Histological and Immunohistochemical Study of Clinically Normal Skin of Leishmania infantum-infected Dogs

Solano‐Gallego, Laia; Fernández-Bellón, Hugo; Morell, Pere; Fondevila, Dolors; Alberola, Jordi; Ramis, Antonio; Ferrer, L.

doi:10.1016/s0021-9975(03)00063-x

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“…(FERRER et al, 1988;BOURDOISEAU et al, 1997;SOLANO-GALLEGO et al, 2004;TAFURI et al, 2004;XAVIER et al, 2006), verificando-se maior sensibilidade em relação à técnica HE, mas variando de acordo com os sinais clínicos, entre 92,7, 76,0 e 100,0%, respectivamente, para cães sintomáticos, oligossintomáticos e assintomáticos (MOREIRA et al, 2007). O método IMIQ permite, portanto, uma melhor visualização do parasita, pois possibilita um alto grau de contraste entre os parasitas e o tecido do hospedeiro, sendo possível o diagnóstico mais preciso da LVC (ORDEIX et al, 2005).…”

Section: Grupos (N)unclassified

“…Por outro lado, esse cão apresentou DNA do parasita em sua pele sadia. Em concordância, Solano-Gallego et al (2004) demonstraram que nas peles dos cães assintomáticos sem lesões macroscópicas ou amastigotas a PCR era positiva. Essa observação indica que o número de parasitas devia ser muito baixo e de difícil identificação, mesmo na técnica imunoistoquímica.…”

Section: Classificação Das Peles (N)unclassified

“…As lesões de pele, como a alopecia e as dermatites, são comuns na Leishmaniose Visceral Canina (LVC) (SOLANO-GALLEGO et al, 2004;ORDEIX et al, 2005). No entanto, a maioria dos cães infectados não apresenta sinal clínico (CABRAL et al, 1998) e mesmo na pele clinicamente sadia pode haver a presença de parasitas, o que alerta para a importância desses animais no ciclo de transmissão da doença (SOLANO-GALLEGO et al, 2004).…”

Section: Introductionunclassified

“…No entanto, a maioria dos cães infectados não apresenta sinal clínico (CABRAL et al, 1998) e mesmo na pele clinicamente sadia pode haver a presença de parasitas, o que alerta para a importância desses animais no ciclo de transmissão da doença (SOLANO-GALLEGO et al, 2004).…”

Section: Introductionunclassified

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Diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina pelas técnicas de imunoistoquímica e PCR em tecidos cutâneos em associação com a RIFI e ELISA-teste

Queiroz¹,

Assis²,

Oliveira³

et al. 2010

Rev. Bras. Parasitol. Vet. (Online)

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ResumoO objetivo deste trabalho foi avaliar as técnicas de imunoistoquímica (IMIQ) e de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) em tecidos cutâneos para o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) e compará-los com os exames parasitológicos em tecidos corados histoquimicamente (hematoxilina-eosina, HE) e com testes sorológicos, como a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA). Dos 34 cães naturalmente infectados, classificados em assintomáticos, oligossintomáticos e polissintomáticos, foram coletadas amostras de pele sadia ou com lesão para a realização da IMIQ, HE e PCR. Não somente peles lesionadas (56,5%), mas também sadias (31,8%) encontravam-se positivas pela IMIQ, confirmadas posteriormente pela PCR em 97,8% das amostras. No grupo assintomático, 87,5% estavam negativos pelos testes sorológicos, mas positivos em 50% dos casos pela IMIQ e 100% pela PCR. Entre os oligossintomáticos, 100%, 85,7% e 28,6% encontravam-se positivos, respectivamente, pela PCR, sorologia e IMIQ. Os cães polissintomáticos eram 91,7% soropositivos e tinham parasitas na pele. Em geral, a técnica PCR teve maior positividade (100%). A eficiência dos testes variou de acordo com a evolução da doença, demonstrando a necessidade da associação de técnicas, usando-se IMIQ para confirmação da sorologia e a PCR apenas nos casos suspeitos após a IMIQ. Dessa forma, pode-se aumentar os níveis de positividade e contribuir para o controle desta zoonose.Palavras-chave: Leishmania, cães, pele, imunoistoquímica, PCR. AbstractThe purpose of the present study was to evaluate the immunohistochemistry (IMHC) and PCR (Polymerase Chain Reaction) tests for Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) diagnosis and compare the results with serological tests such as the indirect fluorescence antibody test (IFAT), ELISA and a parasitological test (microscopic direct examination of the parasite stained with haematoxylin and eosin -HE). For this study, samples of healthy or lesion skin tissues were obtained from 34 CVL naturally infected dogs classified in three groups: asymptomatic, oligosymptomatic and polisymptomatic. Not only lesion (56.5%) but also healthy skins (31.8%) were positives by IMHC and confirmed by PCR in 97.8% of skin samples. In asymptomatic group, 87.5% dogs were negatives by serological tests, but positives by IMHC in 50% and by PCR in 100%. In oligosymptomatic group, 100%, 85.7% and 28.6% of dogs were positives, respectively by PCR, serological and IMHC tests. In addition, 91.7% of polisymptomatic dogs were serum positive and had intact parasites in the skin. In general, PCR showed higher positivity (100%). The efficiency of each test varied with the evolution of the disease. IMHC may be used to confirm the results of the serology and PCR in inconclusive cases after HE and IMHC. The association of techniques proposed in this study may increase the positivity and contributed to the control of this canine disease.

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Section: Grupos (N)unclassified

Section: Classificação Das Peles (N)unclassified

Section: Introductionunclassified

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Diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina pelas técnicas de imunoistoquímica e PCR em tecidos cutâneos em associação com a RIFI e ELISA-teste

Queiroz¹,

Assis²,

Oliveira³

et al. 2010

Rev. Bras. Parasitol. Vet. (Online)

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“…Esta variação na manifestação clínica da leishmaniose canina se deve a vários mecanismos patológicos da doença e a diversidade de respostas imunológicas do hospedeiro (BRACHELENTE et al, 2005;PAPADOGIANNAKIS et al, 2005;SOLANO-GALLEGO et al, 2004). A resposta imune à infecção por Leishmania, no cão, pode ser tanto predominantemente celular como humoral (SLAPPENDEL;FERRER, 1998).…”

Section: Introductionunclassified

Imunomarcação de células CD3+ e CD79a+ nas lesões descamativas e ulcerativas de cães com leishmaniose

et al. 2008

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ResumoA leishmaniose visceral canina é uma doença infecciosa crônica considerada endêmica em algumas regiões do estado de São Paulo e, apesar de ser uma enfermidade sistêmica, no cão, a maioria dos sinais clínicos são dermatológicos. Foram avaliados trinta cães com diagnóstico de leishmaniose, da região de Araçatuba, pelos exames parasitológico (punção aspirativa por agulha fina de linfonodos) e sorologia (IFI). Os cães apresentando unicamente sinais dermatológicos formam divididos em dois grupos: um grupo com descamação e outro com ulceração. Houve diferença estatística entre a população de células CD3+ e CD79a+ dentro do mesmo padrão dermatológico, o mesmo ocorreu com a população de CD79a+ entre os padrões descamativo e ulcerativo (p<0,05). Palavras-chave: Dermatite descamativa, dermatite ulcerativa, leishmaniose, imunoistoquímica, cão AbstractCanine visceral leishmaniasis is an endemic infectious disease in some regions from São Paulo state and even though it is a systemic disease, in the dog, the main clinical sign is dermatological. Thirty dogs with positive results in serology (IFI) and parasitological exams (fine needle aspiration) for leishmaniasis from Araçatuba city were evaluated. They only showed dermatological signs and were divided in two groups, one with exfoliative (n=15) and other with ulcerative (n=15) lesions. There was significant statistical difference between CD3 and CD79a population in the same dermatological pattern, and with CD79a population between exfoliative and ulcerative patterns (p<0,05).

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Effects of extracellular vesicles released by peritoneal B-1 cells on experimental Leishmania (Leishmania) amazonensis infection

Toledo

Andrade

Barbosa

et al. 2020

Journal of Leukocyte Biology

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B-1 cells are a B-lymphocyte subtype whose roles in immunity are not completely defined. These cells can produce cytokines (mainly IL-10) and natural and specific antibodies. Currently, extracellular vesicles (EVs) released by immune cells have emerged as new important entities in cellcell communication. Immune cells release EVs that can activate and/or modulate other immune cells. Here, we characterized the EVs released by peritoneal B-1 cells infected or not with Leishmania (Leishmania) amazonensis. This Leishmania species causes cutaneous leishmaniasis and can infect macrophages and B-1 cells. Our results showed that peritoneal B-1 cells spontaneously release EVs, but the parasite stimulated an increase in EVs production by peritoneal B-1 cells. The treatment of BALB/c and C57BL/6 bone marrow-derived macrophages (BMDM) with EVs from infected peritoneal B-1 cells led to differential expression of iNOS, IL-6, IL-10, and TNF-. Additionally, BALB/c mice previous treated with EVs released by peritoneal B-1 cells showed a significant lower lesion size and parasite burden. Thus, this study demonstrated that peritoneal B-1 cells could release EVs that can alter the functions of macrophages in vitro and in vivo these EVs altered the course of L. amazonensis infection. These findings represent the first evidence that EVs from peritoneal B-1 cells can act as a new mechanism of cellular communication between macrophages and B-1 cells, contributing to immunity against experimental leishmaniasis.

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Histological and Immunohistochemical Study of Clinically Normal Skin of Leishmania infantum-infected Dogs

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Diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina pelas técnicas de imunoistoquímica e PCR em tecidos cutâneos em associação com a RIFI e ELISA-teste

Diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina pelas técnicas de imunoistoquímica e PCR em tecidos cutâneos em associação com a RIFI e ELISA-teste

Imunomarcação de células CD3+ e CD79a+ nas lesões descamativas e ulcerativas de cães com leishmaniose

Effects of extracellular vesicles released by peritoneal B-1 cells on experimental Leishmania (Leishmania) amazonensis infection

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