Comparison of five techniques for the determination of protein content in mixed human saliva

Jenzano, Joyce W.; Hogan, Susan L.; Noyes, Claudia M.; Featherstone, Gerald L.; Lundblad, Roger L.

doi:10.1016/0003-2697(86)90355-6

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“…The salivary protein concentration of human saliva depends on the measurement technique and the protein standard. In this study, the total protein concentration was measured by amino acid analysis, which showed consistent values compared to the biuret reaction (Jenzano et al 1986).…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 67%

Role of amylase, mucin, IgA and albumin on salivary protein buffering capacity: A pilot study

Cheaib

Lussi

2013

J Biosci

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It has been suggested that proteins serve as major salivary buffers below pH5. It remains unclear, however, which salivary proteins are responsible for these buffering properties. The aim of this pilot study was to evaluate the correlation between salivary concentration of total protein, amylase, mucin, immunoglobulin A (IgA), albumin and total salivary protein buffering capacity at a pH range of 4-5. In addition, the buffering capacity and the number of carboxylic acid moieties of single proteins were assessed.Stimulated saliva samples were collected at 9:00, 13:00 and 17:00 from 4 healthy volunteers on 3 successive days. The buffering capacities were measured for total salivary protein or for specific proteins. Also, the concentration of total protein, amylase, mucin, IgA and albumin were analysed.Within the limits of the current study, it was found that salivary protein buffering capacity was highly positively correlated with total protein, amylase and IgA concentrations. A weak correlation was observed for both albumin and mucin individually. Furthermore, the results suggest that amylase contributed to 35% of the salivary protein buffering capacity in the pH range of 4-5.

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Section: Discussionmentioning

confidence: 67%

Role of amylase, mucin, IgA and albumin on salivary protein buffering capacity: A pilot study

Cheaib

Lussi

2013

J Biosci

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“…As Lowry/hartree assay was more of time-consuming, the authors suggested the biuret method for five tissues adrenal, spleen, whole brain, liver, small intestine and UV-260/280 nm for whole brain, liver, and pancreas and p-chloranil assay for epididymal fat pad. In another study by Jenzano et al [6], the accuracy of biuret, Lowry, BCA, CB assay in either phosphoric acid formulation [7]or in HCI formulation proposed by Sedmak and Sidney [8], were evaluated for the assay of protein concentration in human mixed saliva. The data of amino acid analysis results were compared with the values of the colorimetric assays.…”

Section: Colorimetric Assays Biuret Methodsmentioning

confidence: 99%

Musculoskeletal ProteinAnalysis Techniques - A Review

Kamineni¹,

Manepally²,

Kamineni³

2016

JRAD

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There have been a large number of experimental methods for purifying and analyzing proteins from the sample of interest. Determination of protein concentration is often the key step and is common to many applications in protein research and life sciences. The most commonly used quantitative techniques to measure the protein concentration are Amino acid analysis, Biuret assay, Bradford assays, Folin-Lowry assay, Bicinchoninic (BCA) assays, UV absorbance assays and Antibody-based assays such as ELISA and Western Blotting. Some of the qualitative methods that are used to detect different types of proteins and amino acids are Ninhydrin test, Xanthoproteic test, Millon's test, Sulfur test, Hopkins-Cole test, and Nitroprusside test. Chromatographic analysis can also be carried out on an either qualitative or quantitative basis to purify complex protein mixtures based on their properties such as size, solubility, charge, hydrophobicity and bio-specific interaction. Selection of these assays is based upon the ease of performance, range of concentrations, sensitivity, and interfering substances contained in the complex mixture. The purpose of this review is to provide an assessment of commonly used chromatographic and colorimetric methods for the determination of protein concentration.

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“…O método de biureto tem sido aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sangüíneo 15,16,18,19 , líquido cérebro espinhal (líqüor) 20,21 , urina [22][23][24] , alimentos [25][26][27][28][29] , saliva 30 , fibrinogênio 31 e tecido animal 32 . O método de biureto tem sido, também, utilizado em análise por injeção em fluxo 19 , assim como em alguns métodos cinéticos 21,33 .…”

Section: Aplicaçõesunclassified

“…O método de biureto tem sido, também, utilizado em análise por injeção em fluxo 19 , assim como em alguns métodos cinéticos 21,33 . Apesar de ser rápido, utilizar reagentes de baixo custo e não apresentar grande variação da absortividade específica para diferentes proteínas 9,20,21,30 , este método não é muito sensível, como foi destacado por diversos autores 20,24,30 , colocando-o em grande desvantagem, em relação a outras metodologias, e por isto tem sido, ao longo dos anos, substituído por métodos mais sensíveis. Mesmo assim, o método de biureto continua sendo recomendado para a determinação da concentração de proteínas totais em plasma sangüíneo pela Associação Americana de Análises Clínicas e por diversos autores 15,16,34 , bem como para a determinação de proteínas totais em saliva 30 e leite 29 , quando comparado com outros métodos.…”

Section: Aplicaçõesunclassified

“…A principal vantagem do método de Lowry é a sua alta sensibilidade e, por isto, tem sido utilizado para a determinação da concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: líqüor 20,38 , plasma sangüíneo 34,39,40 , saliva humana 30 10 para determinar proteínas totais em líqüor 38 , tecido animal 41 e tecido vegetal 45 . Os autores 38,41,45 , de maneira geral, recomendam o método de Lowry, pois no estudo comparativo de metodologias o mesmo mostrou-se mais sensível, com melhor exatidão, menor consumo de amostra e, dependendo do caso, menos suscetível a alguns tipos de interferentes.…”

Section: Aplicaçõesunclassified

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Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

Zaia

Lichtig

1998

Quím. Nova

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tein is used in several areas such as clinical analysis, food science and technology, biochemistry, protein chemistry, physiology. Five spectrophotometric methods are mostly used: biuret, Lowry, Bradford, Smith and UV absorption. In this review a general overview of these methods is presented (interferences, applications); other methodologies are also discussed.Keywords: protein; spectrophotometry; protein analysis. DIVULGAÇÃO INTRODUÇÃOO desenvolvimento de metodologias e estudos comparativos de metodologias espectrofotométricas para a determinação de proteínas totais sempre foram de grande interesse para profissionais, tanto ligados à indústria de alimentos, laboratórios de análises clínicas, como para pesquisadores de diversas áreas. Apesar de os profissionais serem de diferentes áreas e, portanto, com objetivos diferentes, observamos que os questionamentos são sempre os mesmos: Quais são os principais interferentes no método que estou usando? Qual é o método mais adequado para meu caso? Qual é o princípio envolvido no método que estou usando?Esta revisão, portanto, tem por objetivo abordar diversos aspectos dos métodos espectrofotométricos utilizados para a determinação de proteínas totais em diferentes meios.As proteínas desempenham papéis extremamente importantes, na maioria dos processos biológicos, atuando como enzimas, hormônios, neurotransmissores, transportadores através das membranas celulares e outros 1,2 .O desenvolvimento de metodologias para determinar proteínas tem, cada vez mais, se tornado de fundamental relevância em várias áreas do conhecimento, como por exemplo, em análises clínicas 1 , favorecendo o diagnóstico de certas doenças correlacionadas com a alteração da quantidade de proteínas nos fluidos biológicos; em nutrição animal 3 , ressaltando o aproveitamento racional de nutrientes; em problemas relacionados à nutrição humana 1,4,5 , como obesidade, anorexia nervosa, desnutrição, devendo as dietas apresentar teor balanceado de proteínas; em tecnologia e ciências de alimentos 6 , objetivando o aproveitamento racional da matéria prima e o melhoramento dos produtos novos e já existentes; em ecologia 7 , relacionando o comportamento alimentar com a quantidade de proteína ingerida dos alimentos, favorecendo o entendimento dos vários aspectos da vida dos animais silvestres; e na área de química de proteínas objetivando purificar novas proteínas e enzimas 8 .Estas são apenas algumas das mais importantes aplicações analíticas para metodologias de determinação de proteínas totais; obviamente, existem muitas outras de grande relevância.Os métodos para a determinação da concentração de proteí-nas totais são muito variados, no entanto, as metodologias mais utilizadas são as espectrofotométricas no ultra-violeta e no visível (UV-Vis). MÉTODOS ESPECTROFOTOMÉTRICOS MAIS UTILIZADOS PARA A DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS TOTAISMuitos métodos espectrofotométricos, ao longo dos anos, têm sido propostos para a determinação de proteínas totais, mas não existe uma metodologia considerada de uso universal para todos ...

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Comparison of five techniques for the determination of protein content in mixed human saliva

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Role of amylase, mucin, IgA and albumin on salivary protein buffering capacity: A pilot study

Role of amylase, mucin, IgA and albumin on salivary protein buffering capacity: A pilot study

Musculoskeletal ProteinAnalysis Techniques - A Review

Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

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