Nachweis der BRAF-Mutation bei kaninen Prostataerkrankungen

Abstract

Zusammenfassung Gegenstand und Ziel In der Literatur konnte in 80 % der Bioptate kaniner Prostatakarzinome (PCa) die BRAF-Mutation nachgewiesen werden. Ziele dieser Arbeit waren, kanine Prostataproben aus dem eigenen Tiergut hinsichtlich des Auftretens der BRAF-Mutation zu untersuchen sowie die Spezifität und Sensitivität des Tests zu evaluieren. Außerdem sollte die Methodik für zytologische Ausstriche etabliert und die Korrelation zwischen der BRAF-Mutation und dem histologischen Bild kaniner PCa dargestellt werden. Material und Methoden Bioptate (n = 70) und Feinnadelaspirate (n = 17) der Prostata von 87 Hunden wurden histologisch oder zytologisch untersucht. Die Einteilung der Erkrankungen erfolgte wie in der Literatur beschrieben in benigne Prostatahyperplasie (BPH, n = 22), Prostatitis (n = 14), Plattenepithelmetaplasie (PM, n = 2), Atrophie nach Kastration (n = 3) und PCa (n = 46; davon zytologisch nachgewiesen n = 11). Für die PCa wurde der Gleason-Score ermittelt. Zur DNA-Isolierung dienten kommerzielle Testkits. Das Exon 15 wurde mit dem TaqMan® SNP Assay untersucht. Die Spezifität und Sensitivität des Tests wurden berechnet. Ergebnisse Ein Gleason-Score von 6 und 7 ergab sich in je einem Fall, von 8 bis 10 bei 33 der PCa. Aus allen Proben ließ sich ausreichend DNA isolieren. Die BRAF-Mutation war in 28/46 PCa nachweisbar (Sensitivität 61 %). Bei keinem Hund mit BPH, Prostatitis, PM oder Atrophie wurde die BRAF-Mutation festgestellt (Spezifität 100 %). Durch die BRAF-Mutation verursachte PCa wiesen einen signifikant (p = 0,002) höheren Gleason-Score auf als PCa ohne diese Mutation. Schlussfolgerung und klinische Relevanz Die Untersuchung auf das Vorliegen der BRAF-Variante V595E ist ein hochspezifisches Verfahren, mit dem sich in histologisch und zytologisch fraglichen Fällen die Verdachtsdiagnose eines PCa absichern lässt. Durch die BRAF-Mutation verursachte PCa zeigen histologisch stärker ausgeprägte Malignitätskriterien als nicht durch diese Mutation bedingte. Die klinische, therapeutische und prognostische Relevanz dieser Befunde bedarf weiterer Studien.

Effective detection of BRAFV595E mutation in canine urothelial and prostate carcinomas using immunohistochemistry

“…It is therefore key, as for any molecular test, that the BRAF mutation status is interpreted together with histopathology and clinical information. Thus far, canine BRAF V595E is considered cancer‐specific and has not yet been detected in benign tissue 29,50 . This is also consistent with our results from the prostate, where all non‐neoplastic prostate samples were negative for BRAF V595E on IHC.…”

“…Thus far, canine BRAF V595E is considered cancer-specific and has not yet been detected in benign tissue. 29,50 This is also consistent with our results from the prostate, where all non-neoplastic prostate samples were negative for BRAF V595E on IHC. However, as mentioned before, a limitation of this study is that non-neoplastic lesions of the lower urinary tract, for example, cystitis…”

Die Urinuntersuchung bei Hund und Katze, Teil 2: Urinsedimentanalyse

“…Daher sind neben bildgebenden Verfahren oft weiterführende Untersuchungen, wie z. B. die Mikroskopie eines gefärbten Trocken-präparats mit zytologischer Untersuchung auf Malignitätsanzeichen oder die histologische Untersuchung endoskopisch gewonnener Biopsieproben erforderlich [3,4,[54][55][56][57].Bei kaninen Übergangszellkarzinomen und bei Prostatakarzinomen kann der Nachweis der BRAF-Mutation in gewonnenem Zellmaterial des Urinsediments oder von Kathetersaugbiopsien hilfreich sein [54][55][56][57]. Die Spezifität des Tests liegt bei beiden Tumorarten bei 100 %, sodass ein positives Ergebnis beweisend für das Vorliegen eines Karzinoms ist [57].…”

“…B. die Mikroskopie eines gefärbten Trocken-präparats mit zytologischer Untersuchung auf Malignitätsanzeichen oder die histologische Untersuchung endoskopisch gewonnener Biopsieproben erforderlich [3,4,[54][55][56][57].Bei kaninen Übergangszellkarzinomen und bei Prostatakarzinomen kann der Nachweis der BRAF-Mutation in gewonnenem Zellmaterial des Urinsediments oder von Kathetersaugbiopsien hilfreich sein [54][55][56][57]. Die Spezifität des Tests liegt bei beiden Tumorarten bei 100 %, sodass ein positives Ergebnis beweisend für das Vorliegen eines Karzinoms ist [57]. Die Sensitivität liegt für die Detektion von Prostatakarzinomen zwischen 61 % und 80 % [56,57] und für Übergangszellkarzinome bei circa 70 % [54,56], sodass bei einem negativen Ergebnis trotzdem ein Karzinom vorliegen kann.…”

“…Die Spezifität des Tests liegt bei beiden Tumorarten bei 100 %, sodass ein positives Ergebnis beweisend für das Vorliegen eines Karzinoms ist [57]. Die Sensitivität liegt für die Detektion von Prostatakarzinomen zwischen 61 % und 80 % [56,57] und für Übergangszellkarzinome bei circa 70 % [54,56], sodass bei einem negativen Ergebnis trotzdem ein Karzinom vorliegen kann.…”