosszú távú tárolására, majd a petefészek-működést károsító beavatkozások után a szövetminták visszaültetésére. Célkitűzés: Jelen tanulmányban a szerzők azt vizsgálták, hogy a petefé-szekszövet-fagyasztás módszerei mennyiben befolyásolják a felolvasztott szövetminták életképességét. Módszer: A munka során 10 kutatási célra felajánlott szövetminta fagyasztását-felolvasztását végezték el, majd a szövetminták túlélését vizsgálták. Szövettani vizsgálatokkal hasonlították össze a friss és a fagyasztott-felolvasztott mintákban lévő tüszők állapotát, illetve meghatározták hormontermelésüket. Eredmények: Szövettani vizsgálatokkal igazolták, hogy a fagyasztott-felolvasztott mintákban az életképesnek tűnő tüszők száma 23%-kal csökkent, de még a szövettenyész-tést követően is megfigyeltek életképes tüszőket. A felolvasztott szövetminták maximális ösztradioltermelése 908 pg/ ml volt, és a hormontermelés mértéke a friss mintákéhoz hasonló értékeket mutatott. A felolvasztott szövetek progeszterontermelésének maximuma 1,95 ng/ml volt, amely elmaradt a friss szövetminták hormonértékeitől. Követ-keztetések: A szerzők által alkalmazott petefészekszövet-fagyasztási módszerrel biztosítható a tüszők fagyasztás-felolvasztás utáni túlélése, így intézetükben megkezdték a módszer kísérleti klinikai alkalmazását daganatos betegek termékenységének megőrzése céljából.

show abstract

Needle immersed vitrification can lower the concentration of cryoprotectant in human ovarian tissue cryopreservation

Cited by 49 publications

References 30 publications

Quality and functionality of human ovarian tissue after cryopreservation using an original slow freezing procedure

Quality and functionality of human ovarian tissue after cryopreservation using an original slow freezing procedure

Damage to fetal bovine ovarian tissue caused by cryoprotectant exposure and vitrification is mitigated during tissue culture

Kezdeti tapasztalataink a petefészekszövet-fagyasztás bevezetésével

Contact Info

Product

Resources

About