Detection of Actinobacillus pleuropneumoniae by PCR on Field Strains from Healthy and Diseased Pigs

Abstract

We investigated whether primers able to specifically amplify a 0.7-kb DNA fragment from the conserved cpx genes could be applied to analyze A. pleuropneumoniae field isolates. The specific cpx primers were tested on 120 strains of A. pleuropneumoniae and other NAD-dependent field isolates from healthy and diseased animals to analyze A. pleuropneumoniae isolates from pigs in Brazil. We found that PCR and hybridization were able to discriminate between isolates of A. pleuropneumoniae and other bacteria. The 0.7-kb cpx DNA fragments were amplified from all 63 A. pleuropneumoniae isolates from herds with clinical symptoms and were isolated from lesions of acute cases of swine pleuropneumonia, both serotypable and nonserotypable. The PCR was also applied to 57 field isolates obtained from animals of apparently healthy herds, and the amplified cpx product was present in four serotypable and only two out of eleven A. pleuropneumoniae nonserotypable isolates. All nonserotypable A. pleuropneumoniae isolates revealed the apxA amplification pattern compatible with previously known serotypes. Some nonserotypable isolates might represent a population of isolates that originally were serotypable but lost the ability to react with serotype-specific antisera or might belong to novel serotypes. The PCR method applied is highly sensitive for serotypable A. pleuropneumoniae strains and for nonserotypable strains isolated from acute cases of swine pleuropneumoniae in Brazil.

Principais ameaças sanitárias endêmicas da cadeia produtiva de suínos no Brasil

“…A pleuropneumonia suína por Actinobacillus pleuropneumoniae (App) foi diagnosticada no Brasil no início da década de 1980 (Klein et al, 2003).…”

“…bras., Brasília, v.51, n.5, p.443-453, maio 2016 DOI: 10.1590/S0100-204X2016000500004 É uma doença importante em algumas criações brasileiras, especialmente em grandes terminações que não fazem o vazio sanitário ou em grandes granjas de ciclo completo. Foram detectados anticorpos em 48,27% das granjas de suínos, localizadas em alguns estados brasileiros, onde foi realizado estudo soroepidemiológico de amostras de soros (Dutra et al, 2000;Kuchiishi et al, 2007). Entretanto, deve-se considerar que, no Brasil, há vacinas comerciais que podem induzir a formação de anticorpos.…”

“…Entretanto, deve-se considerar que, no Brasil, há vacinas comerciais que podem induzir a formação de anticorpos. Atualmente, no País, dos 15 sorotipos de App diagnosticados, a maioria já foi identificada e os mais importantes são: 5, 3, 6 e 10 ( Kuchiishi et al, 2007). Tanto a doença de Glässer quanto a pleuropneumonia suína são mais frequentes em rebanhos melhorados, de grande porte e com bom status sanitário.…”

“…Esse é um exemplo de doença emergente que se tornou endêmica e que poderá perder a expressão clínica inicial de surtos. Um dos agravantes é a presença de vesículas, semelhantes à aftosa, em suínos ao abate, o que pode causar problemas econômicos, em razão da destinação das carcaças dada pela inspeção (Leme et al, 2015;Vannucci et al, 2015).…”

“…O agente SVV, pertence à família Picornaviridae e é caracterizado por quadro clínico de doença vesicular idiopática, sem diarreia ou mortalidade epidêmica e transiente dos leitões lactentes (Leme et al, 2015). Em países como Estados Unidos, Canadá, Itália e Nova Zelândia, detectou-se o agente em doença vesicular, a qual ocorreu de forma limitada e afetou poucas granjas esporadicamente.…”