In vitro fluorescence assay to study the folding of Kv ion channels

Karľová, Mária; Pischalnikova, Anastasia V.; Ramonova, Alla A.; Moisenovich, M. M.; Sokolova, Olga; Шайтан, К. В.

doi:10.1134/s0006350911020138

Cited by 3 publications

(7 citation statements)

References 45 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…The correctness of folding was confirmed by the method developed earlier using fluorescently labeled agitoxin from scorpion venom [23] (Fig. 1).…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

“…The medium was changed for the fresh 24 h after transfec tion. The expression level of channel proteins was tested after 48 h of growth using labeled agitoxin [23].…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

“…Plasmid vector pCSP105 was kindly provided by K. Miller (Brandeis University, USA). Agitoxin expression and purification was con ducted as described earlier in [24] with the changes described in [23].…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

See 2 more Smart Citations

Three-dimensional structure of human voltage-gated ion channel Kv10.2 studied by electron microscopy of macromolecules and molecular modeling

et al. 2012

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

“…The correctness of folding was confirmed by the method developed earlier using fluorescently labeled agitoxin from scorpion venom [23] (Fig. 1).…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

“…The medium was changed for the fresh 24 h after transfec tion. The expression level of channel proteins was tested after 48 h of growth using labeled agitoxin [23].…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

See 1 more Smart Citation

Three-dimensional structure of human voltage-gated ion channel Kv10.2 studied by electron microscopy of macromolecules and molecular modeling

et al. 2012

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

“…по-прежнему остается неизвестной. Ранее мы показали, что пол-норазмерные каналы Kv10.2 образуют кластеры, ко-торые солокализуются с актиновым цитоскелетом [7]. Недавно мы установили, что каналы Kv10.2 с удаленным N-концевым доменом также способны к кластеризации [16].…”

unclassified

“…Струк-тура цитоплазматического домена потенциал-управ-ляемых каналов сильно варьирует между различными семействами [7]. C-концевой домен необходим для корректной сборки тетрамерного канала [8], при-чём межспиральные взаимодействия определяют не только стабильность, но и селективность муль-тимеризации [9].…”

unclassified

Molecular modeling of the tetramerization domain of human potassium channel Kv10.2 in different oligomeric states

Novoseletsky

Volyntseva

Шайтан

et al. 2017

Moscow Univ. Biol.Sci. Bull.

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

Потенциал-управляемый калиевый канал Kv10.2 экспрессируется в нервной систе-ме, однако его функции и участие в развитии болезней человека остаются мало изучен-ными. Мутации канала Kv10.2 были обнаружены при эпилептической энцефалопатии и аутизме. Моделирование пространственной структуры канала является важным инстру-ментом для получения информации о молекулярных аспектах его функционирования и механизмах, ответственных за патогенез. В настоящей работе выполнено молекулярное моделирование спирального фрагмента C-концевого домена канала Kv10.2 человека (hEAG2) в димерной, тримерной и тетрамерной формах. Стабильность всех форм под-тверждена расчётами методом молекулярной динамики. Выявлены контакты и взаимо-действия, стабилизирующие структуру.Ключевые слова: потенциал-управляемый калиевый канал Kv10.2, олигомеризация, суперспираль, молекулярное моделирование, молекулярная динамика Потенциал-управляемые калиевые каналы конт-ролируют перенос ионов K + через клеточную мемб-рану и играют ключевую роль в возбудимых и не-возбудимых клетках. Канал Kv10.2 (кодируемый геном KCNH5) принадлежит семейству ether-a-go-go (EAG) и экспрессируется в нервной системе [1].Мутации каналов семейства EAG вызывают нарушение синаптической пластичности и памяти [2]. Нарушения функционирования канала Kv10.2 наблюдались при развитии эпилептической энцефа-лопатии и аутистических расстройствах [3], а также в процессе возникновения и развития опухолей [2]. Несмотря на предпринятые попытки исследования канала Kv10.2, его функционирование в нервной системе и вовлеченность в развитие заболеваний че-ловека остаются недостаточно изученными [3,4].Анализ гена KCNH5, клонированного незадолго до завершения проекта "Геном человека" [5,6], показал, что канал Kv10.2 обладает топологией, сходной с другими калиевыми потенциал-управ-ляемыми каналами (Kv): шесть трансмембранных спиралей в каждой из четырёх субъединиц. Струк-тура цитоплазматического домена потенциал-управ-ляемых каналов сильно варьирует между различными семействами [7]. C-концевой домен необходим для корректной сборки тетрамерного канала [8], при-чём межспиральные взаимодействия определяют не только стабильность, но и селективность муль-тимеризации [9]. Показано, что С-концевой до-мен канала Kv7.1, гомологичного семейству EAG, имеет две функциональные части, причём прокси-мальная половина ответственна за экспрессию, сво-рачивание и проницаемость канала, а дистальная -за направление сворачивания и специфичность связывания с партнерами [10].Информация о пространственной структуре мембранных белков, в т.ч. ионных каналов, а также их комплексов с различными лигандами является важным условием для понимания механизмов функ-ционирования этих белков. До недавнего времени структура калиевых каналов семейства EAG была неизвестна, хотя и был предпринят ряд попыток моделирования [3,[11][12][13]. Теперь же ситуация ко-ренным образом изменилась, поскольку была рас-шифрована структура большей части гомологич-ного канала Kv10.1 (EAG1) [14], которая может быть использована для моделирования взаимодействия кан...

show abstract

Neurotoxin-Derived Optical Probes for Biological and Medical Imaging

Ergen,

Shorter,

Ntziachristos

et al. 2023

Mol Imaging Biol

View full text Add to dashboard Cite

The superb specificity and potency of biological toxins targeting various ion channels and receptors are of major interest for the delivery of therapeutics to distinct cell types and subcellular compartments. Fused with reporter proteins or labelled with fluorophores and nanocomposites, animal toxins and their detoxified variants also offer expanding opportunities for visualisation of a range of molecular processes and functions in preclinical models, as well as clinical studies. This article presents state-of-the-art optical probes derived from neurotoxins targeting ion channels, with discussions of their applications in basic and translational biomedical research. It describes the design and production of probes and reviews their applications with advantages and limitations, with prospects for future improvements. Given the advances in imaging tools and expanding research areas benefiting from the use of optical probes, described here resources should assist the discovery process and facilitate high-precision interrogation and therapeutic interventions.

show abstract

In vitro fluorescence assay to study the folding of Kv ion channels

Cited by 3 publications

References 45 publications

Three-dimensional structure of human voltage-gated ion channel Kv10.2 studied by electron microscopy of macromolecules and molecular modeling

Three-dimensional structure of human voltage-gated ion channel Kv10.2 studied by electron microscopy of macromolecules and molecular modeling

Molecular modeling of the tetramerization domain of human potassium channel Kv10.2 in different oligomeric states

Neurotoxin-Derived Optical Probes for Biological and Medical Imaging

Contact Info

Product

Resources

About