Microbial Production of Nucleosides and Nucleotides

Nakao, Yoshio

doi:10.1016/b978-0-12-551501-6.50015-2

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“…Yeast was evaluated initially as a possible source of RNA because of its high RNA content (2.5-15%) (Nakao 1979). Yeast was evaluated initially as a possible source of RNA because of its high RNA content (2.5-15%) (Nakao 1979).…”

Section: Flavor Enhancersmentioning

confidence: 99%

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Yeast-Derived Products

Reed

Nagodawithana

1991

Yeast Technology

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Section: Flavor Enhancersmentioning

confidence: 99%

“…A soluble fraction is separated by centrifugation and the RNA is precipitated by the addition of an acid or ethanol (Nakao 1979). The conventional method includes an extraction of RNA from dried yeast cells by treatment with hot alkaline sodium chloride (5-12%) solution.…”

Section: Flavor Enhancersmentioning

confidence: 99%

Yeast-Derived Products

Reed

Nagodawithana

1991

Yeast Technology

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“…A Tabela 1 ilustra micro-organismos produtores de 5´fosfodiesterase capazes de hidrolisar o RNA em 5´nucleotídeos monofosfato (Nakao, 1962).…”

Section: Fontes Microbianas De Nuclease P1 Ou 5´fosfodiesteraseunclassified

“…Segundo Kuninaka (1961) e Fujimoto (1974) as primeiras produções de 5´nucleotídeos monofosfato, em larga escala, para a produção de acentuadores de sabor e produtos farmacêuticos foram realizadas através da hidrólise de RNA extraído de levedura. Nakao (1962) avaliou que a levedura seria uma fonte potencial de RNA apresentando um conteúdo de 2,5 -15% em sua composição.…”

Section: Produção De 5´nucleotídeos Monofosfato Pela Hidrólise De Rna...unclassified

“…Reconhecendo o potencial comercial de aplicação desses nucleotídeos acentuadores de sabor nos alimentos, a indústria de alimentícia voltou sua atenção para o desenvolvimento de métodos de produção mais efetivos e com custos reduzidos (Reed & Nagodawithana, 1991). Nakao (1962) avaliou que a levedura seria uma fonte potencial de RNA para obtenção de 5´nucleotídeos monofosfato. As leveduras contem cerca de 2,5 -15%…”

unclassified

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Estudo da produção e aplicação da enzima extracelular nuclease p1 do fungo Penicillium citrinum Thom 1131 ATCC 14994

Florencio¹

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vi vii RESUMO A enzima nuclease P1 (E.C.3.1.30.1) hidrolisa as ligações éster de RNA na posição 3' liberando 5´nucleotídeos monofosfato (5'AMP, 5'GMP, 5'CMP e 5'UMP). Os nucleotídeos 5'IMP e 5'GMP são encontrados em carne, cogumelos, extrato de levedura e são utilizados como acentuadores de sabor em alimentos como caldo de carne, sopas desidratadas, biscoitos salgados, extratos de peixe, molhos, etc.Foi estudada a fermentação submersa da linhagem de Penicillium citrinum ATCC 14994 visando o aumento da produção da enzima nuclease P1. Na fermentação de Penicillium citrinum em frascos agitados utilizando-se os meios de cultivo descritos por Guo-Qing et. al (2006) e Li et. al (2007 foram obtidos 46,93UmL -1 e 15,47 U mL -1 de nuclease P1, respectivamente.O meio de cultivo descrito por Guo-Qing et. al (2006) foi escolhido como base para os estudos de fermentação e produção de nuclease P1 pela linhagem Penicillium citrinum ATCC 14994. Foram avaliados os efeitos da concentração dos componentes glicose, peptona, farinha de amendoim, K 2 HPO 4 , CaCO 3 e ZnSO 4 do meio de cultura, através de delineamento fatorial incompleto (Plackett Burman) para a seleção das variáveis. Após a seleção das variáveis, foi utilizado um delineamento fatorial completo (DCCR), para os estudos dos efeitos das concentrações de peptona, farinha de amendoim e também quantidade de inóculo e do pH do meio de cultivo na produção de nuclease P1 pelo fungo. Na fermentação de Penicillium citrinum ATCC 14994 nas condições definidas pelos planejamentos experimentais, em frascos Erlenmeyer de 500 mL, utilizando-se 50 mL de meio de cultivo nº3, composto por 3% glicose, 0,5% de farinha de amendoim, 0,2% de peptona, 0,03% de ZnSO 4 e 0,12% de CaCO 3 ajustado para pH 5,3 e 1mL de suspensão contendo 10 8 esporos mL -1 , foi obtido 73,4 UmL -1 , após 72 horas a 28°C e 200 rpm de agitação.Na fermentação da linhagem de Penicillium citrinum ATCC 14994 em biorreator de 5 litros utilizando-se 3 litros de meio nº3, foi obtido 108,9 UmL -1 de viii atividade de nuclease P1, após 96 horas a 30°C, 10v vm e 300rpm. As preparações de nuclease P1 parcialmente purificadas obtidas por a) tratamento térmico a 65°C por 15 minutos, precipitação fracion ada com sulfato de amônia e diálise, e b) tratamento térmico a 65°C por 15 minu tos e ultrafiltração tangencial com membrana orgânica de 30kDa, apresentaram atividade de 634,89UmL -1 e 222,67UmL -1 , respectivamente. A preparação de nuclease P1 obtida por tratamento térmico a 65°C por 15 minutos e ultrafil tração tangencial com membrana de 30kDa, não apresentou a micotoxina citrinina no limite de detecção de 10ppb.A nuclease P1 parcialmente purificada apresentou atividade ótima na faixa de 65 a 70ºC e em torno de pH 5,4 -5,5. A enzima mostrou-se estável até 70ºC após 30 minutos de tratamento térmico em pH 5,4. Após 30 minutos de tratamento térmico a 75ºC e 80ºC em pH 5,4 a enzima reteve respectivamente cerca de 90% e 59% da atividade inicial, sendo inativada completamente após 30 minutos a 90ºC em pH 5,4.No estudo da aplicação da ...

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