Isolation of a new l-amino acid oxidase from Crotalus durissus cascavella venom

Toyama, Marcos Hikari; Toyama, Daniela de Oliveira; Passero, Luiz Felipe Domingues; Laurenti, Márcia Dalastra; Corbett, Carlos Eduardo Pereira; Tomokane, Thaíse Yumie; Fonseca, Fabiana Vieira; Antunes, Edson; Joazeiro, Paulo Pinto; Beriam, L. O. S.; Martins, Maria; Monteiro, Helena Serra Azul; Fonteles, M. C.

doi:10.1016/j.toxicon.2005.09.008

Cited by 115 publications

(85 citation statements)

References 22 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Therefore, most of the biological effects of LAAO may be due to the secondary effect of hydrogen peroxide generated during the specific catalytic activity (Ponnudurai et al, 1994). This hypothesis can be supported when catalase is added to the medium in experimental conditions, when the toxic activity is totally abolished (Toyama et al, 2006;Izidoro et al, 2006;Rodrigues et al, 2009;Ciscotto et al, 2009).…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 96%

Bothrops pirajai snake venom L-amino acid oxidase: in vitro effects on infection of Toxoplasma gondii in human foreskin fibroblasts

Izidoro¹,

Alves²,

Rodrigues³

et al. 2011

Rev. bras. farmacogn.

View full text Add to dashboard Cite

Abstract:The effect of an L-amino acid oxidase isolated from Bothrops pirajai snake venom (BpirLAAO-I) was investigated on infection of Toxoplasma gondii in human foreskin fibroblasts (HFF). The cytotoxic activity of BpirLAAO-I on HFF cells showed a dose-dependent toxicity with median cytotoxic dose (TD50) of 11.8 µg/mL. BpirLAAO-I induced considerable dose-dependent decrease in the T. gondii infection index under two different conditions, treatment of tachyzoites before infection or treatment of HFF cells after infection. A maximal inhibition of infection (56%) was found for treatment before infection, with a median inhibitory dose (ID50) at 1.83 µg/mL and selectivity index (SI) at 6.45. For treatment after infection, it was observed a maximal inhibition of infection at 65%, ID50 of 1.20 µg/mL and SI of 9.83. The treatment before infection was also effective to reduce intracellular parasitism up to 62%, although presenting higher values of ID50 (3.14 µg/mL) and lower values of SI (3.76). However, treatment after infection was not effective, suggesting that the enzyme seems to have no effect on the parasite intracellular replication for this condition. In conclusion, BpirLAAO-I was more effective to inhibit the infection of neighboring cells and consequently parasite dissemination than primary infection and parasite replication. Thus, the effect of BpirLAAO-I described herein could be taken into account for the development of new synthetic anti-parasite therapeutic agents.

show abstract

Section: Discussionmentioning

confidence: 96%

Bothrops pirajai snake venom L-amino acid oxidase: in vitro effects on infection of Toxoplasma gondii in human foreskin fibroblasts

Izidoro¹,

Alves²,

Rodrigues³

et al. 2011

Rev. bras. farmacogn.

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…A morte celular para células normais (macrófagos) foi insignificante. Além disso, BpirLAAO-I foi capaz de induzir a fragmentação de DNA após a incubação a 37°C por 24h (Izidoro et al, 2006 (Souza et al, 1999;Chung;Tan, 1994;Tan;Swaminathan, 1992;Tan;Saifuddin, 1989;Tsuruo, 1997;Abe et al, 1998;Clemetson, 2002;Ali et al, 2000;Toyama et al, 2006;Samel, et al, 2006 …”

Section: As L-aminoácido Oxidades -Laaosunclassified

“…9). Souza et al (1999) Crotalus durissus cascavella -68 kDa (Toyama et al, 2006). A massa molecular relativa (Mr) das LAAOs isoladas de C. rhodostoma Chung;Tan, 1994), B. alternatus , B. pirajai (Izidoro et al, 2006) A fração BaPI originada da filtração do veneno bruto em Sephadex G-75 (Fig.…”

Section: Figura 22unclassified

Isolamento e caracterização bioquímica e funcional de L-aminoácido oxidase do veneno de 'Bothrops atrox'

Alves¹

View full text Add to dashboard Cite

“…O sequenciamento da região N-terminal indicou que alguns resíduos de aminoácidos são conservados em diferentes SV-LAAOs, insinuando que a presença de uma glutamina altamente conservada nessa região possa ser responsável pela ligação do substrato em locais específicos da molécula, relacionados com a potência das atividades biológicas de SV-LAAOs (STÁBELI et al, 2004(STÁBELI et al, , 2007TOYAMA et al, 2006;MOUSTAFA et al, 2006;RODRIGUES et al, 2009;GUO et al, 2012).…”

Section: Calloselasma Rhodostoma Agkistrodon Halys Blomhoffii Trimeunclassified

“…Algumas proteínas e peptídeos isolados de peçonha de serpentes têm mostrado efeitos antimicrobianos contra várias espécies de bactérias e fungos, até mesmo contra algumas cepas resistentes a medicamentos, o que pode torná-las potenciais farmácos antimicrobianos auxiliares ou mesmo substituindo famácos já comercializados (PÁRAMO et al, 1998;CLEMETSON, 2002;NUNES EDOS et al, 2011;KAO et al, 2012;GUO et al, 2012;HAO et al, 2013;MUÑOZ et al, 2014 (ZHANG et al,2004;TONISMAGI et al, 2006;TOYAMA et al, 2006;IZIDORO et al, 2006;SAMUEL et al, 2008RODRIGUES et al, 2009). …”

Section: )unclassified

Caracterização funcional e estudo dos mecanismos de resposta ao dano celular causado por uma L-aminoácido oxidase de Calloselasma rhodostoma em linhagens celulares humanas

Costa¹

View full text Add to dashboard Cite

As L-aminoácido oxidases (LAAOs) isoladas de peçonhas de serpentes são alvos de um grande número de pesquisas devido às suas inúmeras ações biológicas e farmacológicas. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar funcionalmente a Laminoácido oxidase da peçonha de Calloselasma rhodostoma (CR-LAAO) por meio das atividades: bactericida, fungicida, leishmanicida, tripanomicida, citotóxica, inflamatória e análise da expressão de genes e proteínas apoptóticas. A CR-LAAO mostrou-se altamente citotóxica sobre as células tumorais HepG2 e HL-60, promovendo cerca de 80% de morte celular na maior concentração testada (100 µg/mL) e apresentou baixa toxicidade sobre células PBMC. Foi possível observar que a proteína induziu apoptose (AV+) em PBMC. Em HepG2, as menores concentrações (0,1-2,5 µg/mL) causaram apoptose (AV+), e as maiores (5-100 µg/mL) causaram apoptose/necrose (PI+/AV+). Em HL-60, as concentrações testadas (0,1-100 µg/mL) induziram apoptose/necrose (PI+/AV+). A expressão do gene FAS e ativação das caspases 8 e 3 determinou a ativação da via extrínseca da apoptose na linhagem HL-60. A CR-LAAO promoveu algumas alterações na modulação do ciclo celular, sendo que nas linhagens tumorais os atrasos se concentraram nas fases G0/G1 e S do ciclo celular. Ademais, a CR-LAAO mostrouse bactericida contra as cepas S. aureus e E. coli, com maior especificidade para a cepa gram-positiva (S. aureus). Em análises de microscopia de transmissão, foi possível observar um desmantelamento da parede celular bacteriana. Após 6h de pré-incubação com C. albicans, a CR-LAAO foi capaz de inibir 80% do crescimento da levedura. A CR-LAAO mostrou-se também um bom agente leishmanicida contra as espécies L. infantum chagasi (IC50=16,66 µg/mL) e L. braziliensis (IC50=24,47 µg/mL) e inibiu o crescimento da forma promastigota do Trypanosoma cruzi (IC50=196,8 µg/mL). Testes in vivo revelaram que a CR-LAAO promoveu inflamação local aguda, recrutando células inflamatórias como neutrófilos e induzindo a formação de citocinas (IL-6 e IL-1β) e mediadores lipídicos (LTB4 e PGE2). Os resultados obtidos sugerem que a CR-LAAO apresenta potencial biotecnológico evidente, com efeitos antiparasitários, fungicida, bactericida, bem como atividade antitumoral in vitro. Dessa forma, os resultados obtidos para a CR-LAAO fornecem subsídios importantes para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas de ação direcionada, como quimioterápicos e antimicrobianos mais eficazes.Palavras chaves: Calloselasma rhodostoma; L-aminoácido oxidase; apoptose; expressão gênica; atividade antiparasitária; bactericida; inflamação. L-amino acid oxidases (LAAOs) isolated from snake venoms are targets of a large number of researches due to their numerous biological and pharmacological actions. The objective of this study was to functionally characterize the L-amino acid oxidase from the venom of Calloselasma rhodostoma (CR-LAAO) through the activities: bactericidal, fungicidal, leishmanicidal, trypanocidal, cytotoxic, inflammatory and analysis of gene expression and apoptotic pro...

show abstract

Isolation of a new l-amino acid oxidase from Crotalus durissus cascavella venom

Cited by 115 publications

References 22 publications

Bothrops pirajai snake venom L-amino acid oxidase: in vitro effects on infection of Toxoplasma gondii in human foreskin fibroblasts

Bothrops pirajai snake venom L-amino acid oxidase: in vitro effects on infection of Toxoplasma gondii in human foreskin fibroblasts

Isolamento e caracterização bioquímica e funcional de L-aminoácido oxidase do veneno de 'Bothrops atrox'

Caracterização funcional e estudo dos mecanismos de resposta ao dano celular causado por uma L-aminoácido oxidase de Calloselasma rhodostoma em linhagens celulares humanas

Contact Info

Product

Resources

About