Development of an accelerated low-pH reversed-phase liquid chromatography column stability test

Trammell, Brian C.; Boissel, Cheryl; Carignan, Christina; O’Shea, Daniel J.; Hudalla, Christopher; Neue, Uwe D.; Iraneta, Pamela C.

doi:10.1016/j.chroma.2004.04.016

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“…Retention factors of the solutes in their protonated form are often lower than when the solute is neutral. Also bonded‐phase columns are unstable at low pH 12, 13. However, analyses conducted with acidic mobile phases have become popular using anionic additives such as ClO 4 − and CF 3 COO − to increase the retention and the selectivity of cationic solutes in RP‐HPLC 14.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Chromatographic evaluation using basic solutes of the silanol activity of stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica

Borges

2011

J of Separation Science

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The chromatographic behaviors of some basic solutes were evaluated on stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica (PMOS-SiO(2)). The test solutes present both hydrophobic and hydrophilic properties. Evaluations of the pH effect used 80:20 v/v methanol/buffered mobile phase over the pH range of 5-11.5 with inorganic buffers such as borate, carbonate and phosphate and with organic buffers such as citrate, tricine and triethylamine. Evaluations in acidic mobile phases used 50:50 v/v and 30:70 v/v methanol/buffer (pH 2.5; 20 mmol/L) mobile phases. The buffer concentration effect used 65:35 v/v methanol/phosphate (pH 7; 20 and 100 mmol/L) mobile phases. The results are compared with those obtained with two chemically bonded stationary phases. The immobilized phases show greater contributions from an ion-exchange mechanism than do the commercial phases. The results indicate that the silanol activity of PMOS-SiO(2) stationary phases can be adequately evaluated by using appropriate basic probes and mobile phases having different pH, using different buffers.

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Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Chromatographic evaluation using basic solutes of the silanol activity of stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica

Borges

2011

J of Separation Science

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“…On the other hand, for stability testing at low pH, it is necessary to monitor the retention factors since, in this particular case, the degradation processes involve the acid-catalyzed hydrolysis of Si-O-Si bonds between the chromatographic support and the organosilane layer and, consequently, loss of the bonded phase and retention [38]. Up to now, the stability tests performed on the titanized phases have been carried out in basic mobile phases due the possible advantages of a protective TiO 2 layer on the silica support in alkaline medium [21 (Silva, C. R., Airoldi, C., Collins, K. E., Collins, C. H., J. Chromatogr.…”

Section: Stability Testingmentioning

confidence: 99%

An overview of the chromatographic properties and stability of C₁₈ titanized phases

Silva

Collins

Airoldi³

2006

J of Separation Science

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Phases based on titanized silicas are an alternative in the search for HPLC stationary phases with enhanced pH stability. This technology explores the chemical modification of the bare silica surface by grafting a titanium oxide layer with the objective of retarding the dissolution of the support in alkaline mobile phases, followed by C18 silanization. The present manuscript describes recent work on the development of chemically bonded titanized phases, including phases containing embedded urea groups, and phases prepared both in the absence and in the presence of a monolayer of water preadsorbed onto the bare silica. The advantages and disadvantages of these alternative C18 titanized phases are discussed, taking into account their chromatographic properties accessed by some common test procedures. Column lifetimes, measured by accelerated aging tests using aggressive conditions, such as high-pH phosphate mobile phases and elevated temperature, are also discussed.

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“…5,6,9,37,38,[72][73][74][75] Por sua vez, a sílica é um material extremamente estável em meio ácido, mas as ligações siloxano no ligante utilizado para modificar a sílica quimicamente (Si-C) são hidrolisadas em meio ácido. 5,6,9,37,38, 75,76 Estabilidade em fase móvel alcalina Os testes de estabilidade são feitos em condições semelhantes às condições comumente usadas (pH da fase aquosa entre 2 e 8, concentração de tampão entre 5 e 25 mmol/L e temperaturas entre 20 e 40 °C) ou em condições extremas para acelerar a degradação da fase estacionária (pH da fase aquosa extremamente ácido em 0,5 a 1,5 ou extremamente alcalino em 10 a 14, concentração de tampão de 50 a 200 mmol/L e temperaturas entre 23 e 150 °C), sendo que o primeiro caso representa melhor a estabilidade das fases estacionárias. A degradação da fase estacionária é avaliada em função da passagem de fase móvel pela coluna, sendo representada em volumes de coluna (Vc) ou pelo tempo em que a fase móvel passa pela coluna 5,6,37,38,75 Muitas tentativas foram feitas para aumentar a estabilidade das fases estacionárias em condições alcalinas.…”

Section: Estabilidade Das Fases Estacionáriasunclassified

O desafio de analisar solutos básicos por cromatografia líquida em modo reverso: algumas alternativas para melhorar as separações

Borges¹,

Goraieb²

2012

Quím. Nova

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. This review considers some of the difficulties encountered with the analysis of basic solutes using reversed-phase chromatography, such as detrimental interaction with stationary phase silanol groups. Methods of overcoming these problems in reversed-phase separations, by judicious selection of the stationary phase and mobile phase conditions, are discussed. Developments to improve the chemical and thermal stability of stationary phases are also reviewed. It is shown that substantial progress has been made in the manufacturing of stationary phases, enabling their use over a wide variety of experimental conditions. In addition, general measures to significantly extend their lifespan are discussed.Keywords: reversed-phase stationary phases; column classification; chemical and thermal stability. INTRODUÇÃOA cromatografia líquida (LC, liquid chromatography) tem ampla aceitação como técnica analítica, sendo utilizada em muitas áreas da ciência. O modo mais usado desta técnica é o modo reverso (RP-LC, reversed phase liquid chromatography) devido às suas inúmeras vantagens, tais como uso de fases móveis de menor custo e menor toxicidade; rápido equilíbrio da coluna após a mudança de fase mó-vel; possibilidade da condução de separações no modo de eluição por gradiente, resultando em maior rapidez e melhor separação nas análises; boa repetibilidade dos tempos de retenção; amplo campo de aplicação, devido à possibilidade de separação de compostos de diferentes polaridades, massas molares e funcionalidades, dentre outras. 1,2 Por sua vez, mais de 70% dos fármacos disponíveis no mercado são bases e a RP-LC é a técnica mais utilizada para analisar solutos básicos, 1,3 mas alguns problemas acontecem quando solutos básicos são analisados por RP-LC e, por esta razão, esta revisão se dedica a apresentar estes problemas e a fornecer algumas alternativas para superá-los, contribuindo com outras revisões produzidas pelo nosso grupo de pesquisa a respeito da RP-LC. [4][5][6][7][8][9] Em RP-LC o principal objetivo é obter separação dos solutos, que é avaliada através da resolução (R s ), que determinada o grau de separação entre dois picos adjacentes. A resolução pode ser expressa em função da eficiência (N 2 ), da seletividade (α) e do fator de retenção do segundo pico (k 2 ), com a aproximação de que ambos os picos têm aproximadamente a mesma largura à meia altura. De acordo com a equação o aumento do fator de retenção resulta em melhores resoluções apenas quando os solutos forem pouco retidos (fatores de retenção menores que 1) e fatores de retenção maiores que 10 aproximam o termo da equação (k/k+1) à unidade. Enquanto dobrar a eficiência da separação resulta em um aumento da resolução de √ -2 (41%), um aumento na seletividade de 1,05 para 1,10 faz com que a resolução aumente em duas vezes. Desta forma existem duas maneiras de se aumentar a resolução: aumentar a eficiência e aumentar a seletividade da separação. 10 É interessante ressaltar que, ao longo deste texto, serão discutidas alternativas para se alterar a retenção dos so...

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Development of an accelerated low-pH reversed-phase liquid chromatography column stability test

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Chromatographic evaluation using basic solutes of the silanol activity of stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica

Chromatographic evaluation using basic solutes of the silanol activity of stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica

An overview of the chromatographic properties and stability of C₁₈ titanized phases

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Chromatographic evaluation using basic solutes of the silanol activity of stationary phases based on poly(methyloctylsiloxane) immobilized onto silica

An overview of the chromatographic properties and stability of C18 titanized phases

O desafio de analisar solutos básicos por cromatografia líquida em modo reverso: algumas alternativas para melhorar as separações

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