Fibrinolytic protease production by new Streptomyces sp. DPUA 1576 from Amazon lichens

Silva, Germana Michelle de Medeiros e; Bezerra, Raquel Pedrosa; Teixeira, J. A.; Porto, Tatiana Souza; Lima-Filho, J. L.

doi:10.1016/j.ejbt.2014.11.001

Cited by 20 publications

(13 citation statements)

References 22 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…This result corresponds to a 41% increase in the enzyme activity, when compared to fibrinolytic activity of 215 mm² using Bacillus licheniformis KJ-31 (Hwang et al 2007). Silva et al (2015) showed that Streptomyces sp. DPUA 1576 produced the highest fibrinolytic activity of 706.5 mm 2 at 1.7% soybean flour and 1.0% glucose concentration, which was 33% higher than plasmin.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

See 1 more Smart Citation

Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens

et al. 2016

View full text Add to dashboard Cite

Thrombosis is a pathophysiological disorder caused by accumulation of fibrin in the blood. Fibrinolytic proteases with potent thrombolytic activity have been produced by diverse microbial sources. Considering the microbial biodiversity of the Amazon region, this study aimed at the screening, production and biochemical characterization of a fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. isolated from Amazonian lichens. The strain Streptomyces DPUA1576 showed the highest fibrinolytic activity, which was 283 mm 2 . Three variables at two levels were used to assess their effects on the fibrinolytic production. The parameters studied were agitation (0.28 -1.12 g), temperature (28 -36 ºC) and pH (6.0 -8.0); all of them had significant effects on the fibrinolytic production. The maximum fibrinolytic activity (304 mm 2 ) was observed at 1.12 g, 28 ºC, and pH of 8.0. The crude extract of the fermentation broth was used to assess the biochemical properties of the enzyme. Protease and fibrinolytic activities were stable during 6 h, at a pH ranging from 6.8 to 8.4 and 5.8 to 9.2, respectively. Optimum temperature for protease activity ranged between 35 and 55 °C, while the highest fibrinolytic activity was observed at 45 ºC. Proteolytic activity was inhibited by Cu 2+ and Co 2+ ions, phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) and pepstatin A, which suggests that the enzyme is a serine protease. Enzymatic extract cleaved fibrinogen at the subunits Aα-chain, Aβ-chain, and γ-chain. The results indicated that Streptomyces sp. DPUA 1576 produces enzymes with fibrinolytic and fibrinogenolytic activity, enzymes with an important application in the pharmaceutical industry. KEYWORDS: Actinomycetes, fibrinolytic protease, inhibitor protease, fibrinogenolytic activity.Seleção, produção e caracterização bioquímica de uma nova enzima fibrinolítica produzida por Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolada de liquens da Amazônia RESUMO A trombose é uma doença patofisiológica causada pelo acúmulo de fibrina no sangue. Proteases fibrinolíticas com potente atividade trombolítica são produzidas por diversas fontes microbianas. Considerando a biodiversidade microbiana da região amazônica, o presente estudo teve como objetivo a seleção, produção e caracterização bioquímica da enzima fibrinolítica de Streptomyces sp. isolado de líquens da Amazônia. Streptomyces DPUA1576 foi a melhor produtora com atividade fibrinolítica de 283 mm 2 . Três variáveis em dois níveis foram utilizadas para determinar as variáveis mais relevantes na produção da enzima fibrinolítica (FA). Os parâmetros estudados foram agitação (0.28 -1.12 g), temperatura (28 -36 ºC) e pH (6.0 -8.0) e todos obtiveram efeitos significativos na produção fibrinolítica. A maior atividade fibrinolítica (304 mm 2 ) foi obtida a 1.12 g, 28 ºC e pH 8.0. O extrato bruto da fermentação foi usado para determinar as propriedades bioquímicas da enzima. Atividades proteásica e fibrinolítica foram estáveis durante 6 horas no intervalo de pH entre 6.8 -8.4 e 5.8 -9.2, respectivamente. Temperatura ...

show abstract

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

“…Proteases constitute two thirds of the total number of enzymes used in industry and this is expected to increase. Some of these proteases are fibrinolytic enzymes capable of digesting fibrin (Silva et al 2015).…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens

et al. 2016

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Подібні дані, отримані нами щодо позитивного впливу кукурудзяного борошна на синтез протеаз Streptomyces, в літературі не зустрічаються. Є свідчення про використання соєвого борошна і кукурудзяного екстракту [11]. Карбон повинен бути легко доступним для споживання, а також міститись в сировині, яка є економічно вигідною, тобто повинна бути дешевою.…”

Section: матеріали і методи об'єктом дослідження був штам актинобактunclassified

Streptomyces sp. 12 Protease: Purification and Properties

Nidialkova¹,

Varbanets²,

Schepelevich³

et al. 2017

Mikrobiol. Z.

View full text Add to dashboard Cite

ПРОТЕАЗА STREPTOMYCES SP. 12: ОЧИЩЕННЯ І ВЛАСТИВОСТІ Мета. Оптимізувати умови культивування Streptomyces sp. 12 для забезпечення максимального синтезу протеаз, одержати очищений препарат протеази, дослідити її субстратну специфічність, фізико-хімічні властивості та функціональні групи активного центру. Методи. Оптимізацію умов культивування за допомогою однофакторних експериментів проводили на базовому середовищі наступного складу(г/л): K 2 HPO 4 -1; MgSO 4 • 7H 2 O -1; NaCl -1; (NH 4 ) 2 SO 4 -2; CaCO 3 -2; крохмаль -10; розчин солей мікроелементів (FeSO 4 • 7H 2 O -1, MnCl 2 • 4H 2 O -1, ZnSO 4 • 7H 2 O -1) -1 мл. Загальну казеїнолітичну (протеолітичну) активність визначали кількісно за тирозином, що утворюється при гідролізі казеїну під дією досліджуваного ензиму. Для виділення та очищення ензиму застосовували осадження (NH 4 ) 2 SO 4 90% насичення, хроматографію на нейтральних та заряджених TSKгелях. Результати. Встановлено, що оптимальними джерелами карбону, нітрогену і мінерального живлення в поживному середовищі є кукурудзяне борошно, (NH 4 ) 2 SO 4 і CaCl 2 відповідно. При вирощуванні Streptomyces sp. 12 в глибинних умовах культивування протягом трьох діб в 200 мл оптимізованого поживного середовища при початковому значенні рН 7,0, температурі 37°С, швидкості обертання качалки 220 об/хв питома протеолітична активність становила 62,7 од•мг протеїна -1 , що в 4,8 рази вище в порівнянні з контролем (базове середовище). Фракціонуванням сульфатом амонію, гель-фільтраційною та іонообмінною хроматографією на TSK-гелях -Toyopearl HW-55, DEAE 650(M) і Sepharose 6B була отримана протеаза Streptomyces sp. 12 з питомою активністю 538 од•мг протеїна -1 і виходом 35,8%. Молекулярна маса протеази Streptomyces sp. 12 складала ~35,6 кДа. Показано, що ензим проявляє найвищу активність до колагену та меншу -до казеїну, альбуміну і желатину. Інгібування групоспецифічними реагентами виявило, що досліджувана протеаза є металопротеазою з оптимальними умовами дії на колаген при рН 8,0 і температурі 50°С. Висновки. Одержана протеаза Streptomyces sp. 12 з питомою протеолітичною активністю 538 од•мг протеїна -1 , що в 8,6 разів вище, ніж активність в супернатанті культуральної рідини.

show abstract

“…O uso de ativadores de plasminogênio para o tratamento da trombose tem sido utilizado como alternativa para a terapia fibrinolítica há mais de 30 anos. Tais ativadores são sintetizados pela engenharia genética e possuem alta afinidade com a fibrina, tornando-se um agente de origem humana seguro, entretanto de alto custo (Tian et al, 2015). Diante dessa dificuldade, tem-se estimulado a utilização de micro-organismos para se obterem proteases fibrinolíticas de alta eficácia, baixo custo e maior capacidade de produção (Deepak et al, 2010).…”

Section: Introductionunclassified

Produção e purificação integrada de protease fibrinolítica de Mucor subtilissimus UCP 1262

Clementino

Sales

Cunha

et al. 2019

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

View full text Add to dashboard Cite

RESUMO As enzimas fibrinolíticas podem ser obtidas de micro-organismos por meio de processos fermentativos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção e extração integrada da protease fibrinolítica de Mucor subtilissimus UCP 1262 usando sistema de duas fases aquosas (SDFA). O processo integrado foi realizado para avaliar a produção, partição e recuperação da protease fibrinolítica, segundo planejamento experimental 23, utilizando como variáveis independentes a massa molar do polietileno glicol (PEG), a concentração do PEG e a concentração do sulfato de sódio. A maior atividade fibrinolítica (15,40U/mL) foi obtida na fase rica em sulfato de sódio no ensaio composto por 10% de sal e 18% de PEG 8000 (g/mol). Recuperações superiores a 80% foram obtidas. A protease fibrinolítica apresentou pH ótimo 7,0, estabilidade entre os pH 6,0 e 8,5, temperatura ótima 50°C, sendo estável de 10°C a 50°C. A enzima foi classificada como uma serino protease, com massa molecular de 52kDa. Como resultado, o processo é notavelmente eficaz para pré-purificar a protease fibrinolítica com baixo custo e rapidez significativa. Quando comparada a outras técnicas de produção e purificação isoladas, a fermentação extrativa é um processo digno a ser substituto das etapas iniciais de separação convencionais

show abstract

Fibrinolytic protease production by new Streptomyces sp. DPUA 1576 from Amazon lichens

Cited by 20 publications

References 22 publications

Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens

Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens

Streptomyces sp. 12 Protease: Purification and Properties

Produção e purificação integrada de protease fibrinolítica de Mucor subtilissimus UCP 1262

Contact Info

Product

Resources

About