Extraction en phase solide de 22 médicaments d'intérêt en toxicologie médico-légale

Abstract

Résumé -De nombreuses colonnes d'extraction en phase solide dédiées à l'extraction des toxiques et leurs protocoles spécifiques sont proposées à l'analyste. Nous avons optimisé l'un de ces protocoles pour l'extraction à partir de sang total -en une seule étape -de principes actifs de médicaments acides, neutres et basiques. Chaque niveau du protocole a été conçu de manière à obtenir les meilleurs rendements d'extraction. L'analyse des extraits (identification et quantification) a été réalisée à l'aide d'un système de High Performance Liquid Chromatography system with Diode Array Detector (HPLC-DAD). La colonne SPE Evolute ABN r (Acid Base Neutral) fournie par Argonaut est celle qui extrait le mieux les différents composés analysés parmi toutes les cartouches testées. La colonne Oasis HLB r (Hydrophilic Lipophilic Balance) proposée par Waters permet également l'extraction de la totalité des molécules mais avec des rendements inférieurs. Quant aux autres colonnes étudiées (distribuées par Varian et Phenomenex), elles ont pré-senté des résultats insuffisants dans le cadre de ce projet. Les limites de détection et de quantification obtenues avec ce protocole optimisé ont été comparées aux concentrations thérapeutiques et toxiques habituellement retrouvées. La mise au point de cette nouvelle procédure a permis d'optimiser une méthode de dépistage large (criblage) de médicaments fréquemment rencontrés dans les matrices biologiques en toxicologie clinique et médico-légale. Mots clés : Extraction en phase solide, colonnes SPE, médicaments, intoxication, criblageAbstract -Solid phase extraction of 22 drugs of interest in the forensic toxicology field. Many solid phase extraction columns which are dedicated to the extraction of various drugs associated with their specific protocols are proposed to the analyst. We have optimised a one stage procedure for the extraction from whole blood of acidic, neutral and basic drugs. Each step of the protocol has been optimised so as to obtain the best extraction recovery. The analysis of the extracts (identification and quantification) has been realised with the help of High Performance Liquid Chromatography system coupled with a Diode Array Detector (HPLC-DAD). The SPE Evolute ABN r column (Acid Base Neutral) by Argonaut is the column which does extract the more and the best the different analysed components among all the columns which have been tested. Oasis HLB r column (Hydrophilic Lipophilic Balance) by Waters also allows the extraction of the whole list of active principles studied but with lower recoveries. The other columns studied (sold by Varian and Phenomenex) presented insufficient results for this project. In the last step of the work we checked if the results did fit to the forensic toxicology purpose; detection and quantification limits have been compared to therapeutic and toxic concentrations usually found in forensic toxicology. Implementing this new procedure allowed us to create a method of comprehensive screening of drugs frequently implicated in forensic toxicolo...