Influência Do Método De Recuperação Oocitária Sobre Os Parâmetros Quanti-Qualitativos De Oócitos Bovinos

Abstract

RESUMOOs objetivos foram avaliar os parâmetros quanti-qualitativos de oócitos bovinos após recuperação usando diferentes métodos de colheita e tipos de êmbolo da seringa de aspiração. Assim, dois experimentos foram realizados usando ovários de fêmeas post-mortem. No primeiro experimento, duas técnicas de colheita oocitária foram empregadas: aspiração de folículos (2-8 mm) com agulha 21G e seringa de 5 mL e, fatiamento da superfície ovariana (slicing). No segundo experimento, folículos (2-8 mm) foram aspirados usando seringa com distintos êmbolos (borracha vs. plástico). Os complexos cumulus-oócito (CCOs) foram classificados por critérios morfológicos em viáveis e não viáveis. Em seguida, CCOs foram corados com o azul de cresil brilhante (ACB) (60 min; 26 μM) e classificados como ACB + (viáveis) e ACB -(não viáveis). Um total de cinco repetições por experimento foi realizado e os dados analisados pelo teste exato de Fisher (P<0,05). No primeiro experimento, o número de oócitos por ovário obtido por slicing foi maior quando comparado à aspiração folicular (14,8 vs. 7,5; P<0,05). Contudo, um maior percentual de CCOs viáveis observado pelo ensaio de ACB foi obtido a partir da aspiração folicular (65,7% vs. 31,0%; P<0,05). No segundo experimento, nenhuma diferença (P>0,05) foi observada entre os tipos de êmbolos quanto aos parâmetros quantitativos. Quanto à qualidade oocitária avaliada por critérios morfológicos, um percentual maior de oócitos viáveis foi recuperado usando êmbolo de borracha (75,4% vs. 58,2%; P<0,05). Em conclusão, oócitos de melhor qualidade podem ser obtidos a partir da aspiração folicular, especialmente usando seringa com êmbolo de borracha. PALAVRAS-CHAVE:Aspiração folicular. Azul de cresil brilhante. Colheita oocitária. Qualidade oocitária. Slicing. SUMMARYThe aims were to evaluate qualitative-quantitative parameters of bovine oocytes after recovery using different collection methods and piston type from the aspiration syringe. Thus, two experiments were performed using ovaries from postmortem females. In the first experiment, two techniques of oocyte recovery were used: aspiration of follicles (2-8 mm) with 21G needle and 5 mL syringe, and slicing of the ovarian surface. In the second experiment, follicles (2-8 mm) were aspirated using syringes with different pistons (rubber vs. plastic). The cumulus-oocyte complexes (COCs) were classified by morphological criteria as viable and non-viable. Then, COCs were stained with brilliant cresyl blue (BCB) (60 min, 26 µM) and categorized as BCB + (viable) and BCB -(non-viable). A total of five repetitions per experiment was performed and the data analyzed by Fisher's exact test (P<0.05). In the first experiment, the number of oocytes per ovary obtained by slicing was higher when compared to the follicular aspiration (14.8 vs. 7.5; P<0.05). Nevertheless, a greater percentage of viable COCs observed by BCB assay was obtained from the follicular aspiration (65.7% vs. 31.0%; P<0.05). In the second experiment, no difference (P>0.05) was observed the piston ty...

AVALIAÇÃO MORFOMÉTRICA OVARIANA E RECUPERAÇÃO DE COMPLEXOS Cumulus oophorus DE FÊMEAS SUÍNAS PRÉ-PÚBERES POR ASPIRAÇÃO FOLICULAR E SECÇÃO DOS OVÁRIOS

“…Em outra pesquisa realizada com ovários de fêmeas caprinas, Ambili et al 2015registraram uma maior recuperação de CCOs/ovário na técnica de secção/fatiamento em relação à punção e aspiração do tecido ovariano, do mesmo modo que foi constatado no presente estudo, quando as técnicas foram confrontadas. A mesma diferença nesse parâmetro foi observada por Santos et al (2016) em ovários de fêmeas bovinas post mortem (14,8 vs. 7,5 oócitos/ovário para fatiamento e aspiração folicular, respectivamente).…”

“…Em adição, os cortes do tecido ovariano permitem a colheita de oócitos presentes em folículos pequenos, que normalmente não são aspirados. A utilização da técnica de secção/fatiamento pode ser proveitosa quando se almeja obter uma alta quantidade de CCOs, principalmente em situações de pouca disponibilidade de ovários (Santos et al, 2016). No caso do presente estudo, apesar da vantagem numérica, a técnica de secção/fatiamento resultou em um maior número de CCOs grau 4, o que não é desejável para estudos com PIV.…”