Evaluación de dimetilacetamida como crioprotector para la crioconservación de semen de bocachico Prochilodus magdalenae

Abstract

SUMMARYThe aim of this study was to e valuate the performance of dimethylacetamide (DMA) as cryoprotectant at three concentrations: 8% (0.85 M), 10% (1.07 M) and 12% (1.29 M), combined with glucose at 6% (0.33 M) and egg yolk at 12%, to cryopreserve semen of bocachico Prochilodus magdalenae. The semen was diluted at 1:4 ratio in the cryoprotective solution, packed in 2.5 mL straws and frozen in liquid nitrogen vapor (LN 2 ) for 30 minutes, then it was stored in a container with LN 2 of 34 L. The concentration, total motility, progressive motility and sperm speed in both fresh (control) and cryopreserved-thawed semen were evaluated using Sperm Class Analyzer (SCA). Straws were thawed in serological bath at 60°C for 45 seconds. Fertility and hatching were evaluated inseminating 2 g of eggs (1,540 eggs/g) at a rate of 320,000 spz/egg. Fresh semen recorded the highest values of total motility, total progressive, curvilinear speed and linear speed with regard to cryopreserved-thawed semen (P < 0.05); whereas cryopreservedthawed semen with DMA 8% and 10% recorded the higher values for these variables, without significant differences between them (P > 0.05). DMA 12% reported the lowest values of all the variables evaluating semen quality. Fresh semen obtained values of 74.0 ± 5.3% and 62.3 ± 3.1% for fertility and hatching, respectively, while cryopreserved-thawed semen with DMA at 8% produced adequate fertility (60.4 ± 8.4%) and hatching (50.1 ± 9.8%) values. The results of this study suggest that the cryoprotectant solution composed of DMA at 8%, glucose at 6% and egg yolk at 12% is a viable alternative for the cryopreservation of semen of bocachico.Key words: dimethylacetamide, cryopreservation, milt, Prochilodus magdalenae. RESUMENSe evaluó dimetilacetamida (DMA) como crioprotector, a tres concentraciones: 8% (0,85 M), 10% (1,07 M) y 12% (1,29 M) combinado con glucosa 6% (0.33 M) y yema de huevo 12% para crioconservar semen de bocachico Prochilodus magdalenae. El semen fue diluido en proporción 1:4 en la solución crioprotectora, empacado en pajuelas de 2,5 mL y congelado en vapores de nitrógeno líquido (N 2 L) durante 30 minutos y luego almacenados en un termo de N 2 L de 34 L. La concentración, movilidad total, progresividad y velocidad tanto en semen fresco (control) como en semen crioconservadodescongelado se evaluó con ayuda de Sperm Class Analyzer (SCA). Las pajuelas fueron descongeladas en baño serológico a 60°C durante 45 segundos. La fertilidad y eclosión fueron evaluadas inseminando dos gramos de huevos (1540 huevos/g) a razón de 320.000 spz/ovocito. El semen fresco registró mayores valores de movilidad total, progresividad total, velocidad curvilínea y velocidad lineal con respecto al semen crioconservado-descongelado (P < 0,05); mientras que el semen crioconservado-descongelado con DMA 8% y 10% registraron los mayores valores en estas mismas variables, sin observarse diferencia significativa entre ellos (P > 0,05). DMA 12% reportó los menores valores de todas las variables que evaluaron la calidad semina...

Evaluación de Dos Crioprotectores y Tres Curvas de Congelación Programable en la Criopreservación de Semen de Brycon henni (Pisces: Characidae)

“…El DMSO es uno de los crioprotectores permeables de bajo peso molecular más empleado en la criopreservación de semen de teleósteos tropicales, tales como yamú (Brycon siebenthalae), cachama blanca (Piaractus brachypomus) y bocachico (Prochilodus magdalenae) (Atencio et al, 2013). En esta investigación no se encontraron diferencias en la calidad seminal por efecto de los crioprotectores usados; sin embargo, en un estudio previo se había observado diferencias menores en la calidad del semen criopreservado de B. henni con EG y DMSO Dadas las escasas investigaciones existentes para la criopreservación seminal de B. henni, se hace necesario evaluar otras alternativas, como la combinación de crioprotectores y el modo de suplementación de otras sustancias protectoras.…”

Crioconservación de semen de dorada Brycon moorei con dimetilsulfóxido

“…Luego fueron mantenidos durante 48 h en tanques circulares de 3m 3 de volumen útil, con flujo de agua constante (5 L/min) para habituarlos a las condiciones experimentales, reducir la intensidad del estrés generado por la manipulación y el cambio de ambiente. Los machos seleccionados, con peso promedio de 1000±200 g estaban en fase de espermiación; es decir a leve presión en la cavidad celómica en sentido cráneo-caudal liberaron líquido seminal (Atencio et al, 2013). Los machos fueron inducidos con una dosis úni-ca de extracto hipofisario de carpa (EPC) a razón de 4,5 mg/Kg de peso vivo para incrementar el volumen seminal (Atencio, 2001).…”

“…En una cámara de conteo Makler (Sefi Medical Instruments Ltd, Israel) se colocó una muestra de 0,25 µl de semen y 75 µl de agua destilada (dilución 1:300); con ayuda de un microscopio óptico de contraste de fase (Nikon, E50i, Japón) y el programa Sperm Class Analyzer SCA (Microptic SL, SCA VET 01, España) se midió la movilidad total (Atencio et al, 2013).…”

“…Las muestras fueron analizadas en un periodo de cuatro segundos por el programa SCA®, obteniéndose los porcentajes de espermatozoides con velocidad rápida (tipo a, velocidades mayores a 100 µm/s), media (tipo b, velocidades entre 45 y 100 µm/s), lenta (tipo c, velocidades entre 10 y 45 µm/s), así como el porcentaje de células estáticas (tipo d o sin movimiento) (Atencio et al, 2013). El SCA® también estimó las velocidades curvilínea (VCL) y lineal (VSL).…”

“…Sin embargo en Colombia, los estudios de crioconservación de semen de peces nativos son recientes, destacándose los avances en el desarrollo de protocolos de crioconservación de cachama blanca Piaractus brachypomus (Navarro et al, 2004, Ramírez-Merlano et al, 2005, yamú Brycon amazonicus (CruzCasallas et al, 2004;Velasco-Santamaría et al, 2006), bagre rayado Pseudoplatystoma metaense (Ramírez-Merlano et al, 2011), bocachico Prochilodus magdalenae (Atencio et al, 2013) y bagre blanco Sorubim cuspicaudus (Atencio-García et al, 2014); con resultados satisfactorios del semen crioconservado en la reproducción artificial de estas especies.…”