Molecular Characterization of KMP11 fromTrypanosoma cruzi: A Cytoskeleton-Associated Protein Regulated at the Translational Level

Abstract

Kinetoplasmid membrane protein-11 (KMP11) is present in a wide range of trypanosomatids. In the present paper, we show that the T. cruzi KMP11 gene is organized in a cluster formed by four gene units arranged in a head-to-tail tandem manner located on a chromosome of about 1900 kb. Northern blot analyses indicated that the steady-state level of mature KMP11 transcripts of 0.52 kb is high and similar in the three forms of the parasite. The KMP11 mRNAs have a half-life of about 16 h whose steady-state level is strongly downregulated when the parasites reach the stationary growth phase. The T. cruzi KMP11 sequence presents a significant homology with the amino-terminal third of the cytoskeleton-associated protein CIP1 from Arabidopsis thaliana. Western blot and immunoelectron microscopy studies showed that KMP11 is present in the cytoskeleton structure. Because the strong downregulation observed in the de novo synthesis of KMP11 protein in parasites treated with vinblastine is not accompanied by a significant fall in the steady-state level of KMP11 mRNAs, regulatory control of the protein at the translational level is suggested.

Structural Modeling, Evolution and Ligand Interaction of KMP11 Protein of Different Leishmania Strains

“…Vinblastine have no interaction with the KMP11 protein of different Leishmania strains as no ligand binding site has yet been found in this study. Hence it is known from this in silico study that vinblastine don't have any effect on KMP11 protein phase but may have effect at RNA phase (Thomas and Garcia, 2000). Similarly amphotericin B, SAG (sodium antimony gluconate) and leishmanial peptide did not find any ligand binding site in this flagellar protein, KMP11.…”

Expresión diferencial entre estadios de Trypanosoma cruzi I en el aislamiento de un paciente con cardiomiopatía chagásica crónica de zona endémica de Santander, Colombia

“…Esta proteína de 11 kDa está muy conservada en Kinetoplastidos con características comunes, entre las que se destacan el peso molecular, el elevado número de copias, su localización en el flagelo, el bolsillo flagelar y la superficie de la membrana del parásito (30)(31)(32). Aunque se expresa en todos los estadios del ciclo de vida del parásito, lo hace con mayor abundancia en los estadios desarrollados en el insecto, como son tripomastigotes y epimastigotes, como se demostró mediante Western blot e inmunomicroscopía electrónica (33).…”

La respuesta inmunitaria adaptativa en la infección crónica por Trypanosoma cruzi

“…En nuestros estudios se ha empleado como antígeno una proteína de membrana del cinetoplasto con un peso molecular de 11 kDa, la KMP-11, la cual está muy conservada en parásitos como los tripanosomas y las leishmanias (Thomas, et al, 2000). Aunque la función de esta proteína no se conoce, su ausencia en el parásito impide la división, como en el caso de T. brucei (Li & Wang, 2008).…”

“…Aunque la función de esta proteína no se conoce, su ausencia en el parásito impide la división, como en el caso de T. brucei (Li & Wang, 2008). En T. cruzi, la proteína KMP-11 está asociada a proteínas del citoesqueleto, por lo cual se ha postulado que puede estar involucrada en la motilidad del parásito en su estado flagelar (Thomas, et al, 2000). La proteína KMP-11 se expresa en todas las formas del ciclo de vida del parásito y es reconocida en sueros de pacientes en fase aguda y crónica, aunque con algunas diferencias: en los pacientes con infección aguda presenta niveles de anticuerpos más bajos, con predominio de los isotipos IgG3 e IgG4, en tanto que en pacientes con infección crónica se presenta en niveles más elevados y es reconocida principalmente por los isotipos IgG1 e IgG3, los cuales presentan mayor unión a receptores FC para IgG (FCγR) (Flechas, et al, 2009), mejorando así las funciones efectoras de los fagocitos.…”