Comparação entre a água de coco em pó (ACP®) e o Tris como diluidores na criopreservação do sêmen de cães

Abstract

ResumoO presente trabalho comparou a água de coco em pó (ACP ® ) com o diluidor Tris na criopreservação do sêmen canino através da avaliação clássica e do teste de termorresistência. Cinco reprodutores caninos foram submetidos a duas coletas de sêmen através de manipulação digital. As frações espermáticas foram avaliadas quanto à sua coloração, volume, concentração, motilidade, vigor e morfologia espermática. As amostras de sêmen foram divididas em duas alíquotas: a primeira foi diluída em Tris e a segunda em ACP ® . Ambos os diluidores continham 20% de gema de ovo. As amostras foram refrigeradas, adicionadas de glicerol (6%), envasadas em palhetas de 0,25mL, criopreservadas em vapores de nitrogênio, e finalmente armazenadas em nitrogênio líquido. Após uma semana, foi realizada a descongelação a 38ºC por 1min em banho-maria, sendo realizadas novas avaliações de motilidade, vigor e morfologia espermática. As amostras foram mantidas a 38ºC no banho-maria e avaliadas aos 15 e 30 min após descongelação. Não foram observadas diferenças significativas entre os dois diluidores no decorrer dos procedimentos de criopreservação e descongelação, bem como durante o teste de termorresistência, em relação às características avaliadas. O Tris e o ACP ® foram eficientes em conservar 50% de espermatozóides móveis e 70% de espermatozóides morfologicamente normais após a descongelação. Assim, o ACP ® pode ser utilizado como diluidor alternativo para a criopreservação do sêmen canino. Palavas-chave:Criopreservação. Sêmen. Cão. Tris. Água de coco. IntroduçãoAtualmente, a criopreservação se configura como uma importante ferramenta para a conser vação do sêmen de reprodutores valiosos de qualquer espécie animal, incluindo o cão. Por esse motivo, a pesquisa científica tem tentado aprimorar os protocolos para a criopreservação de sêmen canino através do uso de diferentes taxas de congelação e descongelação, e um grande número de crioprotetores e diluidores, como a lactose, o Pipes, e o Tris 1 . Este último é o diluidor mais utilizado para a criopreservação do sêmen canino. Ele preserva a energia espermática através da redução do índice de frutólise celular e sua atividade tamponante promove a remoção dos íons hidrogênio produzidos pelo metabolismo da célula 2 .Alguns pesquisadores têm desenvolvido diluidores alternativos de baixo custo, práticos e eficientes. Já há alguns anos, têm sido observados bons resultados na criopreservação do sêmen canino utilizandose diluidores à base de água de coco in natura 3,4 . No entanto, esses diluidores apresentam desvantagens, como a baixa disponibilidade dos frutos com características ideais para a sua fabricação e a impossibilidade de conservação por longo período da água de coco in natura. Ademais, a constituição bioquímica de um fruto pode apresentar pequenas variações em relação aos demais, o que pode diretamente influenciar a ação

Curvas De Resfriamento Do Sêmen Do Varrão Diluído Em Acp®103 Adicionado De Gema De Ovo Em Concentração Fixa

“…Assim, pode-se demonstrar a capacidade da gema de ovo na preservação dessas características, conforme resultados também encontrados por outros pesquisadores (30) . A viabilidade espermática, diferentemente do encontrado em outros estudos (31) , manteve-se semelhante em todas as temperaturas testadas (T1 = 78%; T2 = 68%; T3 = 71%) em D0. Isso sugeriu uma ação da gema de ovo sobre a manutenção da porcentagem de espermatozoides vivos, principalmente em temperaturas mais baixas do que a normalmente utilizada na conservação (17 °C) espermática (Tabela 3).…”

“…Isso sugeriu uma ação da gema de ovo sobre a manutenção da porcentagem de espermatozoides vivos, principalmente em temperaturas mais baixas do que a normalmente utilizada na conservação (17 °C) espermática (Tabela 3). Silva et al (31) , verificaram que o sêmen mantido a 5 °C apresentou, de modo geral, um número de células vivas inferior ao do sêmen mantido a 17 e 12 °C; entretanto, nesse experimento não foi utilizada a gema de ovo no diluente, fato que pode explicar as diferenças encontradas em relação aos resultados deste trabalho.…”

“…Alguns autores (35) , ao testarem diferentes curvas de temperatura (17, 12 e 5 °C) na conservação do sêmen suíno diluído em BTS e Androhep, mas sem agentes crioprotetores, observaram resultados semelhantes quanto à morfologia espermática, o que revelou que, ao se utilizar o diluente ACP, faz-se necessária a adição de substâncias como a gema de ovo para promover uma maior proteção à morfologia espermática, apesar de a análise ser dificultada quanto maior for a sua concentração no meio diluente. Esta dificuldade também foi observada (31) ao se compararem as concentrações de 5, 10 e 20% de gema de ovo adicionada ao diluente água de coco em pó (ACP ® -106) na criopreservação do sêmen canino.…”

Influence of the Addition of Vitamin E in Extenders in the Quality of Fresh Semen Diluted, Refrigerated and Frozen Semen in Dogs of French Bulldog Breed

“…O vigor é uma característica que descreve a qualidade da motilidade espermática [18], avaliado antes da curva e refrigeração, o diluente 2 apresentou melhores resultados quando comparado ao diluente 4, diferindo dos resultados anteriores [19] onde os meios TRIS e ACP 106® foram eficientes em conservar o vigor espermático no escore 4 (1 a 5), pós-descongelação. Os valores obtidos no presente trabalho, para vigor foram inferiores ao já descrito na literatura [19], mas similares aos observados em outra pesquisa [15].…”

“…O vigor é uma característica que descreve a qualidade da motilidade espermática [18], avaliado antes da curva e refrigeração, o diluente 2 apresentou melhores resultados quando comparado ao diluente 4, diferindo dos resultados anteriores [19] onde os meios TRIS e ACP 106® foram eficientes em conservar o vigor espermático no escore 4 (1 a 5), pós-descongelação. Os valores obtidos no presente trabalho, para vigor foram inferiores ao já descrito na literatura [19], mas similares aos observados em outra pesquisa [15]. Vale destacar que a motilidade e o vigor espermáticos são parâmetros suscetíveis a influências externas como temperatura ambiente, condicionamento do animal para a colheita de sêmen, frequência das colheitas de sêmen e idade [9], o que explicaria a divergência dos resultados obtidos nos relatos de diversos autores.…”