Kurangnya pemanfaatan daging ayam petelur afkir karena kualitas dagingnya rendah dengan tekstur yang keras dan liat serta beraroma amis, sehingga sebagian besar konsumen kurang menyukai produk tersebut. Salah satu upaya untuk meningkatkan kualitas daging adalah menggunakan whey kefir. Whey kefir merupakan cairan bening hasil endapan proses pembuatan kefir. Kefir merupakan hasil sampingan olahan susu yang diolah melalui proses fermentasi dengan berbagai jenis mikrob yaitu Bakteri Penghasil Asam Laktat (BAL), bakteri penghasil asam asetat, dan khamir. Penelitian ini bertujuan mengetahui efektivitas penggunaan whey kefir pada daging ayam petelur afkir terhadap kualitas oganoleptik. Penelitian dilaksanakan pada bulan Februari 2023 di Balai Besar Pelatihan Kesehatan Hewan Cinagara Bogor dilanjut pengujian organoleptik di laboratorium Fakultas Pertanian, Universitas Djuanda Bogor. Penelitian ini menggunakan bahan dari daging dada ayam petelur afkir berumur 80 minggu dengan bobot 1,5 kg sebanyak 120 sampel dengan ukuran 2 x 2 (cm), whey kefir, akuades. Metode yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) 4 perlakuan dengan 5 ulangan dengan analisa Kruskall Wallis dilanjut uji oneway Annova. Perlakuan terdiri: P0 (kontrol), P1 (5 ml whey kefir + 95 ml akuades), P2 (10 ml whey kefir + 90 ml akuades), dan P3 (15 ml whey kefir + 85 ml akuades). Variabel yang diamati yakni uji organoleptik yang terdiri dari aroma, keempukan, warna, rasa, dan juiceness. Hasil penelitian menujukkan tidak adanya pengaruh nyata (P>0,05) terhadap peubah warna, rasa, dan juiceness, tetapi berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap peubah keempukan untuk uji hedonik dan aroma serta keempukan pada uji mutu hedonik daging dada ayam petelur afkir. Kesimpulan dari penelitian ini menujukkan bahwa pengujian organoleptik dari proses perendaman whey kefir terhadap daging dada ayam petelur afkir dengan konsentrasi tertinggi 15 ml dapat memperbaiki karakteristik keempukan untuk uji hedonik serta karakteristik aroma dan keempukan pada uji mutu hedonik daging dada ayam petelur afkir.