Identificação por PCR e sensibilidade a antifúngicos de isolados clínicos vaginais de Candida sp

Abstract

Introdução: A candidíase vaginal é uma condição que afeta um grande número de mulheres em idade fértil. Candida albicans é a espécie mais frequentemente isolada de secreção vaginal, entretanto, outras espécies mais resistentes às drogas antifúngicas podem ser isoladas de amostras clínicas vaginais. Métodos: Foram identificadas as espécies de 30 isolados vaginais de Candida sp por PCR utilizando o primer universal ITS4 e primers espécie-específicos para C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis e C. krusei. A sensibilidade destes isolados frente à anfotericina B, fluconazol e voriconazol foi determinada pelo método de macrodiluição M27-A2 do CLSI. Resultados: Através dos ensaios de PCR, 28 isolados foram caracterizados como C. albicans e 2 isolados apresentaram amplificação para os primers específicos de C. albicans e C. glabrata. A concentração inibitória mínima para anfotericina B variou de 0,03µg/mL a 0,25µg/mL, para o fluconazol de 0,125µg/mL a 16µg/mL e para o voriconazol de 0,03µg/mL a 0,25µg/mL. Conclusões: A identificação de Candida ao nível de espécie através de ensaios de PCR deve ser relevante para o gerenciamento clínico destas infecções. Palavras-chaves:Candida sp. Antifúngicos. PCR. ABSTRACT Introduction:Vaginal candidiasis is a condition that affects innumerous fertile women. Candida albicans is the most frequently isolated species from vaginal discharge; however, other different species that are more resistant to antifungal drugs can be identified in vaginal clinical samples. Methods: The species of 30 vaginal Candida isolates was identified by PCR using the universal ITS4 primer and species-specific primers for C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis and C. krusei. The sensitivity pattern to amphotericin B, fluconazole and voriconazole was assessed using the CLSI M27-A2 macrodilution method. Results: The PCR assay revealed 28 C. albicans and 2 samples showed amplification for C. albicans and C. glabrata primers. The minimum inhibitory concentration for amphotericin B ranged from 0.03µg/mL to 0.25µg/ mL, for fluconazole from 0.125µg/ml to 16µg/mL and for voriconazole from 0.03µg/mL to 0.25µg/m. Conclusions: Identification at Candida species level by PCR assay could be relevant for clinical management of these infections.

Associação entre cultura de secreção vaginal, características sociodemográficas e manifestações clínicas de pacientes com diagnóstico de candidíase vulvovaginal

“…A queixa de corrimento vaginal é a principal razão que leva mulheres do mundo inteiro a procurar serviços de saúde, sendo as vaginites infecciosas as causas mais comuns 2,4 . Embora na prática médica o diagnóstico das vulvovaginites seja essencialmente clínico, ele é considerado inadequado, e sugere-se que deve ser confirmado por exames microbiológicos clássicos baseados em cultura ou utilizando-se técnicas moleculares 2,4,5 . Além disso, considerando-se a emergente resistência antimicrobiana, é sugerido o isolamento e identificação da levedura, evitando-se terapias empíricas desnecessárias às pacientes 7,20,27 .…”

“…Este estudo, confirmando os dados da literatura nacional e internacional, indica a predominância da espécie C. albicans como a mais frequentemente associada à CVV 5,6,8,9,12,15,18,[20][21][22]29 e C. glabrata como a segunda espécie mais prevalente 3,[5][6][7][8][9]12,17,21,23,26,27,29 . Tem sido registrada a participação de C. lusitaniae em infecções tanto mono quanto polimicrobianas, tal como observado neste estudo, considerando-se a etiologia polimicrobiana da CVV 9,10,15 .…”

“…Na Europa e em outras regiões, a CVV é a causa mais comum de vaginite, e estima-se em todo o mundo que 75% das mulheres apresentam, durante a sua vida, pelo menos um episódio de candidíase vulvovaginal 1 . A prevalência de Candida albicans na etiologia da CVV é relatada de forma abundante na literatura, embora a ocorrência de outras espécies, como C. glabrata, C. tropicalis, C. guillermondii e C. parapsilosis tem sido cada vez mais frequente [5][6][7][8] . Além disso, outras espécies como C. krusei, C. kefyr e C. lusitaniae tem sido apontadas como emergentes [9][10][11][12][13][14][15] .…”

“…Além disso, outras espécies como C. krusei, C. kefyr e C. lusitaniae tem sido apontadas como emergentes [9][10][11][12][13][14][15] . A etiologia da CVV tem sido, ainda, associada a mais de uma espécie de Candida ou à associação de Candida com outros micro-organismos 5,6,12,16,17 .…”

Bloodstream infection by candida in patients with hematologic neoplasia: polyphasic taxonomy and antifungal susceptibility / Infecção sanguínea por candida em pacientes com neoplasia hematológica: taxonomia polifásica e suscetibilidade antifúngica

“…(Colombo et al, 2013). In cases of invasive candidiasis, C. albicans remains the most frequent species (Ahmadii et al, 2014;Colombo et al, 2013;Mímica et al, 2009;Taj-Aldeen et al, 2014;Guo et al, 2020), however, Candida non-albicans species have emerged, promoting infections due to increased prophylactic use of antifungal drugs in critically ill patients (Chen et al, 2012;Barretti et al, 2013;Pfaller et al, 2002), which may be contributing to the emergence of resistant species that hinder the treatment of BSI (Alves et al, 2010).…”