Ensaios de padronização do teste ELISA para diagnóstico da cisticercose bovina utilizando antígenos de larva de Taenia crassiceps

Abstract

ResumoOs antígenos total e vesicular de Taenia crassiceps e soros-controle de bovinos positivos e negativos para a cisticercose foram comparados por meio de alguns parâmetros de padronização do teste ELISA, visando avaliar o seu desempenho no diagnóstico da referida doença. Os parâmetros avaliados foram: diferentes concentrações dos antígenos, diluições de soros e conjugados, marcas de placa e substâncias bloqueadoras das placas. As diluições 1:25 de soro e 1:2.500 de conjugado para o antígeno de líquido vesicular e 1:5.000 para o antígeno total, o leite desnatado e as maiores concentrações dos antígenos testadas (1, 2 e 4 µg/orifício) foram os critérios de padronização que proporcionaram maior diferenciação entre soros positivos e negativos, conseqüentemente, melhor desempenho do teste ELISA.Palavras-chave: cisticercose bovina, Taenia crassiceps, ELISA, antígeno. AbstractUsing the cyst fluid and the total antigens of Taenia crassiceps and positive and negative bovine control sera, some standardization parameters of one ELISA were compared, in order to evaluate its performance in the diagnosis of the bovine cysticercosis. The referred parameters were different antigen concentrations, dilutions of sera and conjugated, plate marks and blocking substances. The 1:25 dilution sera and 1:2.500 dilution conjugated for the cyst fluid antigen and 1:5.000 for the total antigen, the skimmed milk and the largest antigens concentrations (1, 2 and 4 µg/well) improved the differentiation among positive and negative sera, consequently, they were the best criteria for the bovine cysticercosis determination employing the ELISA.

Infecção experimental em bovinos: cinética da produção de imunoglobulinas IgM e IgG contra cisticercose bovina e resposta inflamatória

“…O material foi dessorado e estocado a -20ºC com vistas à sua utilização nos ensaios laboratoriais de acordo com a metodologia empregada por Monteiro (2004) utilizando-se antígeno total (bruto) de Taenia crassiceps e anticorpos específicos conjugados com peroxidase contra IgM (A10-100P, Bethyl, Montgomery, TX, USA), IgG total (A5295, Sigma Chemical Co., St Louis, MO, USA) e IgG 1 (AAI21P, AbD Serotec, Kidlington, Oxford, UK) e IgG 2 (AAI22P, AbD Serotec, Kidlington, Oxford, UK).…”

“…A intensidade da resposta imune observada nas infecções experimentais realizadas com administração de ovos de Taenia saginata difere das infecções naturais, mesmo quando os animais recebem pequeno número de ovos por longo período (KYVSGAARD et al, 1990;HAYUNGA;SUMNER, 1991;SMITH;SNOWDON;FINLAY, 1991;MONTEIRO et al, 2008;THOMAZ-SOCCOL et al, 2010).…”

Desempenho do ELISA no diagnóstico da cisticercose utilizando bovinos experimentalmente e naturalmente infectados com o metacestódeo de Taenia saginata

“…Diversos autores relatam a necessidade de se pesquisar e implementar o teste ELISA como método auxiliar à inspeção visual de rotina, buscando maior eficiência no diagnóstico da cisticercose bovina (QUEIROZ et al, 2000;MINOZZO et al, 2004;MONTEIRO et al, 2008). A utilização do teste ELISA revela que a prevalência da cisticercose bovina, realizada por meio de detecção através da inspeção clássica realizada em matadouros-frigoríficos é subestimada (DORNY et al, 2000), pois o exame de rotina anátomo-patológico é um método considerado de baixa sensibilidade, especialmente em infecções leves (BAVIA et al, 2012;PAULAN et al, 2013).…”