Genotipificación de los genes msp1 (bloque 2) y dhfr (codón108) de Plasmodium falciparum en muestras de campo recolectadas en cuatro localidades endémicas de Colombia.

Abstract

Genotipificación de los genes msp1 (bloque 2) y dhfr (codón108) de Plasmodium falciparum en muestras de campo recolectadas en cuatro localidades endémicas de Colombia Introducción. Plasmodium falciparum es un parásito altamente polimórfico, lo cual le permite evadir la respuesta inmune del hospedero, diseminar la resistencia a medicamentos y favorecer la transmisión. Objetivos. Analizar la diversidad genética de las poblaciones de P. falciparum en muestras de cuatro zonas endémicas de malaria en Colombia. Materiales y métodos. Se incluyeron muestras de sangre recolectadas en papel de filtro de 123 pacientes con malaria no complicada por P. falciparum durante los años 2002 a 2004; la genotipificación se realizó mediante reacción en cadena de la polimerasa con iniciadores específicos para los marcadores moleculares de la región polimórfica del bloque 2 del gen msp1 y del codón 108 de dhfr. Resultados. En el bloque 2 del gen msp1 se detectó MAD20 en 95,9% (118/123; IC 95%: 90,8 a 98,7), K1 en 6,5% (8/123; IC 95%: 2,8 a 12,4) y RO33 en 2,4% (3/123; IC 95%: 0,5 a 6,9) de las muestras. Para el gen dhfr, el alotipo mutante N108 se detectó en todas las muestras analizadas y el alotipo T108 en 3,2% (4/123; IC 95%: 0,9 a 8,1); el alotipo silvestre S108 se encontró en 34,1% (42/123; IC 95%: 25,8 a 43,2). Al combinar los resultados de ambos genes, el 61,8% (76/123; IC 95%: 52,6 a 70,4) de las muestras correspondieron a infecciones simples y el 38,2% (47/123; IC 95%: 29,6 a 47,4) a infecciones mixtas, siendo MAD20/N108-S108 la combinación más frecuente entre estas últimas (30,1%). Conclusiones. Las infecciones simples, o sea, la presencia de un solo alelo en cada uno de los genes, predominaron en las muestras estudiadas; las poblaciones de parásitos analizadas fueron muy homogéneas en su composición genética.Palabras clave: Plasmodium falciparum, PCR, variación (genética), polimorfismo (genética), Colombia. Genotyping of the Plasmodium falciparum msp1 (block 2) and dhfr (codon 108) genes in field samples collected in four endemic Colombian localitiesIntroduction. Plasmodium falciparum is a highly polymorphic parasite, which allows it to evade the host´s immune response, spread drug resistance and favours transmission. Objectives. To analyse the genetic diversity of P. falciparum populations in samples from four endemic localities in Colombia. Materials and methods. 123 blood samples were collected on filter paper from patients with non-complicated P. falciparum malaria during 2002 to 2004. The samples were genotyped using polymerase chain reaction with specific primers for the polymorphic region of block 2 of the msp1 gene and the 108 codon of the dhfr gene.Results. In msp1 block 2, 95.9% (118/123; 95% CI: 90.8-98.7) of the samples harboured MAD20; 6.5% K1 (8/123; 95% CI: 2.8-12.4) and 2.4% RO33 (3/123; 95% CI: 0.5-6.9). For the dhfr gene the mutant allele N 108 was found in all the samples amplified, T 108 in 3.2 % and the

Genotipificación de Plasmodium falciparum por PCR múltiple por medio de los genes msp1, msp2 y glurp, en cuatro localidades de Colombia

“…En relación con el gen msp1, nuestros resultados al igual que los de otros investigadores (12,20,28) muestran el predominio de la familia alélica MAD20. No se detectó polimorfismo de tamaño, Figura 3.…”

“…Los resultados de Guerra et al (28) mostraron que en La Carpa sólo se encontró la familia alélica MAD20, mientras que en Casuarito se detectaron las tres familias; sin embargo, al igual que en este estudio, no se observó polimorfismo de tamaño en MAD20 y siempre se obtuvo una banda de 150 pb.…”

“…Se utilizó el protocolo descrito por Snounou, et al Vale la pena mencionar que las muestras de La Carpa y Casuarito habían sido previamente genotipificadas con el gen msp1 (28). En el presente estudio estas 20 muestras fueron analizadas para los genes msp2 y glurp y con las 61 muestras restantes y las tres muestras obtenidas de los pacientes que presentaron fracaso al tratamiento, se estudiaron los tres genes.…”

Mutaciones puntuales en los genes dhfr y dhps de Plasmodium falciparum de tres regiones endémicas

“…Para las muestras procedentes de La Carpa y Casuarito, el ADN se extrajo utilizando el estuche comercial (QIAmp DNA Micro kit QIAGEN) y siguiendo las recomendaciones del fabricante, y para las muestras de Tierralta y Puerto Libertador el ADN se extrajo mediante el método de Chelex y calentamiento (11).…”

Perfiles clínicos del paludismo no complicado por Plasmodium falciparum en Córdoba, Colombia

“…El desarrollo de cierto grado de inmunidad en población adulta residente en zonas endémicas, después de múltiples exposiciones a la infección, puede disminuir la frecuencia de los episodios palúdicos, reducir la gravedad de los síntomas y signos, o ambos (29). Algunos estudios proponen que las diferencias en la presentación clínica pueden reflejar heterogeneidad en la virulencia del parásito (30), pero es poco probable que esto pueda explicar las diferencias observadas debido a que las poblaciones de parásitos circulantes en los dos municipios estudiados son bastante homogéneas (31).…”