The aim of this study was to evaluate the motility, kinetics and membrane integrity of ovine sperm cryopreserved in extenders containing 8% LDL with enzymatic antioxidants at different concentrations. Four Santa Inês rams were used to form four pools of semen (each pool containing ejaculates from four ram, totaling four ejaculates per animal). Each seminal pool was divided into eight aliquots for the following treatments: 1) Tris-glucose-glycerol (TGG) + (16%) egg yolk (control 1); 2) TGG + 8% (w/v) LDL (control 2); 3) TGG + 8% LDL + catalase 100 U/mL; 4) TGG + 8% LDL + catalase 200 U/mL; 5) TGG + 8% LDL + superoxide dismutase 100 U/mL; 6) TGG + 8% LDL + superoxide dismutase 200 U/mL; 7) TGG + 8% LDL + reduced glutathione 5 mM; and 8) TGG + 8% LDL + reduced glutathione 10 mM. The samples were packed into 0.25 mL straws, cooled (-0.25 °C/ min), maintained at 5 °C for 2 h and then frozen (-25 °C/ min) using a TK4000 ® . Immediately after thawing (38 °C/ 30 s), sperm motility and movement characteristics were assessed by computer sperm analysis (CASA). The structural integrity of the plasma and acrosomal membranes was analyzed using fluorescent dyes. The functional integrity of membranes was assessed using a hypoosmotic swelling test. As assessed by ANOVA, significant differences (P<0.05) among treatments were only observed for VCL, VSL and VAP. For the VCL variable, the 2, 3, 4, 5, 6 and 7 extenders were similar and higher than 1 and 8 extenders, the latter being similar to each other. For the VSL variable, the 3, 4, 5, 6 and 7 extenders were similar and higher than 1, 2 and 8 extenders, the latter being similar to each other. For the VAP variable, the 3, 4 and 6 extenders were similar and higher than 1, 2, 5, 7 and 8 extenders, the latter being similar to each other. In conclusion, enzymatic antioxidants as catalase and superoxide dismutase improve the protective activity of extenders containing LDL on frozen ovine sperm. concentrações. Quatro carneiros da raça Santa Inês foram utilizados para formar quatro pools de sêmen (cada pool contendo ejaculados provenientes dos quatro carneiros, totalizando quatro ejaculados por animal). Cada pool de sêmen foi dividido em oito alíquotas para os seguintes tratamentos: 1) Trisglicose-glicerol (TGG) + (16%) gema de ovo (controle 1); 2) TGG + 8% (g/L) LDL (controle 2); 3) TGG + 8% LDL + catalase 100 U/mL; 4) TGG + 8% LDL + catalase 200 U/mL; 5) TGG + 8% LDL + superóxido dismutase 100 U/mL; 6) TGG + 8% LDL + superóxido dismutase 200 U/mL; 7) TGG + 8% LDL + glutationa reduzida 5 mM; and 8) TGG + 8% LDL + glutationa reduzida 10 mM. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,25 mL, resfriadas (-0,25 °C/min), mantidas a 5 °C por duas horas e em seguida congeladas (-25 °C/ min) usando uma máquina de congelar TK4000 ® . Imediatamente depois da descongelação (38 °C/30 s), as amostras foram submetidas à análise computadorizada (CASA) para avaliação da motilidade e cinética. A integridade estrutural das membranas plasmática e acrossomal foi analisada utilizando corantes fluor...

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos de diferentes crioprotetores e da centrifugação do sêmen sobre os parâmetros cinéticos e integridade da membrana do sêmen caprino criopreservado. Quatro bodes foram utilizados, e o sêmen foi colhido por meio de uma vagina artificial. Após colheita e aprovação do sêmen, seis pools foram formados, e cada pool foi dividido em oito alíquotas. O plasma foi retirado de quatro alíquotas por centrifugação (1200 g/10 min) e posteriormente diluído; as quatro alíquotas restantes foram diluídas em Tris-gema de ovo padrão, leite padrão, Tris-gema de ovo teste e diluente a base de leite, sem remoção do plasma seminal. Após a diluição, as amostras foram colocadas em palhetas (0,25 mL), congeladas e armazenadas a -196 °C. As amostras foram descongeladas (37 °C/30 s) e avaliadas imediatamente e duas horas pós-descongelação para determinar a cinética e integridade das membranas plasmática e mitocondrial. Foi observada diferença (p <0,05) na manutenção da cinética espermática, integridade da membrana plasmática e potencial mitocondrial entre os grupos centrifugados e não centrifugados e entre os extensores em diferentes momentos. Concluímos que o uso da centrifugação para remoção do plasma seminal afeta positivamente os parâmetros de avaliação do sêmen e que o extensor de gema é mais eficiente quando aplicado com diferentes técnicas de criopreservação, preservando as características desejáveis após a criopreservação do sêmen caprino.

Várias pesquisas têm sido desenvolvidas com o intuito de melhorar a técnica da criopreservação de sêmen em cães. O objetivo deste trabalho foi estabelecer o meio diluidor de congelamento do sêmen canino mais adequado para um protocolo de congelamento realizado em máquina computadorizada, além de otimizar a temperatura de descongelamento. Foram usados cinco cães e coletados três ejaculados/animal. Foram testados os meios Tris-cítrico (G1), Lactose-gema (G2) e INRA 82 (G3) com 5% de glicerol. Alíquotas de sêmen foram diluídas em cada meio e foram congeladas em máquina computadorizada programada para realizar uma curva de resfriamento de-0,5ºC/min, de 25-29ºC até 5ºC, período de equilíbrio de 1h a 5ºC, seguida da curva de congelamento de-20ºC/min, de 5ºC até-120ºC. Foram testadas duas temperaturas de descongelamento: A) 37ºC/30s e B) 52ºC/10s, seguida de 37ºC/30s. Os espermatozóides foram avaliados quanto à motilidade progressiva, morfologia, reatividade ao teste hiposmótico e integridade de membranas avaliadas pelo uso de fluorescência (CFDA/IP). Os meios de congelamento Tris-cítrico e Lactose-gema foram superiores ao meio INRA quanto aos parâmetros de motilidade e morfologia espermática (p<0,05). Não houve diferença entre eles quanto à manutenção da integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas (p>0,05). O descongelamento a 52ºC resultou no aparecimento de maior porcentagem de anormalidades acrossomais que o descongelamento a 37ºC (p<0,05). Com base nos resultados, pode-se concluir que os meios Triscítrico e Lactose-gema preservaram melhor a viabilidade espermática após o descongelamento a 37ºC/30s na curva de resfriamento de-0,5ºC/min e de congelamento de-20ºC/min.