Este estudo teve como objetivo analisar o perfil lipídico de ratos Wistar com hipertireoidismo induzido em repouso e após exercício físico agudo. Foram utilizados 28 ratos machos Wistar, divididos em hipertireoidismo (H; induzido com tiroxina) e controle (C). Metade dos animais de cada grupo foi sacrificada em repouso. A outra metade foi submetida, imediatamente antes do sacrifício, à sessão única de exercício de natação, por 20 minutos (carga de 5% em relação ao peso corporal). Para as comparações entre os grupos utilizou-se Teste T de Student's e ANOVA Two-Way, seguida de post-hoc de Newman-Keuls. O grupo H apresentou menor peso do tecido adiposo nas regiões mesentérica, retroperitoneal e subcutânea, comparado com o grupo C, o que reflete a perda de peso corporal neste grupo. Menores valores de colesterol total, LDL e HDL, na condição em repouso, foram observados no grupo H. Após o exercício agudo houve um incremento estatisticamente significativo de glicose em ambos os grupos, bem como, redução dos níveis de triglicerídeos no grupo C (p<0,05). As concentrações de lipídios totais no coração foram menores em repouso para o grupo H quando comparado com o grupo C. Após sessão aguda de exercício físico essas concentrações se elevaram no grupo H (p<0,05). A droga utilizada induziu características de hipertireoidismo, associadas ao perfil lipídico, em ratos Wistar. O exercício físico agudo não alterou o perfil lipídico dos animais com hipertireoidismo experimental, exceto os lipídios totais do coração. A partir dos achados do presente estudo, trabalhos futuros poderão utilizar intensidade de exercício físico similar (5% do peso corporal) e analisar outros parâmetros metabólicos relacionados a essa patologia em ratos.