O banco de sementes do solo é um mecanismo de regeneração natural importante para a colonização de clareiras em florestas naturais, assim como uma alternativa em programas de restauração. O presente estudo objetivou caracterizar o banco de sementes do solo em uma Floresta Ombrófila Aberta e foi realizado em área de fragmento florestal conservado do Parque Municipal de Pimenta Bueno, Rondônia. Foram coletadas 35 amostras de solo de forma aleatória com auxílio de um gabarito de ferro medindo 25 x 25 x 5 cm. O material coletado foi monitorado por seis meses em casa de sombra, em que, a partir da germinação, as plantas foram quantificadas, identificadas e classificadas quanto à origem, forma de vida e grupo ecológico. Observou-se a emergência de 834 plântulas (381 plântulas.m-²) pertencentes a 67 espécies. Houve predomínio de espécies nativas, herbáceas e pioneiras. A maior densidade de sementes foi observada para espécies pioneiras típicas de sucessão natural (Solanum mauritianum, Cecropia sp. e uma morfoespécie de caráter arbustivo pertencente à família Melastomataceae). O banco de sementes do solo estudado mostrou-se como um mecanismo potencialmente eficiente para a regeneração natural da floresta, podendo ainda ser utilizado como técnica nucleadora em programas de restauração.