Cultivo de células de Schwann, un modelo del microambiente del sistema nervioso

Abstract

ResumenAlgunos aspectos de la fisiopatología del sistema nervioso periférico pueden ser ampliamente estudiados en un modelo celular in vitro, enriquecido en células de Schwann. La célula de Schwann como glía del sistema nervioso periférico produce la mielina responsable de la transmisión saltatoria del impulso, influye en la actividad neuronal y da soporte y protección axonal. A su vez es blanco de procesos que alteran la normalidad del sistema nervioso periférico como neuropatías congénitas y10 desmielinizantes, lesiones nerviosas, respuesta a patógenos neurotrópicos, etc., eventos más frecuentes y discapacitantes en individuos adultos. De ahí la importancia de obtener células a partir de animales adultos. Sin embargo, estas células son mitóticamente "lentas" y su obtención en cultivo requiere de condiciones específicas que estimulen su proliferación y actividad. Describimos a continuación, un modelo in vitro mediante el cual se obtienen cultivos enriquecidos en células de Schwann de ratón adulto, las cuales conservan características de las células in vivo, lo cual permite estudiar diversos fenómenos específicos del sistema nervioso periférico.Schwann cell cultures: a model of the nervous system microenvironment Some of the peripheral nervous system (PNS) physiopathological aspects can be studied in an in vitro cellular model of Schwann Cells (SC). SC as PNS glia produces myelin. Myelination increases the rate of impulse conduction. SCs influence neuronal activity and axonal support and protection. Also, they are the target of the process which alters the PNS, such as congenital andlor demyelinating neuropathies, nervous lesions, response to neurotrophic pathogens, etc., being the events most frequently found in adults. It is then important to obtain cells from adult animals. However, these cells are mytotically "slow" and growing them in culture needs specific conditions which stimulate proliferation and activity. An in vitro model to obtain highly enriched adult mouse SC cultures which have some of the in vivo SC cell cultures' features, is described. This method can be used to study several aspects of the nervous system biology.

Mecanismos involucrados en la promoción de crecimiento axonal por la glia envolvente del bulbo olfatorio

“…Asi, la expresión común de receptores a factores de crecimiento y receptores a neurotrofinas (6,12,13), lacapacidad de migración (14) y de mielinización (15-17), permiten proclamarla como candidata para la reparación de lesiones nerviosas. Al igual que las células de Schwann (18,19), la glia envolvente puede ser cultivada a partir de tejido adulto (1 1) y purificada en gran escala (14).…”

Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina

“…Las células de ganglio de la raíz dorsal se obtuvieron según la técnica estandarizada en nuestro laboratorio (21)(22)(23), que se describe a continuación: se sacrifican los animales por dislocación cervical; se retira la columna vertebral y se obtienen los ganglios ubicados en los espacios intervertebrales. Luego, se realiza una disociación enzimática con colagenasa (150-200 Ulml) durante 2 horas y, posteriormente, una disociación mecánica con la ayuda de una pipeta Pasteur.…”