Comparison of five extenders for canine semen freezing

Santos, Silvia Edelweiss Crusco dos; Vannucchi, Camila Infantosi; Satzinger, Sandra; Assumpção, Mayra Elena Ortiz D’Ávila; Visintin, José Antônio

doi:10.1590/s1413-95961999000500004

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“…Enquanto o papel protetor da gema é bem conhecido no processo de congelamento, ainda não está comprovado o mesmo efeito dos componentes do leite desnatado sobre a membrana espermática [3]. Uma pesquisa testando cinco meios de congelamento para o sêmen canino verificou que, apesar do leite desnatado apresentar características favoráveis à criopreservação de sêmen, como viscosidade, fonte energética e atividade antibacteriana, ele também pode causar alterações na morfologia espermática que se refletem na motilidade [18].…”

Section: Discussionunclassified

Padronização de uma técnica de congelamento de sêmen em cães

Neves¹,

Henry²,

Clemente³

et al. 2018

Acta Scientiae. Vet.

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Várias pesquisas têm sido desenvolvidas com o intuito de melhorar a técnica da criopreservação de sêmen em cães. O objetivo deste trabalho foi estabelecer o meio diluidor de congelamento do sêmen canino mais adequado para um protocolo de congelamento realizado em máquina computadorizada, além de otimizar a temperatura de descongelamento. Foram usados cinco cães e coletados três ejaculados/animal. Foram testados os meios Tris-cítrico (G1), Lactose-gema (G2) e INRA 82 (G3) com 5% de glicerol. Alíquotas de sêmen foram diluídas em cada meio e foram congeladas em máquina computadorizada programada para realizar uma curva de resfriamento de-0,5ºC/min, de 25-29ºC até 5ºC, período de equilíbrio de 1h a 5ºC, seguida da curva de congelamento de-20ºC/min, de 5ºC até-120ºC. Foram testadas duas temperaturas de descongelamento: A) 37ºC/30s e B) 52ºC/10s, seguida de 37ºC/30s. Os espermatozóides foram avaliados quanto à motilidade progressiva, morfologia, reatividade ao teste hiposmótico e integridade de membranas avaliadas pelo uso de fluorescência (CFDA/IP). Os meios de congelamento Tris-cítrico e Lactose-gema foram superiores ao meio INRA quanto aos parâmetros de motilidade e morfologia espermática (p<0,05). Não houve diferença entre eles quanto à manutenção da integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas (p>0,05). O descongelamento a 52ºC resultou no aparecimento de maior porcentagem de anormalidades acrossomais que o descongelamento a 37ºC (p<0,05). Com base nos resultados, pode-se concluir que os meios Triscítrico e Lactose-gema preservaram melhor a viabilidade espermática após o descongelamento a 37ºC/30s na curva de resfriamento de-0,5ºC/min e de congelamento de-20ºC/min.

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Section: Discussionunclassified

Padronização de uma técnica de congelamento de sêmen em cães

Neves¹,

Henry²,

Clemente³

et al. 2018

Acta Scientiae. Vet.

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“…One of them is the oxidative stress leading to membrane perturbation and DNA damage. The aim of the extenders is to protect the semen against ice crystal formation, but also to improve the membrane and DNA quality in order to increase the success of fertilization [11,12]. The cryopreservative extender frequently used in veterinary practice could still be optimized to limit the plasma membrane degradation and DNA damage during chilled storage [13,14].…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Metformin Improves Quality of Post-Thaw Canine Semen

Grandhaye

Partyka

Ligocka

et al. 2020

Animals

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Sperm cryopreservation is an assisted reproductive technique routinely used in canine species for genetic conservation. However, during cryopreservation, the DNA damages are still elevated, limiting the fertilization rate. The present study was conducted to evaluate whether supplementation of canine semen extender with a molecule limiting the metabolic activities can improve the quality of frozen-thawed canine spermatozoa. We used metformin, known to limit the mitochondrial respiratory and limit the oxidative stress. Before and during the freezing procedure, metformin (50µM and 500µM) has been added to the extender. After thawing, sperm exposed to metformin conserved the same viability without alteration in the membrane integrity or acrosome reaction. Interestingly, 50µM metformin improved the sperm motility in comparison to the control, subsequently increasing mitochondrial activity and NAD+ content. In addition, the oxidative stress level was reduced in sperm treated with metformin improving the sperm quality as measured by a different molecular marker. In conclusion, we have shown that metformin is able to improve the quality of frozen-thawed dog semen when it is used during the cryopreservative procedure.

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Comparison of five extenders for canine semen freezing

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Padronização de uma técnica de congelamento de sêmen em cães

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Metformin Improves Quality of Post-Thaw Canine Semen

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