Evaluation of an automated method for urinocolture screening

Abstract

INTRODUZIONELe infezioni delle vie urinarie (IVU), parallelamente a quelle del tratto respiratorio, rivestono grande rilevanza clinica per l'elevata frequenza con cui vengono riscontrate nella comune pratica medica e per le complicanze che ne derivano. In ambito nosocomiale risultano essere più frequentemente associate a manovre diagnostiche strumentali ed al cateterismo uretrale (3, 4). Esse sono causate principalmente da microorganismi Gram negativi con una prevalenza maggiore di Escherichia coli (70%) anche se si verificano sempre più frequentemente casi di infezioni complicate causate da batteri Gram positivi o da germi multiresistenti sui quali i comuni agenti antimicrobici risultano inefficaci portando inevitabilmente a fallimenti terapeutici (3). L'utilizzo dei tradizionali metodi di coltura su piastra prevedono tempi di crescita delle colonie e di refertazione dei campioni negativi di 24 ore e di 48 ore per quelli positivi. Questo discosta dalle esigenze del clinico di avere risultati in tempi rapidi per impostare una terapia mirata evitando l'utilizzo di antibiotici a largo spettro e migliorando così la gestione del paziente. Anche per quanto riguarda pazienti in età pediatrica risulta di rilevante importanza la tempestività del risultato dell'urinocoltura per iniziare la terapia antibiotica adeguata solo se necessario poiché in questi casi i sintomi di infezione delle vie urinarie non risultano sempre specifici. In secondo luogo i metodi tradizionali presentano diverse problematiche tra cui possibili errori nella manualità, variabilità nella determinazione della carica batterica dovuta alla capacità e all'esperienza del singolo operatore, la tracciabilità difficoltosa dei campioni e dei risultati. La possibilità di migliorare la risposta a queste problematiche è stata valutata per un metodo fra quelli attualmente in commercio che svolga, con procedura completamente automatizzata, lo screening dei campioni di urinocoltura afferenti al laboratorio. MATERIALI E METODINel mese di Giugno 2009 sono stati analizzati un totale di 316 campioni di urinocoltura comprendenti urina da mitto intermedio, urina da catetere, urina da sacchetto, afferenti al settore di microbiologia di pazienti ambulatoriali e ricoverati. Il protocollo prevede il confronto dei risultati ottenuti utilizzando l'analizzatore Alfred 60 (Alifax, Padova, Italy) ed il metodo di semina su piastra. Alfred60 esegue l'analisi batteriologica delle urine in modo automatico. Il sistema dispensa 500 µl di campione in cuvette di lettura dedicate (vials), contenenti brodo eugonico costantemente agitato e termostatato (37°C). Durante l'incubazione, ogni 5 min, il raggio laser attraversa la cuvetta permettendo al sistema di rilevare le variazioni di torbidità. Lo scatter prodotto viene, infatti, raccolto da due detector, uno posto a 30° e l'altro a 90° rispetto al raggio incidente, elaborato dal SW e visualizzato graficamente in tempo reale. La prima lettura di ogni campione evita che la torbidità iniziale dovuta a sali, eritrociti, leucociti o cellule di...

Evaluation of Sysmex UF-1000i and Alifax Alfred and HBL in rapid diagnosis of acute urinary tract infections in a hub and spoke setting

“…In this study, for Alfred and HB&L system, a cut-off value at 30000 UFC/mL after 180 minutes of incubation was adopted; this result was in good agreement with data from the literature (Ballabio et al, 2010;Ilki et al, 2010). The analy-tical performance of the instrumentation Alifax Alfred and HB&L, in comparison with the quantitative culture was extremely satisfactory in terms of SE (0.99) and SP (0.98).…”

“…Light scatter was collected by two detectors (at 30 and 90°), processed and displayed graphically. Bacterial growth detected by the instrument is then determined exclusively by live and replicants bacteria (Ballabio et al, 2010;Ilki et al, 2010).…”

“…In previous reports, it was suggested that, using a Sysmex UT-1000i cytometer, quantification of urine bacteria alone without quantification of leukocytes may be sufficient for a rapid diagnosis of UTI (Manoni et al, 2009). Considering cultural test for rapid diagnosis of UTI in Italy, the system Alifax Alfred and HB&L is largely diffused (Ballabio et al, 2010;Ilki et al, 2010). This system was used also for non urinary samples (Barocci et al, 2010;Cavallaro and Squarzon, 2009;Fontana et al, 2009;Tessari et al, 2010).…”

Accelerated bacteriological examination of urine and dialysate in the diagnosis of urinary tract infections in children

“…На мониторе анализатора уже через 1,0-1,5 часа обнаруживается кинетическая кривая роста бактерий, характер которой указывает на рост этиологически значимых микроорганизмов и возможных контаминантов в образце. Вследствие особенностей методики бактериальный рост, обнаруживаемый прибором, обусловлен исключительно живыми делящимися бактериями [4,5,6].…”

“…В настоящее время для исследования бактериурии эффективно используют ускоренные методы диагностики [2,4,5,6]. Культуральное исследование по методике лазерного светорассеивания для диагностики бактериурии применяется уже несколько лет [4,5], а опубликованных результатов исследования диализата данным методом в доступной литературе нами не обнаружено.…”