Effects of flask sealing and growth regulators on in vitro propagation of neem (Azadirachta indica A. Juss.)

Abstract

In vitro propagation of neem (Azadirachta indica A. Juss.) may offer an efficient alternative to seed propagation of this species. For optimization of in vitro propagation, different basal salt formulations, growth regulators, and culture container sealants (polytetrafluoroethylene hydrophobic membranes [PTFE]) were evaluated. Nodal segments cultured on Murashige and Skoog (MS) medium showed the highest shoot formation per explant (1.67). Explants cultured in flasks containing MS medium with 0.5 mg L −1 benzyladenine, 0.5 mg L −1 kinetin, and 0.05 mg L −1 naphthaleneacetic acid, and sealed with two PTFE membranes, produced the highest number of shoots (4.04). In contrast, explants cultured in flasks without membranes showed leaf chlorosis and senescence. For plant recovery, regenerants were acclimatized in a substrate of coconut fiber and eucalyptus bark (1:1) and showed 80% survival. Our results indicated that the use of flasks with vents was beneficial for in vitro propagation of this important plant.

Trocas gasosas influenciam na morfogênese in vitro de duas cultivares de oliveira (Olea europaea L.)

“…O mesmo foi observado por Rodrigues et al (2011), os quais encontraram que nos frascos com membranas porosas houve trocas gasosas, evitando, assim, o acúmulo do gás etileno dentro dos frascos, sendo observado o oposto nos frascos com tampa rígida sem orifício. No entanto, Zobayed et al (2000) observaram que o uso das membranas porosas não é capaz de remover completamente a concentração do gás etileno produzido pelas plantas in vitro.…”

“…Diferente do que foi observado por Rodrigues et al (2011), que relataram que o uso de tampas com membranas porosas influenciaram positivamente o estabelecimento das culturas, além de aumentarem a qualidade e quantidade de brotos e diminuírem a ocorrência de clorose e senescência nas folhas de Azadirachta indica A. Juss. Foi o que observaram Ribeiro et al (2009) em Solanum melongena L., em que as plantas mantidas no mesmo tipo de vedação (tampas com membranas porosas) apresentaram-se maiores e mais vigorosas, além de apresentarem folhas e raízes maiores e mais desenvolvidas.…”

“…No entanto, a propagação de plantas lenhosas por cultivo in vitro é limitada devido à interferência de contaminantes, por bactérias e fungos; pela oxidação dos explantes, principalmente por compostos fenólicos; baixa multiplicação e crescimento das plântulas; sensibilidade às trocas gasosas; e ao acúmulo de etileno dentro dos frascos de cultivo (RODRIGUES et al, 2011). causando redução da taxa de crescimento dos explantes e, assim, elevadas perdas durante a aclimatização, devido à mortalidade das plantas (NGUYEN; KOZAI, 2005;ZOBAYED, 2006;XIAO et al, 2011).…”

Flask sealing on in vitro seed germination and morphogenesis of two types of ornamental pepper explants

“…RODRIGUES et al (2011) evaluating the effect of gas exchange on the in vitro propagation of neem (Azadirachta indica), suggested that the use of membranes that allow higher gas exchange can improve shoot quality, reducing the occurrence of chlorosis and leaf senescence. Similarly, we observed that plantlets of C. annuum cultured under higher gas exchange conditions showed less occurrence of leaf abscission, senescence, hyperhydricity, and chlorosis.…”

“…MilliSeal ® membranes have been successfully used to improve gas exchange in the culture flask in the propagation of many species, including Pfaffia glomerata (IAREMA et al, 2012;SALDANHA et al, 2013SALDANHA et al, , 2014CORRÊA et al, 2015), Azadirachta indica (RODRIGUES et al, 2011), Alha gigraecorum (ZOBAYED et al, 2006), and Eucalyptus tereticornis (SHAVALLI KHAN et al, 2002).…”