Cooling and freezing of epididymal sperm in the common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)

Saragusty, Joseph; Walzer, Chris; Petit, Thierry; Stalder, Gabrielle; Horowitz, Igal; Hermes, Robert

doi:10.1016/j.theriogenology.2010.05.031

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“…La recuperación exitosa de espermatozoides directamente desde los epidídimos ha sido realizada en diferentes especies de mamíferos, en los que se destacan bovinos, equinos y caninos (Turri et al 2012;Olaciregui et al 2014, Mota et al 2014. Para el caso del hipopótamo común, un estudio reportó la extracción de espermatozoides desde la cola del epidídimo y su posterior evaluación, con resultados para MT, IA, MA y HOS de 88.1 ± 4.2%; 87.7 ± 1.8%; 51.6 ± 4.1% y 83.3 ± 1.8%, respectivamente (Saragusty et al 2010b). Estos resultados fueron superiores para MT y HOS, con respecto a los obtenidos en el presente estudio, mientras para IA y MA, podrían asumirse como similares (Cuadros 1 y 2).…”

Section: Discussionunclassified

“…Extracción epididimal de espermatozoides. Los testí-culos fueron sumergidos en solución salina (0.9% NaCl) y se colocaron en una caja de espuma de poliestireno en condiciones de refrigeración (4-7 °C) para ser transportados (Saragusty et al 2010b). En el laboratorio, se recuperaron los espermatozoides provenientes del epidídimo.…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…Se canalizó el conducto deferente con una aguja calibre 18 y se realizó la extracción de los espermatozoides, por el método del lavado retrógrado (Cary et al 2004). A través del conducto y la cola del epidídimo, se aplicaron al menos 20 mL de diluyente (Equiplus, Minitube) precalentado a 37 °C, el cual fue recolectado en un tubo estéril (Saragusty et al 2010b). Este procedimiento se combinó con un méto-do alternativo (inyección de medio), en el cual se inyectó diluyente a través de la pared del órgano y se realizaron cortes en toda su extensión.…”

Section: Materiales Y Métodosunclassified

“…Asimismo, se evaluaron diferentes diluyentes para la criopreservación de espermatozoides. Otro estudio reportó la recuperación de espermatozoides desde los epidídimos de hipopótamos comunes castrados, así como su criopreservación (Saragusty et al 2010b).…”

Section: Introductionunclassified

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Evaluación de la calidad espermática epididimal en hipopótamos Hippopotamus amphibius (Artiodactyla: Hippopotamidae) ubicados en el Magdalena Medio, Colombia

Betancur¹,

Giraldo²,

Suarez³

2016

AZM

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. Evaluación de la calidad espermática epididimal en hipopótamos Hippopotamus amphibius (Artiodactyla: Hippopotamidae) ubicados en el Magdalena Medio, Colombia. Acta Zoológica Mexicana (n. s.), 32(2): 158-167. RESUMEN. El hipopótamo común (Hippopotamus amphibius)es un mamífero del orden Artiodactyla, que habita en África, con una población decreciente a nivel global. Con fines de conservación genética, se han realizado procesos de biotecnología reproductiva, entre los que se reporta, la recuperación de espermatozoides por métodos como la electroeyaculación y la extracción desde epidídimos. Este mamífero es considerado una especie invasora exótica y fue introducido en Colombia en 1985; actualmente se reproduce de forma descontrolada en la región del Magdalena Medio. Como medida de control poblacional, se ha realizado la esterilización quirúrgica de algunos ejemplares. El objetivo de este estudio fue evaluar diferentes parámetros espermá-ticos e histológicos, relacionados con la calidad seminal epididimal de hipopótamos comunes ubicados en el Magdalena Medio, Colombia. Dos hipopótamos fueron orquiectomizados quirúrgicamente y los espermatozoides fueron recuperados por los métodos combinados de lavado retrógrado e inyección de medio. Se realizó la evaluación de la movilidad (sistema SCA ® ), la vitalidad espermática y la morfología espermática (prueba supravital), el potencial de membrana mitocondrial (JC-1), la integridad acrosómica (FITC-PNA), y la integridad estructural (SYBR14/IP) y funcional (prueba HOS) de la membrana plasmática. Asimismo, se realizó un análisis histológico de testículos y epidídimos. A excepción de la movilidad progresiva, la integridad funcional de membrana y la morfología espermática, se hallaron resultados muy similares para los parámetros de calidad seminal de ambos individuos. Las anormalidades espermáticas predominantes fueron gota citoplasmática y cola enrollada. El análisis histológico evidenció un proceso activo de espermatogénesis. Se concluye que la extracción epididimal de espermatozoides, posterior a la orquiectomía de hipopótamos comunes ubicados en un hábitat no nativo, permite obtener muestras espermáticas de buena calidad. Palabras clave: Colombia, cinética espermática, histología. Restrepo ABSTRACT. Common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)is a mammal of the Artiodactyla order, living in Africa, with a declining population globally. With genetic conservation purposes, there have been processes of reproductive biotechnology, among which it is reported, recovery of sperm by methods as electroejaculation and extraction from the epididymis. This mammal is considered an exotic and invasive species was introduced in Colombia 1985; currently it reproduces out of control in the Middle Magdalena region. As a means of population control, it has performed the surgical sterilization of some specimens. The aim of this study was to evaluate different sperm and histological parameters related with epididymal semen quality of common hippopotamus located in the Colombian Middle Magdalen...

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Section: Discussionunclassified

Section: Materiales Y Métodosunclassified

Section: Introductionunclassified

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Evaluación de la calidad espermática epididimal en hipopótamos Hippopotamus amphibius (Artiodactyla: Hippopotamidae) ubicados en el Magdalena Medio, Colombia

Betancur¹,

Giraldo²,

Suarez³

2016

AZM

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“…This is likely to change after a short incubation time in a suitable media. As many of the cells in the epididymis did not complete their maturation process at the time of extraction, cytoplasmic droplets can be highly prevalent (Saragusty et al, 2010b). Some specific characteristics were also noted in certain species.…”

Section: The Malementioning

confidence: 99%

Genome Banking for Vertebrates Wildlife Conservation

Saragusty¹

2012

Current Frontiers in Cryobiology

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Establishment and characterization of fibroblast cultures derived from a female common hippopotamus (Hippopotamus amphibius) skin biopsy

Wang

Wei

et al. 2021

Cell Biology International

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The population decline of the common hippopotamus (Hippopotamus amphibius) has necessitated the preservation of their genetic resources for species conservation and research. Of all actions, cryopreservation of fibroblast cell cultures derived from an animal biopsy is considered a simple but efficient means. Nevertheless, preserving viable cell cultures of the common hippopotamus has not been achieved to our knowledge. To this end, we established and characterized fibroblast cell cultures from the skin sample of a newborn common hippopotamus in this study. By combining the tissue explant direct culture and enzymatic digestion methods, we isolated a great number of cells with typical fibroblastic morphology and high viability. Neither bacteria/fungi nor mycoplasma was detectable in the cell cultures throughout the study. The population doubling time was 34 h according to the growth curve. Karyotyping based on Giemsa staining showed that the cultured cells were diploid with 36 chromosomes in all, one pair of which was sex chromosomes. The amplified mitochondrial cytochrome C oxidase subunit I gene sequence of the cultured cells was 99.26% identical with that of the registered H. amphibius complete mitochondrial DNA, confirming the species of origin of the cells. Flow cytometry and immunofluorescence staining results revealed that the detected cells were positive for fibroblast markers, S100A4, and vimentin. In conclusion, we generated the fibroblast cell cultures from a common hippopotamus and identified their characteristics using multiple techniques. We believe the cryopreserved cells could be useful genetic materials for future research.

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Cooling and freezing of epididymal sperm in the common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)

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Evaluación de la calidad espermática epididimal en hipopótamos Hippopotamus amphibius (Artiodactyla: Hippopotamidae) ubicados en el Magdalena Medio, Colombia

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Genome Banking for Vertebrates Wildlife Conservation

Establishment and characterization of fibroblast cultures derived from a female common hippopotamus (Hippopotamus amphibius) skin biopsy

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