RESUMO -Diferente da rota química, a utilização da rota enzimática na produção de biodiesel garante vantagens como a fácil recuperação do biocatalisador, a elevada seletividade e a menor formação de produtos secundários. Partindo-se disso, este trabalho tem como objetivo a síntese de ésteres etílicos (biodiesel) por meio da esterificação do óleo de frango, utilizando-se de lipases combinadas. Para tal resultado, empregaram-se, na combinação enzimática, ensaios que verificassem a atividade da enzima, chagando-se na combinação das lipases comerciais Lipozyme ® RM-IM (75%) e Novozyme ® 435 (25%), para uma razão molar 1:1 (etanol: óleo de frango), em agitação de 150 rpm e para as condições experimentais fatoriais completas 2³ geradas pelo software STATISTICA ® , sendo a melhor conversão do substrato em ésteres etílicos (58,85±0,38%) nas condições 40°C, usando 6% de biocatalisador e 10% de água. Ao final, a produção do biodiesel foi confirmada por meio da análise qualitativa da Cromatografia em Camada Delgada -(CDD), o que também indicou a formação de ácidos graxos não reagidos.